高效液相色谱分析操作条件选择-文档资料.ppt

2021/4/6,1,高效液相色谱仪操作条件选择,组员：魏鹏翔、崔建哲、张龙、韩守印、李淼、孙磊。,指导教师：姜洪文,2021/4/6,2,目录,实验目的 实验原理 仪器与试剂 实验步骤 仪器清洗（结束工作）,2021/4/6,3,一、实验目的,掌握色谱分析的原理 掌握高效液相色谱仪的基本结构和工作原理 掌握SY-8100高效液相色谱仪的基本操作步骤 掌握HPLC条件试验的方法以及分离条件的确定,2021/4/6,4,二、实验原理,本次实验采用ODS-C18色谱柱，以甲醇+水混合液为流动相，根据混合物中萘、联苯和菲在固定相与流动相间分配性质的不同，进行分离。不同比例的甲醇+水混合液为流动相，流动相的极性发生改变，因此混合液的分离条件也发生了改变，选择能将混合液中各组分能充分分离并且相对分析时间短的条件，综合确定HPLC法分析萘、联苯、菲的分析条件，完成对混合液的分析。 检测器采用紫外分光（UV）检测器，检测波长为254nm。,2021/4/6,5,三、仪器与试剂,仪器： SY-8100高效液相色谱仪1台 KQ-50B超声波清洗器1台 AP-01P真空泵1台 过滤装置1套 微量注射器50L1支 容量瓶50mL7只 药品： 萘（G.R.）、联苯（G.R.）、菲（G.R.）、甲醇（G.R.）、二次蒸馏水,2021/4/6,6,四、实验步骤,流动相的准备 1、流动相的过滤 安装抽滤装置，选用有机相过滤膜，过滤试剂甲醇；选用无机相过滤膜，过滤二次蒸馏水。,2021/4/6,7,2、流动相的脱气 将盛有过滤好甲醇、二次蒸馏水的试剂瓶分别放于超声波清洗器中，进行脱气处理。,2021/4/6,8,仪器的准备 1、更换流动相 将A泵的输液管放入处理好的甲醇试剂瓶中；B泵的输液管放入处理好的二次蒸馏水试剂瓶中。 2、分别排除A、B两个泵输液管中的气泡,2021/4/6,9,3、开启高压泵A、高压泵B、UV检测器、混合器的电源，打开工作站,2021/4/6,10,分析步骤 1、分别设置两个高压泵的流量，使总流量为F1.00mL/min，分别启动两泵,2021/4/6,11,2、待基线稳定后，完成标样的分析，记录分析所获得的各组分的保留时间、理论塔板数、分离度。数据填表 3、选择最佳流动相配比，调整A、B两泵的流量。待基线稳定后吸取标样，完成分析后建立组分表，再完成试样的分析，测得试样中萘、联苯和菲的含量，完成实验,2021/4/6,12,2021/4/6,13,五、仪器的清理（结束工作）,更换流动相 将流动相重新更换为处理过的甲醇，以利于色谱柱的保护。 清洗“进样阀” 用适量的甲醇清洗进样器、进样阀，以避免样品组分的残留。,2021/4/6,14,THE ENDTHANKS,PPT模板下载： 行业PPT模板： 节日PPT模板： PPT素材下载： PPT背景图片： PPT图表下载： 优秀PPT下载： PPT教程： Word教程： Excel教程： 资料下载： PPT课件下载： 范文下载： 试卷下载： 教案下载：,专业文档最好找专业人士起草或审核后使用，感谢您的下载！,