最新药物溶血实验中药药理云南中医学院-PPT文档.ppt

云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 课前准备： 1、500字综述：中药导致溶血的机制。 2、实验设计：桔梗水煎液溶血实验设计。 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 掌握溶血实验的方法 观察桔梗水煎液的溶血作用 【实验目的】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 某些中药注射剂，由于含有溶血成分或物理、化学及 生物等方面的原因，在直接注入血管后可产生溶血作用 ； 【实验原理】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 有些注射剂中因含有杂质等成分，注入血管后可产生血 小板凝聚，引起血液循环功能障碍等不良反应。 因此，为了临床合理用药，应进行中药溶血实验。 血小板凝聚 【实验原理】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 动物：家兔/大鼠 药品：供试注射剂、生理盐水、蒸馏水 器材：手术器械、试管、离心机 【实验材料】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 步骤二 步骤三 步骤一 取兔血5-lOml ，加入洁净干 燥的小烧杯中 ，并用竹签或 玻棒搅拌除去 纤维蛋白元 加生理盐水 5lOml，摇匀 ，离心、 倾去上清液、 如此反复几次 至上清液不呈 红色为止。 量取血球，加 生理盐水稀释 成2的混悬 液供试验用。 一、血球悬浮液的配制： 【实验方法】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 二、测试方法：取试管6只，按下列顺序加入各种溶液。 试管编号 1 2 3 4 5 6 桔梗液(m1) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 生理盐水(m1) 2.4 2.3 2.2 2.1 2.0 2.5 2血球混悬液 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 【实验方法】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 第6管为对照管。将各管置37恒温箱 (或25-27室温)中， 观察并记录30min、1、2、3h的结果。 如溶液变清并染红色，即表示溶血。必要时，可用显微镜观 察红血球是否破裂。如药液0.3ml，在半小时内引起溶血者即 不宜作注射用。 三、观察方法： 完全溶血 部分溶血 【结果与统计】 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 振摇试管后，凝聚物又能均匀分散。 将凝聚物放在载玻片上，滴加2滴生理盐水，在显微镜下观 察：凝聚红细胞能被冲散者为假凝聚，其制品可供临床使用 。 若凝聚物不被摇散或在玻片上不被冲散者为真凝聚，其制品 不宜供临床使用。 假凝聚的排除： 注意事项! 云南中医学院药理教研室 Pharmacology 中药药理研究方法学 1、为什么要做中药注射液的溶血实验？ 2、桔梗水煎液导致溶血的机制是什么？ 【思考题】