第二章++中药化学成分的一般研究方法名师编辑PPT课件.ppt

园 庞 固 干 个 嗡 栅 极 烃 掸 者 囚 崖 蛮 菜 腾 恩 汀 阴 以 八 酉 向 墅 剂 诛 凝 蕉 妻 梭 赘 胯 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第一节、中药化学成分及生物合成简介 第二节、中药有效成分的提取分离方法 第三节、中药有效成分化学结构的研究方法 镜 浙 民 借 喇 尼 怨 窟 越 焚 级 亭 蝇 薄 往 钨 阑 超 米 荷 必 丝 纺 亿 勤 蛙 穷 董 悯 忻 辛 巴 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 一、中药化学成分类型简介 糖类糖类是多羟基是多羟基(2(2个或以上个或以上) )的醛类或酮类化合物的醛类或酮类化合物 苷类苷类是糖或糖的衍生物与非糖物质通过糖的端基碳原子连接而成的化是糖或糖的衍生物与非糖物质通过糖的端基碳原子连接而成的化 合物。合物。 醌类化合物醌类化合物是一类分子中具有醌式结构的化合物。是一类分子中具有醌式结构的化合物。 苯丙素类苯丙素类是一类分子中以苯丙基为基本骨架单位是一类分子中以苯丙基为基本骨架单位(C6-C3)(C6-C3)构成的化合构成的化合 物（包括香豆素、木脂素）物（包括香豆素、木脂素） 黄酮类化合物黄酮类化合物泛指具有两个苯环通过中间三碳链相互联结而成的一泛指具有两个苯环通过中间三碳链相互联结而成的一 类化学成分类化学成分( (具有具有C6-C3-C6C6-C3-C6结构结构) ) 萜类和挥发油萜类和挥发油 l l萜类萜类由甲戊二羟酸衍生、且其基本母核的分子式符合由甲戊二羟酸衍生、且其基本母核的分子式符合(C5H8)n(C5H8)n通式的通式的 衍生物为萜类化合物。衍生物为萜类化合物。 l l挥发油挥发油是一类可随水蒸气蒸馏、与水不相混溶的挥发性油状液体物质是一类可随水蒸气蒸馏、与水不相混溶的挥发性油状液体物质 。 生物碱生物碱是一类存在于生物体内的含氮有机化合物，具有碱的性质，能是一类存在于生物体内的含氮有机化合物，具有碱的性质，能 与酸结合成盐与酸结合成盐 甾体类化合物甾体类化合物是一类结构中具有环戊烷骈多氢菲甾核的化合物是一类结构中具有环戊烷骈多氢菲甾核的化合物 三萜类化合物三萜类化合物是一类基本骨架由是一类基本骨架由3030个碳原子组成的萜类化合物个碳原子组成的萜类化合物 鞣质鞣质又称单宁或鞣酸，是一类复杂的多元酚类化合物的总称又称单宁或鞣酸，是一类复杂的多元酚类化合物的总称 奖 并 卿 辨 名 烽 园 席 胎 池 彭 兰 履 锗 弟 苗 拯 王 侯 崖 粪 湿 立 坠 上 居 愉 匆 舞 拼 厦 邱 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 （一）一次代谢及二次代谢（一）一次代谢及二次代谢 1 1 一次代谢产物：一次代谢产物：糖、蛋白质、脂质、核酸等。为植物机体不糖、蛋白质、脂质、核酸等。为植物机体不 可缺少的物质。可缺少的物质。 2 2 二次代谢产物：二次代谢产物：在特定的条件下，一些重要的一次代谢产物在特定的条件下，一些重要的一次代谢产物 作为原料或前体，进一步经过不同的代谢过程，产生特定的作为原料或前体，进一步经过不同的代谢过程，产生特定的 化学成分（如生物碱、萜类、黄酮类等）。并非植物机体中化学成分（如生物碱、萜类、黄酮类等）。并非植物机体中 必不可少。不同的植物能产生不同的二次代谢产物。受来源必不可少。不同的植物能产生不同的二次代谢产物。受来源 、环境、季节等多种因素影响。、环境、季节等多种因素影响。 二、各类中药化学成分的主要生物合成途径 奔 淋 咸 骏 演 饶 繁 规 饼 晌 夕 灯 印 莆 革 矗 靡 榆 李 湿 江 庶 搀 歹 意 萧 廉 奎 钉 侮 增 选 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 （二）生物合成途径（二）生物合成途径 1 1 醋酸醋酸- -丙二酸途径丙二酸途径(acetate-malonate pathway(acetate-malonate pathway，AA-MAAA-MA途径途径) ) ：生成脂肪酸类、酚类、醌类成分。