c-fos基因表达与应激性胃黏膜损伤的相关性.doc

c-fos 基因表达与应激性胃黏膜损伤的相关性 08-01-15 13:18:00 编辑： studa20作者：宋政军周晓丽 画伟 苌新明 李长顺 【摘要】 目的 探讨 c-fos 基因表达在心理应激性胃黏膜损伤发生机制 中的作用。方法 利用光电刺激仪，建立心理应激动物模型。大鼠随机分为 3 组，对照组 (C) 、规则光组(R)和不规则光组 (I) 。计数胃黏膜损伤指数 (UI) ，观 察胃黏膜组织学变化；采用比色法测定胃黏膜和血液中丙二醛 (MDA)的水平；免 疫组化法观察胃黏膜中 c fos 基因的表达情况。结果 R组和 I 组的 UI 值 明显高于对照组 (P<0.05) ，且随着应激时间的延长而逐渐升高；胃黏膜中 c fos 表达水平随应激时间的延长而升高， R组与 I 组明显高于对照组；c fos 表达水平与黏膜 MDA含量呈正相关 (r=0.693 ，P<0.05) 。结论 心理应激性 胃黏膜损伤程度随应激时间的延长和严重程度的增加而加重；心理应激下胃黏 膜 c fos 表达可能与氧自由基大量生成有关。关键词】 心理应激；丙二醛； c fos 基因Correlation between cfos gene expression andgastric mucosalesion induced by psychological stress in ratsABSTRACT: Objective To study relationship between cfos geneexpression and oxygen free radical in gastric mucosa lesion induced by psychological stress in rats. MethodsThe rats were divided into3 groups randomly: regular flashing light group (group R), irregular flashing light group (group I ) and control group (group C). The contents of malonaldehyde (MDA), and gastric ulcer index (UI) were measured after stress in different groups. The cfos geneexpression in gastric mucous was detected by immunochemistry. Results UI increased significantly in group I and group R.The content of MDA was increased more significantly than that of the controls. The cfos expression in gastric mucosa wassignificantly correlated with MDA content (r=0.693, P<0.05).Andthe expression level was increased gradually following the stress time. Conclusion Under the psychological stress condition,gastric mucosa lesi on is aggravated with the prolonged time. The cfos expression in gastric mucosa is correlated with oxygen free radicals. And cfos expression may be induced by oxygen freeradicals.KEY WORDS: psychological stress; malonaldehyde (MDA); cfosgene随着社会的发展，职业竞争、工作压力等均可引起应激反应，心理应激对 机体造成的危害越来越受到重视 1 。为此，探讨心理应激性胃黏膜损伤的发病 机制，对于临床治疗和预防心理应激性胃黏膜损伤具有重要意义。近年来，研 究发现应激大鼠胃组织内 c fos 基因表达升高。在本研究中，我们主要探讨 c fos 基因与应激性胃黏膜损伤的发生的关系，为临床治疗提供理论依据。1 材料与方法1.1 实验动物 Sprague Dawley（SD）雄性大鼠 144 只，体重 180- 220g，购于西安交通大学医学院实验动物中心。室温 （20 ±2） ，自然光照 , 大 鼠标准饲料，自由进水。1.2 试剂及仪器 丙二醛 （MDA）测试盒购自南京建成生物工程研究所； c fos 免疫组化试剂盒购自西安宝信生物工程公司。光电刺激器由西安交通大 学公共卫生系研制，刺激电流由 SMI 1 型动物实验仪供给，电流强度 1.0mA，电压 80V，持续 2s。1.3 方法 参照文献 2 制备心理应激动物模型。实验分 3 期进行。 期（ 适应期， 1-7d） ：所有动物每天放置实验盒内 25min，适应环境并筛选，动 物一般在第 4 天自动钻入实验盒，不钻者剔除，以消除实验盒对大鼠造成的应 激的影响。期 （心理应激形成期， 8-14d） ，从第 8天起大鼠随机分为 3组，即 对照组（C组） 、规则光组（R组）和不规则光组 （I 组），其中 R组和 I 组又依应激 天数分为 2、4、6、8d 4 个亚组，每个亚组 16只大鼠。 C组不给光电刺激，每 天仅在实验盒内呆 20min； R 组给予规则光电刺激，即光照和电刺激的间隔为 6s，两次光照的间隔为 20s，总时间为 20min；I 组给予不规则光照和电击，即 光照和电击的先后次序、间隔时间是随机的，但在 20min 内接受的总刺激同 R 组。期 （ 心理应激记忆期， 15d 以后） ，除不给电刺激外，余同期。参照 Guth 评价胃黏膜损伤指数 （ulcer index, UI） ，即胃黏膜损伤面积< 1mm记1分； 1-2mm记2分；2-3mm记 3分； 3-4mm记4分；> 4mm即分段测 量，全胃得分之和为损伤指数。用 752 2 型分光光度计比色测定血清及胃黏 膜中 MDA活性，免疫组化染色检测胃黏膜中 c fos 基因的表达。1.4 统计学处理 实验结果用均数±标准差表示，采用 SPSS10.0统计 软件分析。两组间均数比较采用 t 检验，取双测 0.05 或 0.01 ， P<0.05 或 P<0.01 为差异有统计学意义。2 结果2.1 应激大鼠胃黏膜损伤指数 （UI） 随着应激天数的增加，胃黏膜损伤 程度逐渐加重， R组、 I 组胃黏膜损伤较对照组明显 （P<0.05） 。在同一时间点 I 组较 R组损伤明显， I 组 UI高于 R组。两组在第 6天胃黏膜损伤最重 （表1，图 1、2、3）。表 1 应激大鼠胃黏膜损伤指数 （UI） 的比较（略）Table 1 The comparison of gastric ulcer index on stressed rats *P<0.05, *P<0.01 vs. 2d×400)图 1 对照组胃黏膜的结构(略)Fig.1 Gastric mucous membrane structure of control group (图 2 心理性应激 6d R 组胃黏膜的结构(略)Fig.2 Gastric mucous membrane structure of regular flashing light group after 6 days ( ×400)图 3 心理性应激 6d 组胃黏膜的结构(略)Fig.3 Gastric mucous membrane structure of irregular flashing light group after 6 days (×400)