乙肝表面抗原确证试验作业指导书.docx
XXXXXX 医院检验科免疫室 分析项目作业指导书Elecsys E 170/E 411乙肝表面抗原确证文件编号：LAB OP- MY020第1页，共3页版本：A/0生效日期：2008-02-011 .分析原理标本先用证实试剂和对照试剂预处理，随后再用HBsA试验才测。HBsAg日性质控 品2同时平行测定以核对操作。标本的预处理： ElecsysHBsAg试验重复呈现有反应性的标本，用证实试剂和对照试剂平行处 理，混匀，温育。证实试剂中过量的抗HBsA抗体中和标本中的HBsAg在随后进 行的ElecsysHBsAg式验中，标本的Cutoff-指数（COD将比原值降低。HBsA就验： 第1步：二种经预处理的标本、生物素化的抗 HBsA弹克隆抗体和钉（Ru）标 记的抗HBsA鲜克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉 亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物 质被清洗液洗去。电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。Elecsys自动将标本产生的光电信号与从抗 HBsAg1标液彳#出的Cutoff值相比较。 随后进行人工核查试验的有效性和结果的解释。2 .标本要求Elecsys HBsAg试验重复呈现有反应性的人血清或血浆标本。标本采集和准备与 Elecsys HBsAg 试验相同。3 .试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试齐I：瓶1:证实试剂（黑盖），2瓶，1.3ml。抗HBsAg>200IU/l,人血清。含 防腐剂。瓶2:对照试剂（白盖），2瓶，1.3ml。人血清，抗HBsAg<3IU/l。含防 腐剂。校准品：质控品：Elecsys HBsAg质控品 1 和2 （PreciControl ）货号 11876309其他所需材料： 11820532, 100人份的 Elecsys HBsAg试齐盒 Elecsys通用稀释液 货号03183971 Elecsys1010 或201网析仪 Elecsys 系统缓冲液（ProCell ）货号 11662988 Elecsys 测量池清洗液（CleanCell ）货号 11662970 Elecsys 清洗添加剂（SysWash 货号 11930346 Elecsys 系统清洗剂（SysClean）货号 112985004 .仪器和校准使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产 日ecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学XXXXXX 医院检验科免疫室 分析项目作业指导书Elecsys E 170/E 411文件编号：LAB OP- MY020第2页，共3页版本：A/0生效日期：2008-02-01发光免疫自动分析仪仪器校准：定标次数和校正方法与Elecsys HBsAg试剂相同5 .操作方法标本的预处理：标本加样体积的选择取决于相应标本在 ElecsysHBsAgi式验中所得的CO值的高低。以下是各种不同体积的标本分别加入 日ecsys标本杯中：对于COI<7.0的有反应性标本180 l L标本+20仙l证实试剂180 l L标本+20仙l对照试剂 或对于7.0 < COK 30的有反应性标本100口标本+100卜l证实试剂100卜l标本+100/对照试剂 或对于COI>30勺有反应性标本，标本先用Elecsys通用稀释液作1: 2嘛释。1001 l稀释的标本+100仙l证实试剂100卜l稀释的标本+100卜l对照试剂平行测定PreciControl HBs Ag 2,以便对操作进行核对：180 卜 l PreciControl HBs Ag 2+20 l 证实试剂180 卜 l PreciControl HBs Ag2+20 a l 对照试剂充分混匀，将以上几种反应物15 25度温育30-60分钟或28度温育过夜。日ecsysHBsAg测定：将预处理标本置于仪器的标本区，记录标识数据。按日ecsysHBsAgi式剂操作说明书进行检测。定标：定标次数和校正方法与 日ecsys HBsAg试剂相同。6 .质量控制必须与标本同时平行测定 Elecsys PreciControl HBs Ag 2。根据用户需要进行校正。对于Elecsys HBs Ag试验，质控按相应的说明书进行。7 .计算方法对每一个标本，仪器会自动根据 HBsAgt标液cal1和cal2的测定结果计算出cutoff值。报告结果，分有反应性或无反应性以及cutoff指数（COI）巾本信号 值/cutoff等几种形式。证实试验中所加的标本体积需参考CO Io8 .参考范围9 .分析性能10 .干扰因素由于钩状效应，HBsAgft度高于1mg/ml或550000IU/ml时，Elecsys HBsAg试验的 cutoff指数将<30。这是因为在给定的加样体积下，证实试剂未能充分中和掉标 本中的抗原，因而造成假阴性。由于稀释的缘故，这些标本与对照试剂反应的CO值高于原来ElecsysHBsAg式验测出的CO值。从这一点可以 鉴别有钩状效应的标本。这些标本必须在更高的稀释度（1: 100）下重新检测。干扰因素与日ecsys HBsA试验说明书中“干扰因素” 一节相同。日ecsys HBsAg检测结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。11 .结果解释Elecsys E 170/E 411文件编号：LAB OP- MY020第3页，共3页版本：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX 医院检验科免疫室 分析项目作业指导书试验有效性的核对评估开始以前，必需核对试验的有效性。除了满足HBsA试验所要求的条件外，还必须满足以下几条标准： PreciControl HBs Ag 2 与证实试剂反应的 CO同PreciControl HBsAg2 与对照 试剂反应的CO之比必'须小50%(<50% 。如>50%必须检查试验的条件，有必要 的话，用新鲜的试剂重新测定标本。评价标本测定有效性的指标是：标本与对照试剂反应的CO必须>=1.0;COI<1.0 提示稀释度太高，需用不稀释或降低稀释度稀释的标本重做。标本检测结果的解 释和评估。为了证实标本的阳性结果，标本与证实试剂反应的CO同标本与对照试剂反应的CO之比必'须小50% (<50% ,其中标本与又1照试剂反应的 CO必 须 >=1.0 012 .临床意义13 .参考文献编写：审核：批准:批准日期：年 月 日