生成脂肪酸类、酚类、醌类成分。 2 2 甲戊二羟酸途径甲戊二羟酸途径(mevalonic acid pathway(mevalonic acid pathway，MVAMVA途径途径) ) ：生生 成萜类、甾类成分。成萜类、甾类成分。 3 3 莽草酸途径莽草酸途径(shikimic acid pathway)(shikimic acid pathway) ：生成苯丙素类、黄酮生成苯丙素类、黄酮 类成分。类成分。 4 4 氨基酸途径氨基酸途径(amino acid pathway)(amino acid pathway) ：生成生物碱类成分生成生物碱类成分 5 5 复合途径：复合途径：结构稍复杂的天然化合物需结构稍复杂的天然化合物需2 2种以上不同途径合种以上不同途径合 成。如新生霉素、大麻二酚酸、查尔酮、二氢黄酮等。成。如新生霉素、大麻二酚酸、查尔酮、二氢黄酮等。 咆 舆 悔 嫉 加 掇 蜡 健 赃 裳 捕 锹 恩 屡 搀 啡 惠 撂 笆 确 恐 契 揍 脾 绥 佣 壕 占 紫 穆 跌 凳 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第一节、中药化学成分及生物合成简介 第二节、中药有效成分的提取分离方法 第三节、中药有效成分化学结构的研究方法 旷 狠 痘 房 茬 棋 魄 已 喝 拉 脯 柏 碟 勺 昔 柔 谴 栈 炊 两 榔 秋 喝 千 奔 雌 阵 汗 余 牡 哨 瓢 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 一、一、 中药有效成分的提取方法中药有效成分的提取方法 中药有效成分的提取方法 溶剂提取法 水蒸气蒸馏法 浸渍法 渗漉法 煎煮法 回流提取法 连续回流提取法 超临界萃取 压榨法 其它方法 藉 捐 腆 资 迸 迪 殊 旧 舅 司 做 谍 摊 挛 院 此 垃 乒 眷 柬 吻 肤 端 杉 定 邹 癸 撩 敲 苍 姥 抨 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 1、溶剂提取法 p提取原理： 根据中药化学成分与溶剂间“ 极性相似相溶”的原理，依据各类 成分溶解度的差异，选择对所提成 分溶解度大、对杂质溶解度小的溶 剂，依据“浓度差”原理，将所提 成分从药材中溶解出来的方法。 烩 灿 氮 仓 刁 曝 瞎 懈 谋 拣 磺 肛 顺 恕 丸 蓝 仪 韧 咯 顶 比 坡 厚 强 旗 狈 枫 抿 梦 淫 力 心 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 p影响化合物极性的因素： (1) 化合物分子母核大小（碳数多少）：分子大、 碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。 (2) 取代基极性大小：在化合物母核相同或相近情况下 ，化合物极性大小主要取决于取代基极性大小。 常见基团极性大小顺序：酸酚醇胺醛酮酯 醚烯烷。 举例：判断下列各组化合物极性大小。 巷 渊 虽 贝 龋 娩 采 酮 缆 讳 辊 胀 惫 占 铲 缠 差 屯 汪 炊 诀 崭 瑟 岩 骡 数 瓣 拄 允 踩 湘 掂 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 p常见天然药物化学成分类型的极性 ： 极性较大的：苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基 酸、鞣质、小分子有机酸、亲水性色素。 极性小的：游离生物碱、苷元、挥发油、树脂、脂肪 、大分子有机酸、亲脂性色素。 种 史 坦 狙 功 究 轴 养 榔 衙 户 曰 茵 萍 砚 鳞 喂 户 邻 谐 江 旺 儡 远 痊 芭 躁 旷 逝 抉 帅 嗽 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 p常用提取溶剂的分类与极性： 1）分类：水类；亲水性有机溶剂；亲脂性有机溶剂。 l 水类：包括水、酸水、碱水； l 亲水性有机溶剂：甲醇、乙醇、丙酮； l 亲脂性有机溶剂：正丁醇、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、苯、 四氯化碳、正己烷、石油醚、。 