二甲双胍、辛伐他汀和痩素对肾上腺皮质癌H295R细胞的增殖和分泌功能的影响.pdf
二甲双胍、二甲双胍、 辛伐他汀和痩素对肾上腺皮质癌辛伐他汀和痩素对肾上腺皮质癌 H295RH295R 细胞的增殖和细胞的增殖和 分泌功能的影响分泌功能的影响 第一部分二甲双胍对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖和分泌功能的影响目 的研究二甲双胍对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖及皮质醇和醛固酮分泌的影 响。方法观察不同浓度(0.0150 mmol/L)的二甲双胍处理 3 天以及 20 mmol/L 的二甲双胍处理不同时间(12 小时7 天)对 H295R 细胞增殖及皮质醇和醛固酮分 泌的影响。 用 MTS 法观察细胞增殖;用化学发光法检测培养液中的皮质醇;用放射免疫 分析法检测培养液中的醛固酮。20 mmol/L 二甲双胍作用 H295R 细胞 24 小时,用 实时荧光定量聚合酶链反应检测 11-羟化酶(CYP11B1)和醛固酮合成酶 (CYP11B2)的 m RNA 表达,用免疫组化法观察-catenin 蛋白染色。 结果浓度5 mmol/L 的二甲双胍处理组,细胞增殖及皮质醇和醛固酮分泌较 对照组无明显差异;而10 mmol/L 的二甲双胍能明显抑制细胞增殖及皮质醇和 醛固酮分泌,并随着浓度增加呈量效关系。20 mmol/L 的二甲双胍处理细胞 12 小 时即能明显抑制细胞增殖,随处理时间延长,这种抑制作用愈明显。 与对照组相比,二甲双胍处理组 CYP11B1 m RNA 的表达明显下降 (P0.05);CYP11B2 m RNA 的表达有下降趋势,但差异无显著性;两组 -catenin 蛋白染色无明显区别。结论二甲双胍能抑制肾上腺皮质癌 H295R 细胞 的增殖、皮质醇和醛固酮的分泌以及 CYP11B1 的表达。 第二部分辛伐他汀对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖和分泌功能的影响目 的研究辛伐他汀对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖及皮质醇和醛固酮分泌的影 响。方法 H295R 细胞分为对照组、Ang II(100 nmol/L)处理组、辛伐他汀(10 mol/L)处理组和 Ang II+辛伐他汀处理组。 分别用 MTS 法观察细胞增殖;用化学发光法检测培养液中的皮质醇;用放射 免疫分析法检测培养液中的醛固酮;用实时荧光定量聚合酶链反应检测 CYP11B1 和 CYP11B2 的 m RNA 表达。结果 Ang II 对 H295R 细胞增殖无明显影响,辛伐他汀 抑制细胞增殖,并且,辛伐他汀与 Ang II 联合处理细胞,这种抑制作用更显著 (P0.05)。 与对照组相比,Ang II 刺激皮质醇和醛固酮分泌及其合成酶 CYP11B1 与 CYP11B2 m RNA 的表达,辛伐他汀抑制皮质醇分泌及其合成酶 CYP11B1 m RNA 的 表达(P0.05);与单独 Ang II处理组相比,Ang II+辛伐他汀组能显著抑制 Ang II 刺激的皮质醇和醛固酮分泌及其合成酶 CYP11B1 与 CYP11B2 m RNA 的表达 (P0.05)。结论辛伐他汀抑制 Ang II 诱导的肾上腺皮质癌 H295R 细胞的皮质 醇与醛固酮的分泌及其合成酶 CYP11B1 与 CYP11B2 m RNA 的表达;辛伐他汀抑制 H295R 细胞增殖,与 Ang II 联合处理细胞这种抑制作用更显著。 第三部分瘦素对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖和分泌功能的影响目的研 究瘦素对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖及皮质醇和醛固酮分泌的影响。方法 H295R 细胞分为对照组和瘦素(100 ng/m L)处理组,分别作用(17 天),用 MTS 法 观察细胞增殖。 瘦素(100 ng/m L)作用 H295R 细胞 24 小时,用化学发光法检测培养液中的皮 质醇;用放射免疫分析法检测培养液中的醛固酮。结果瘦素处理组作用不同时间 细胞增殖较对照组无明显差异。 瘦素作用 H295R 细胞 24 小时,皮质醇分泌无明显变化,醛固酮分泌明显增加 (P0.05)。结论瘦素对肾上腺皮质癌 H295R 细胞的增殖及皮质醇的分泌无影 响,能明显促进醛固酮的分泌。
