妇产科学专业毕业论文[精品论文]同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究.doc
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妇产科学专业毕业论文[精品论文]同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究.doc
妇产科学专业毕业论文 精品论文 同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究关键词:先天性心脏病 同型半胱氨酸 PAX-8基因 基因表达 动物模型摘要:目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。正文内容 目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。目的:通过同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病(congenital heart defect,CHD)PAX-8基因表达的关系及叶酸(Folic Acid,FA)、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。 方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组(A组)、低剂量Hcy建模组(B组)、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组(C组)及对照组(D组),每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2 Hcy2mg/10g/d、B组1 Hcy1mg/10g/d、C组2 Hcy2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA0.05mg/10g/d+VitB121mg/10g/d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果:1、 A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均<0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。 2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5、9.17、8.77及0.74,A、B、C三组之间两两比较,p值均>0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均<0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较: B组>A组,A组>C组,p值均<0.01,B组与C组比较p>0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均>0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=0.949,p<0.01。 4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均<0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均>0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均>0.05。 结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。 2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。