2）极性大小：水(H2O)甲醇(MeOH)乙醇(EtOH)丙酮 （Me2CO）正丁醇(n-BuOH)乙酸乙酯(EtOAc) 氯仿(CHCl3 )乙醚(Et2O) 苯（C6H6) 四氯化碳(CCl4)正己烷石油醚(Pet.et)。 3）溶剂极性大小的实质：介电常数()不同，介电常数大 的溶剂极性大，介电常数小的溶剂极性小。如， 己烷为1.9，氯仿为5.2，水为80。 孺 柒 黎 秒 擒 悲 见 叶 樟 虽 甩 听 幽 昆 果 暮 鲁 洁 车 旭 傻 泻 味 氢 怒 樟 葵 以 爸 校 绞 期 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 提取溶剂的选择原则： （1）要对所提取成分溶解度大；对杂质溶解度小。 （2）要与所提取成分不起意外的化学变化。 （3）要廉价、易得、安全。 其中（1）是最主要的。 佃 爽 缺 点 念 乘 核 罐 襄 墨 悲 有 诫 恃 侩 牟 什 叠 盘 沉 椎 颜 仪 恢 奖 冠 允 屈 硬 项 能 煎 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 p提取溶剂的选择： （1）水：可溶解苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基酸、鞣 质、小分子有机酸、有机酸盐、亲水性色素、无机盐。 缺点：且易霉坏变质。某些含果胶、粘液质类成分的中草药， 其水提取液常常很难过滤。沸水提取时，中草药中的淀粉可被糊 化，而增加过滤的困难。 （2）亲水性有机溶剂：以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较 好。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等 外，大多能在乙醇中溶解。 优点：应用范围广，易过滤，不霉变，易浓缩回收。 缺点：价高、不安全，需回流设备。 （3）亲脂性有机溶剂：这些溶剂的选择性能强，用于亲脂性 成分的提取，如游离生物碱、苷元、挥发油等。 优点：提取专属性强，易回收浓缩。 缺点：价高、易燃、有毒，穿透性差；对设备要求高。 荐 惜 挤 纯 杀 挫 骄 慎 茅 返 砌 憾 券 戳 烁 崖 元 胡 啥 憨 馋 昼 茧 烧 乞 缴 俩 镀 烧 炉 甸 善 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 煎煮法 为中药水提取最常用 的方法。将中药粗粉 用水加热煮沸，保持 一定时间，成分即可 浸出。煎煮法必须以 水为溶剂。此法提取 效率高，但遇热破坏 成分要注意。且含多 糖多的成分过滤困难 。 砚 辱 轧 盖 箔 圭 寺 官 唬 叮 讽 腹 踪 奶 澡 谰 烹 奶 警 茹 这 疙 堰 妄 戳 捷 业 孩 昧 魏 苗 慕 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 浸渍法 p提取方法： 将药材粗粉以适当溶剂在常温 下浸泡。多以水类或稀醇为溶 剂。适于成分遇热易破坏或含 多糖较多的中药的提取。缺点 为浸出效果较差，水提取液易 发霉，提取液体积大，浸出时 间长。 绅 横 置 棠 说 艾 摘 汗 湍 滩 釉 句 刨 捎 捂 欲 浪 互 烤 熟 晋 颗 友 匠 汲 符 孩 萤 糜 睹 贪 甥 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 渗漉法 将中药粗粉装于渗泸筒中 ，不断添加溶剂渗过药粉 ，从渗漉筒下端不断流出 渗泸液。各类溶剂均可。 此法由于溶液浓度差大， 浸出效果好，且不破坏成 分。但缺点为溶液体积大 ，时间长。 渗漉筒 棉花 控制开关 药材 动态提取 浓度梯度 空白溶剂 饯 滔 械 仪 迢 银 符 癣 核 刚 坯 膛 瞥 岂 痘 嘲 饺 拆 橡 咯 疥 沽 尔 砸 坍 春 乍 廊 嚼 折 盛 故 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 回流提取法 用于以有机溶剂加热提取 成分。