课题3分解纤维素的微生物的分离.ppt

专题2 微生物的培养与应用 课题3 分解纤维素的微生物的分离,主要成分,-纤维素,替代石油能源的生物燃料-纤维素,草中含有纤维素,课题3 分解纤维素的微生物的分离,【学习目标】 知识与技能 1、简述纤维素酶的种类及作用。 2、掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。 过程与方法 1、分析分离分解纤维素的微生物的实验流程。 2、掌握实验操作的原理。 情感、态度与价值观 1、通过自主设计、完成实验，培养勇于探究的科学精神。 2、通过了解土壤中能分解纤维素的微生物在保护环境中的作用，增强社会责任感。,纤维素,服装面料处理,利用纤维素 生产酒精,草食性动物 从草中获取营养,纤维素酶,纤维素酶,取二支20mL的试管,小实验：纤维素酶分解纤维素的实验,各加入一张滤纸条,分别加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸醋酸钠缓冲液11ml和10ml,甲 乙,在乙试管中加入1mL纤维素酶,两支试管固定在锥形瓶中，放在 140r/min的摇床上振荡1h,结果：乙试管的滤纸条消失,变浑浊,菌落,透明圈,土壤取样,选择培养,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,挑选产生透明圈的菌落,实验流程,纯化培养,纤维素分解菌大多分布在_ _的环境中。采集土样时，应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。也可将滤纸埋在土壤中一个月左右，这样会有能分解纤维素的微生物生长。,【一】土壤取样,富含纤维素,思考题将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？,人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。,【一】土壤取样,培养基成分分析,葡萄糖,2、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 _ _。,以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖,具有,【二】选择培养,为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。,按照课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释101107倍。,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,（1）制备鉴别培养基:,（2）涂布平板： 将稀释度为104106的菌悬液各取0.1ml涂布到平板培养基上，30倒置培养。,鉴别纤维素分解菌的培养基,(水溶性羧甲基纤维素钠),NaCl溶液的作用： 漂洗作用，洗去与纤维素结合不牢的刚果红， 以免出现的透明圈不够清晰。,颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用,操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂,操作简便，不存在菌落混杂问题,产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。,两种方法的优点与不足,分解纤维素的微生物的分离,纤维素酶,种类、作用,刚果红染色,筛选原理,实验流程,土壤取样,选择培养,纯化培养,涂布培养,富含纤维素土壤,增大分解菌含量,染色鉴别,分离出分解菌,课堂总结,14下表为纤维素分解菌的鉴别培养基配方，请设计试验 测定培养基用于鉴定纤维素分解菌的最适pH。,实验步骤： （1）按配方表配制培养基，并平均分配到5个培养皿中。 （2）_。 （3）将培养基灭菌。 （4）_。 （5）放在适宜条件下培养，观察并记录结果。 （6）仅凭一次实验能否准确测出培养基的最适pH?为什么？,将培养基的pH分别控制在3、5、7、9、11,将等量的纤维素分解菌分别接种到上述培养基中,不能，实验所控制的pH并不是准确的，况且这一次实验也可能有误差。,酵母膏实际上是膏状的酵母抽提物，酵母抽提物是国家行业标准的规定名称。 酵母抽提物以酵母为原料，采用自溶法或加酶水解法工艺，经分离、脱色（或精制浓缩、喷雾干燥）而成的，含氨基酸、肽、多肽及酵母细胞水溶性成分的产品。包含粉状、与膏状的产品。 酵母膏可以有食品调味与生物发酵培养基两大类用途。在生物发酵行业应用还有一种习惯叫法是酵母浸膏。,【酵母膏】,微生物培养基的氨基酸氮源，由酪蛋白水解得到，常见商品名称为水解酪素或酶解酪素。酪蛋白水解后富含21种氨基酸，氨基酸种类齐全。因此常用于制备培养基。,【酪素】,