邻二氮杂菲分光光度法测定铁 实验报告.docx

.·分析化学实验报告实验题目：邻二氮杂菲分光光度法测定铁学 院： 专 业： 食品科学与工程 班 级： 姓 名： 学 号： 同组者姓名： 1 实验目的1. 了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法2. 掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法3. 了解722型分光光度计的构造和使用方法2 实验原理1. 光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。2. 在PH=2-9的条件下，Fe2+与邻二氮杂菲（o-ph）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下： 此配合物的lgK稳 =21.3 摩尔吸收系数510 =1.1×104 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe2+ 还原成Fe3+.其反应式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH· HC1 2Fe 2+ +N 2 +2H 2 O+4H + +2C1- 测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。3、 实验仪器分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶四、实验步骤1. 条件实验（1） 吸收曲线的测绘准确吸取20 g·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加入1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。以水稀释至刻度，摇匀。放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。（2） 邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性用上面溶液继续进行测定，其方法是在最大吸收波长510 nm处，每隔一定时间测定其吸光度，及再加入显色剂后立即测定一次吸光度，经10、20、30、120 min后，再各测一次吸光度。 （3）显色剂浓度实验 取50 mL容量瓶7只，编号。每只容量瓶中准确加入20 ug·mL-1铁标准溶液5 mL以及1mL5%盐酸羟胺溶液，经2 min后。再加入5 mL1 mol·L-1NaOAc溶液，然后分别加入0.1%邻二氮杂菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0 mL、1.5 mL、2.00 mL、3.0 mL和4.0 mL，用水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计上，用最大吸收波长510 nm、1 cm比色皿，以水为参比，测定上述溶液的吸光度。2.铁含量的测定（1）标准曲线的绘制 取50mL容量瓶6只，编号。分别吸取20 g·mL-1铁标准溶液2.0mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL和10.0 mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加标准溶液（配制空白溶液，作参比）。然后各加5%盐酸羟胺溶液，摇匀，经2 min后，再各加5 mL1 mol·L-1NaAc溶液及3 mL1 g·L-1邻二氮杂菲溶液，以水稀释至刻度线，摇匀。放置10 min，在分光光度计上，用1 cm比色皿，在510 nm处，测定各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。（2） 未知液中铁含量的测定 吸取5ml未知液代替标准溶液，其他步骤均同上测定吸光度。由未知液的吸光度在标准曲线上查出5ml未知液中的铁含量，然后以每毫升未知液中含铁多少微克表示结果。五、记录与计算（1） 吸收曲线的测绘波长吸光度A5705505305205105004904704504300.0670.1520.3450.4280.4540.4400.4260.4020.3430.297讨论：从曲线可以看出，在一定范围内，当波长较小时，随波长增加吸光度增加。测定的适宜波长是510nm。（2）邻二氮杂菲亚铁配合物的稳定性放置时间05101520稳定性 0.3890.3900.3890.3890.389讨论：从曲线可以看出，配合物稳定性较好。(3) 显色剂用量的测定容量瓶号显色剂量/mL吸光度A12345670.30.61.01.52.03.04.00.1250.2350.3860.4180.4280.4150.424讨论：当显色剂较小时，随显色剂含量增加吸光度增加，当加入显色剂为1.5ml吸光度最大。所以显色剂的适宜加入的量为1.5ml（4） 标准曲线的测绘与铁含量的测定试液编号标准溶液的量V/mL总含铁量m/ug吸光度A12345602.04.06.08.010.0040801201802000.000 0.1950.357 0.4790.6780.831 未知液5.0122.30.498讨论；由测定的未知液吸光度为0.498通过函数关系可得铁的含量为122.3m/g讨论：1.再用分光光度计测量显色剂量不同时的吸光度时应注意什么？答：再用分光光度计测量显色剂量不同时的吸光度时，应保持用一个比色皿测量，这样可以减小比色皿自身对实验产生的影响。2.如用配置已久的盐酸羟胺溶液，对分析结果将带来什么影响？答：盐酸羟胺是用来将还原成的，如果配制已久，还原能力减弱，就会使部分铁离子得不到还原，造成分析结果偏小3.邻二氮杂菲分光光度法测定铁的适宜条件是什么？答：测定时，要控制PH=5左右较好，弱酸度较高，反应速度较慢，酸度较低，会使二价铁离子水解，影响显色4. 为什么要用邻二氮菲显色后再测定？答：因为水中微量组分较少，对光的吸收很小，无法测出其吸光光度，加入显色剂后，与被测组分形成络合物，摩尔吸收系数较高，吸光明显，容易测定。；.