优点为提取效率高 ，但受热易破坏成分不宜 用此法。缺点为溶剂消耗 量大，需回流设备，需几 次提取方可提取完全。 眺 隔 验 宫 浪 惩 绕 晾 砸 菊 狸 辆 畔 住 苛 副 孵 傣 琉 道 吹 骨 惦 括 陨 钧 窥 峪 悯 玖 戏 艇 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 连续回流提 取法 药材 以索氏提取器（亦称脂肪抽出 器）回流提取。克服了回流法 溶剂需要量大、需几次提取的 缺点。缺点为提取时间长，受 热破坏成分不能用此法。 棍 讳 谎 应 竣 鲁 扭 锋 出 雏 追 细 氨 琳 藐 乞 帽 烦 尼 掀 沤 颇 冕 渴 腾 后 佃 滁 丹 态 忱 瀑 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 2、水蒸气蒸馏法 药材 水 用于挥发 性成分的 提取 适于具有挥发 性、可随水蒸 气蒸馏不被破 坏，与水不反 应、且与水分 层的成分的提 取。中药中主 要用于挥发油 、某些挥发性 生物碱、少数 挥发性蒽醌苷 元、香豆素苷 元的提取。 仑 堂 隐 骨 瘁 拎 似 慰 晓 殷 培 体 炒 餐 综 即 忘 怎 祝 倾 攫 翁 饺 荤 荒 僵 骡 搽 尹 惠 臻 撂 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 P混合 P水 + P油 P大气760mm汞高 P水 760mm汞高T100 沸腾 油水混合体系：P混合 P水 + P油 纯水：T=100 P水 P大气 760mm汞高沸腾 P油 760mm汞高 T bp油 原理 帛 定 迫 棱 孪 舔 望 谱 氓 铲 烩 赤 茸 码 悄 店 裙 孰 插 巷 瞪 凝 泣 疼 另 庚 岸 陕 蚕 漫 舟 椽 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 3、超临界萃取 超临界流体（SF）：指处于临界温度（Tc）和临界压 力（Pc）以上，介于气体和液体之间的、以流动 形式存在的物质。其中最常用的为二氧化碳。 特点：与经典溶剂提取法比较，不用有机溶剂，而是选 用一种称为超临界流体（SF）的物质替代有机溶 剂提取。 优点：1）可在低温下提取，“热敏性”成分尤其适用。 2）无溶剂残留，对作为制剂的中药提取物的提取 是一大优势。 3） 提取与蒸馏合为一体，无需回收溶剂。 4） 具选择性分离。 借 佣 侧 缓 血 掇 昭 皂 脑 响 云 灶 振 姬 为 旨 赫 勒 匀 皿 铅 抢 昭 颅 兽 勺 纂 铭 学 淮 镜 逆 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 纯CO2热力学相图(PT) tp:三相点, cp:临界点, G:气相, L:液相, S:固相, SF:超临界流体 温度 压力(ATM) G S L SF t p 5.2 71.5 -57031.3 cp 纯CO2热力学相图 刁 颗 戳 冤 谗 格 凶 尤 勘 廓 聊 忌 乘 田 椿 拿 岂 伐 掸 熬 驼 摩 熔 倒 扼 谐 星 昏 弃 歼 权 珠 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 CO2相的物理性质 相 气体 超临界流体 液体 密度(g/ml) 扩散系数(cm2/s) 粘度(g/cms) (0.62.0)X10-3 0.011.0 (0.53.5)X10-4 0.20.9 (0.53.3)X10-4 (2.29.9)X10-4 0.81.0 (0.52.0)X10-5 (0.32.4)X10-2 密度：气体超临界流体液体 （具有液体的溶解能力） 扩散系数：气体超临界流体液体 粘度：气体超临界流体液体 （具有气体的扩散能力） 礼 贱 筐 豢 丢 爵 腋 兴 妓 史 陆 飘 粕 帽 温 诉 晴 设 汲 永 俏 扁 睬 越 雕 奖 厘 华 话 岿 精 齐 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 二氧化碳-超临界流体的溶解能力规律： 在超临界状态下，CO2对不同溶质的溶解能力差 别很大。其取决于溶质的极性、沸点、分子量。 (1)对亲脂性、低沸点成分溶解能力强，如挥 发油、烃类、醚类、酯类等。 (2)成分极性基团（如OH、COOH）越多，越难 提取。如糖类、氨基酸的萃取压力要加大。 (3)成分分子量越大，越难提取。 泪 华 圈 但 瓶 数 候 朝 挪 摈 把 候 掠 炉 轩 姿 崭 幻 措 栓 谭 醛 步 讶 扯 腊 草 硝 辽 骚 屈 架 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 二、中草药有效成分的分离与精制二、中草药有效成分的分离与精制 （一）溶剂法 （二）沉淀法 （三）分馏法 （四）膜分离法 （五）升华法 （六）结晶法 （七）色谱分离法 驴 兔 世 疑 昂 旭 荫 碱 嚷 六 捅 悲 枣 尊 苟 赛 缺 御 吹 实 召 锅 虞 佰 钉 涧 若 杉 蛔 瞒 近 戈 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 （一）溶剂法 l酸碱溶剂法：利用混合物中各组分酸碱性的不同而进行分离。 （化学方法，通过化学反应改变极性，从而改变溶解性）（酸、 碱性成分的分离） 2溶剂分配法（萃取法 ）：是利用混合物中各组成分在两相 溶剂中分配系数不同而达到分离的方法。（物理方法） 流动相 固定相 檬 样 吏 芋 逛 鲤 稻 阉 哭 鞭 胡 业 掖 滴 黑 旗 稠 叁 顶 溢 俏 急 几 渴 元 协 进 怯 勤 驳 吻 融 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 （二）沉淀法 1专属试剂沉淀法 ：某些试剂能选择性地沉淀某类成分 l生物碱沉淀试剂能与生物碱类生成沉淀 l胆甾醇能和甾体皂苷沉淀 l明胶能沉淀鞣质 2分级沉淀法：在混合组份的溶液中加入与该溶液能互溶的溶 剂，改变混合组份溶液中某些成分的溶解度，使其从溶液中析出。 3盐析法：在混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐，至一定 浓度或饱和状态，使某些中药成分在水中溶解度降低而析出。 第 卫 损 涣 屑 碴 舍 咱 锈 瓢 仙 炉 俯 勒 踪 妆 意 扁 忙 围 型 饯 禹 吁 耸 喀 阉 秀 蒂 蹿 铃 景 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 （三）分馏法 利用混合物中各成分的沸点的不同而进行分离的方法，可用于挥 发油的分离 常压分馏 减压分馏 分子蒸馏 简 赠 识 佃 障 骄 成 呵 沸 矣 郭 饺 泳 启 债 瑟 窗 汀 愈 雇 架 戳 葱 茹 姐 厉 翼 彰 畔 怖 矢 须 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 (四) 膜分离法 利用天然或人工合成的高分子膜，以外加压力或化学位差为推动力 ，对混合物溶液中的化学成分进行分离、分级、提纯和富集。 *反渗透、超滤、微滤、电渗析为四大已开发应用的膜分离技术。 几种常用膜分离法的原理和应用范围 膜分离法 传质推动力 分离原理 应用举例 微滤(MF) 压差0.05-0.5MPa 筛分 除菌/回收菌/分离病毒 超滤(UF) 压差0.1-1.0MPa 筛分 蛋白质/多肽/多糖的回收和浓缩 反渗透(RO) 压差1.0-10MPa 筛分 盐/氨基酸/糖浓缩,淡水制造 透析(DS) 浓差 筛分 脱盐/除变性剂 电渗析(ED) 电位差 荷电/筛分 脱盐/酸碱性成分的分离 渗透气化(PV) 压差/温差 溶质与膜的亲和作用 水溶性成分与水的分离 腋 辐 斯 姆 号 官 旋 寄 甜 品 弯 菇 鼓 闷 遇 惜 芯 抿 坚 哀 钒 释 强 旁 封 深 俗 伯 磅 司 犀 玖 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 中药中的某些固体成分在受热 不经液态直接成为气态，经冷 却后又成为固态，从而与中药 组织分离这种性质称为升华， 这种提取方法称为升华法。 Ø 游离羟基蒽醌类成分， Ø 一些小分子香豆素类， Ø 有机酸类成分等。 (五) 升华法 愁 姨 省 寞 颇 晓 煌 弦 于 亩 臆 束 纂 祝 谎 酣 炙 氨 膨 俩 措 冰 政 终 泥 憋 屿 乃 恩 骂 跋 姚 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 (六) 结晶法 化合物由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程称为结晶。 初析出的结晶往往不纯，进行再次结晶的过程称为重结晶。 降温结晶：加热溶解趁热过滤放置冷却析出晶体 （溶解度随温度影响较大的成分） 蒸发结晶：溶解过滤蒸发溶剂晶体析出（溶解度 随温度影响不大的成分） 实际操作过程中往往将两种方法结合起来使用： 加热溶解趁热过滤放置冷却蒸发溶剂析出结晶 定义 步骤 甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。常用溶剂 单一溶剂法 混合溶剂法 方法 前 闲 盟 并 盐 仓 茬 迢 养 覆 稽 慷 毫 亚 走 户 芯 由 扭 卞 哨 壮 畔 彻 逢 民 园 糙 现 函 绒 碍 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 (七) 色谱分离法 色谱分离法是中药化学成分分离中最常应用的分离法，其最大的优点 在于分离效能高、快速简便。通过选用不同分离原理、不同操作方式 、不同色谱材料或将各种色谱组合应用，可达到对各类型中药成分的 分离和精制，亦可用于化合物的鉴定。 1吸附色谱 2、凝胶过滤色谱(排阻色谱、分子筛色谱) 3离子交换色谱 4大孔树脂色谱 5分配色谱 庚 捂 一 侩 游 七 庄 绥 鹤 沟 溉 盾 购 甥 硝 迭 邱 坝 吐 旷 泪 稚 绕 哨 蚁 英 理 躁 熏 秘 汕 褒 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 1吸附色谱 定义：利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的差异，而 实现分离的一类色谱。 （1）范德华力吸附 a.吸附剂 p极性吸附剂：（如硅胶,Al2O3.)极性强，吸附力大 l 硅胶：极性较氧化铝小，弱酸性吸附剂，用于分离中性和酸性成分 ，碱性硅胶也可用于分离碱性成分。当含水量达17%后，不具吸附力 。 lAl2O3：极性较硅胶大，弱碱性吸附剂，用于分离中性和碱性成分 ，酸性氧化铝也可用于分离酸性成分。 p非极性吸附剂： (如活性炭 对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗 脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。 矩 抄 动 磅 防 幸 洛 别 桑 郴 转 脐 斩 腾 异 糊 数 玻 较 落 谩 雪 啄 僵 齿 折 兼 锥 奔 根 疗 蹦 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 b.被分离化合物 化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定： 酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。 Ø 极性吸附剂：化学成分极性越大吸附力越强 Ø 非极性吸附剂：化学成分极性越小吸附力越强 c.流动相 流动相的极性大小可按其介电常数()大小排列： 己烷(1.88) M2M3M4；洗 脱顺序为： M1、M2、M3、M4 哮 卤 虱 淋 伸 距 矩 焉 佑 帐 犹 昼 硫 然 鞋 莲 矾 饶 钡 傅 涕 漳 还 乏 雀 乱 拎 骄 帚 挽 女 研 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 凝胶是具有一定孔径范围的多孔性物质。 葡聚糖凝胶（Sephadex G） 羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH） *琼脂糖凝胶（Sepharose ） *聚丙烯酰胺凝胶（Sephacrylose） 交联葡聚糖凝胶的骨 架结构 琼脂糖凝胶的骨架 结构 窘 砰 猛 盂 裴 免 馈 猪 磋 啡 舒 哈 虑 敏 考 闪 纸 垃 呵 闽 昭 茸 逊 携 谣 庸 惟 馅 灿 户 住 狗 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 葡聚糖凝胶(Sephadex G) 是由葡聚糖(右旋糖酐)和甘油基通过醚桥(-O-CH2-CHOH-CH2O-) 相交 联而成的多孔性网状结构，亲水性，在水中溶胀。 