基因工程二基因工程的基本操作程序.pdf

现代生物科技专题现代生物科技专题 第一节第一节 基因工程基因工程 （二）（二） 北京四中北京四中 毕诗秀毕诗秀 一、基因工程的概念一、基因工程的概念 二、基因工程的诞生二、基因工程的诞生 三、基因的结构三、基因的结构 四、基因工程的工具四、基因工程的工具 五、基因工程的基本操作程序五、基因工程的基本操作程序 获取目的基因获取目的基因 1.1. 建立基因文库建立基因文库 建立基因组文库 所用的酶：_. 优缺点：_. 适用生物：_. 建立 cDNA 文库 模板：_. 酶_. 需要引物_. 特点_. 基因组文库和基因组文库和 cDNAcDNA 文库的比较文库的比较 文库的类型文库的类型cDNAcDNA文文基基 因因 组组 文文 库库 文库的大小文库的大小 库库 基因中非编码基因中非编码 区区 基因中内含子基因中内含子 基因数目基因数目 2. 2.利用利用 PCRPCR 技术扩增技术扩增 3. 3.化学方法合成目的基因化学方法合成目的基因 形成重组形成重组 DNADNA 分子（基因表达载体的构建）分子（基因表达载体的构建） ( (三三) )目的基因导入受体细胞目的基因导入受体细胞 将目的基因导入微生物细胞 方法：_. (2)将目的基因导入植物细胞 _. 将目的基因导入动物细胞 _. 目的基因的检测和表达目的基因的检测和表达 1.1.目的基因的检测目的基因的检测 利用标记基因筛选 _. (2)利用基因探针检测 _. 利用基因的插入失活(特殊菌落)检测 2.2. 目的基因的表达目的基因的表达 (1)抗体抗原杂交 通过特定性状判断 总结：基因工程的操作步骤总结：基因工程的操作步骤