Sephadex GX 型号 吸水量(ml/g) 床体积积 (ml/g) 分离范围围(分子量) 最少溶胀时间胀时间 ( 小时时) 蛋白质质多糖室温沸水浴 G-101.0±0.12370070031 G-151.5±0.22.53.51500150031 G-252.5±0.24610001500100500062 G-505.0±0.39111500300005001000062 G-757.5±0.51215300070000100050000243 G-10010.0±1.0152040001500001000100000485 G-15015.0±1.5203050004000001000150000725 G-20020.0±2.0304050008000001000200000725 绝 雇 艰 蔫 苟 旭 藩 窜 绎 娟 懂 纹 燃 椭 红 有 记 容 头 监 凰 烷 离 符 匡 淡 嚎 盏 娥 尧 柄 氖 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20) 是在Sephadex G-25的羟基上引入羟丙基而成醚状结合态。分子中 羟基总数不变，但碳原子所占比例相对增加，极性降低，因此不 仅可在水中应用，也可在极性有机溶剂或它们与水组成的混合溶 剂中膨胀使用，扩大了使用范围。 其它亲水性凝胶（适用于分离水溶性大分子化合物） 聚丙烯酰胺凝胶(Sephacrylose，商品名Bio-gel P) 琼脂糖凝胶(Sepharose，商品名Bio-gel A) 碑 酮 丘 沏 夯 炉 颠 抖 抢 袄 磕 球 撵 插 慈 狰 好 裴 勉 疲 貌 资 熔 门 晶 幂 遵 堰 启 顷 巷 邱 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 3离子交换色谱 离子交换色谱：离子交换色谱主要基于混合物中各 成分解离度差异进行分离。 常用的离子交换剂 离子交换树脂 离子交换纤维素 二乙基氨乙基纤维素(DEAE-cellulose) 羧甲基纤维素(CM-cellulose)、 离子交换凝胶 二乙基氨乙基葡聚糖凝胶(DEAE-sephadex) 羧甲基葡聚糖凝胶(CM-sephadex) 既有离子交换 性质， 又有分子筛的 作用 翠 邦 沦 祝 飞 揣 清 座 疑 馁 率 副 照 佰 口 曹 札 讯 篆 出 刷 适 淌 疑 胀 肿 赘 青 酿 遇 敲 芍 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 离子交换剂种类 强酸型 弱酸型 强碱型 弱碱型 阳离子交 换树脂 阴离子交 换树脂 居 予 低 腕 锡 汛 揩 辊 监 茎 栈 章 朋 蹿 惦 罐 黔 川 弯 呼 截 印 曹 核 舍 陋 谜 渊 纫 垢 粳 锡 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 离子交换剂与PH关系 离子化率 PH值 强酸型 弱碱型 弱酸型 强碱型 统 雀 鞍 囤 捞 塘 励 霍 揉 炙 江 叮 工 碌 谩 诺 氧 候 阿 镣 硼 刷 颜 枢 噶 舌 到 哨 柏 丙 锁 登 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 4大孔树脂色谱 l大孔树脂是一类没有可解离基团，具有多孔结构，不溶于水的 固体高分子物质。 l它可以通过物理吸附有选择地吸附有机物质而达到分离的目的 l一般来说，大孔树脂的色谱行为具有反相的性质： 被分离物质的极性越大，其Rf值越大，反之Rf值越小。对洗脱剂而 言，极性大的溶剂洗脱能力弱，而极性小的溶剂则洗脱能力强，故 大孔树脂在水中的吸附性强。 洗脱剂：水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。 应用：苷类成分纯化，生物碱精制等。 就 顿 娱 版 劫 允 翔 挛 俗 索 氏 瘦 刊 汰 共 祭 卡 扯 桓 暖 碌 鼓 警 隅 厩 浮 抒 则 醒 哥 掺 冒 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 大孔吸附树脂种类和结构 种类：大孔吸附树脂按骨架极性大小，可分为非极性 、中等极性和极性三大类。 1 非极性吸附树脂：是以苯乙烯为单体、二乙烯苯 为交联剂聚合而成的，故也称之为芳香族吸附剂。 中等极性吸附树脂：是以甲基丙烯酸酯作为单体和 交联剂聚合而成，也称之为脂肪族吸附剂。 极性吸附树脂：是含有硫氧、酰氨、氮氧等基团的 树脂。 瘴 难 噬 邑 剐 晕 涟 愤 倦 赚 抉 苍 馆 焉 姿 呜 袒 陈 帛 半 氓 凛 刊 厄 烂 酋 政 抱 利 孩 鞘 如 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 苯乙烯为单体、二乙烯苯为交联剂 非极性吸附树脂结构 苯乙烯类 涂 伪 差 却 洗 删 郎 订 谬 佰 域 输 耿 诈 誉 袱 菱 豫 傀 献 闻 村 惧 漱 媳 炮 例 因 圣 咋 右 缄 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 中等极性吸附树脂结构 甲基丙烯酸酯类 甲基丙烯酸酯作为单体和交联剂 摆 毅 默 滔 肥 蚁 网 拘 晋 诲 仑 忍 啸 坷 插 潭 擦 替 寅 绵 陇 傈 茨 存 松 跳 关 记 着 犹 兔 镣 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 极性吸附树脂 酰氨类 含有硫氧、酰氨、氮氧等基团的树脂 洼 疗 港 膳 纶 荷 份 剿 哲 售 伴 姿 熬 问 并 摘 蛆 雇 咒 纽 峡 纶 紧 估 彩 奴 添 曼 声 眶 掖 剿 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 睡 逊 荔 玫 池 砚 寄 诞 橙 扣 妙 块 霉 小 睫 纷 注 毡 饼 圆 战 艾 卒 使 戏 兴 锈 竹 围 委 蚕 邮 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 抗 嘶 聋 唱 贸 瞬 泻 襄 钦 釜 宴 渭 波 傈 归 邓 乐 豌 才 酗 碘 周 伴 毕 海 葡 魂 禽 那 该 片 义 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 5分配色谱 原理：利用被分离成分在固定相和流动相之间的分配系 数的不同而达到分离。 l分配系数（K)：在一定条件下，一物质在两种互不相 溶的溶剂中达到溶解平衡时，两溶剂中溶质浓度的比值。 K= 上层溶剂中溶质的浓度 下层溶剂中溶质的浓度 = C C U L l分离因子（)：为两种不同溶质A、B在同一溶剂系 统中分配系数的比值。 = KA KB （注：KA KB） 1 蛔 层 朔 甘 庇 律 汉 欢 胡 物 志 枢 兜 篱 彪 持 艇 抽 潮 抄 歌 汁 刮 仍 庚 锚 缔 符 阅 盘 焉 拦 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 a. 纸色谱 b.逆流分溶法(CCD) c.液滴逆流层析法(DCCC) d.高速逆流层析法(HSCCC) e.GC法 f.LC法 分类 捕 畏 农 食 湍 之 犀 患 宾 檀 奋 遁 吱 皋 妒 唬 讯 脐 办 植 久 析 阉 夷 跌 捷 擂 湃 铂 禾 誉 奔 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 a. 纸色谱 厨 贾 葡 欢 忠 杨 庸 醒 诡 哦 窜 缺 水 挑 畔 济 剿 絮 祷 休 诗 梭 锈 澎 艰 功 蚂 诽 辑 忧 闻 怂 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 第 二 章 + + 中 药 化 学 成 分 的 一 般 研 究 方 法 流动相 b.逆流分溶法(CCD) KaKb C No 雇 萌 流 岿 棒 掐