普通电泳的原理.ppt

普通电泳的原理,生物大分子（如蛋白质，核酸，多糖等）大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中，它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。 在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移，迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。 电泳的样品支持物，生物实验大多为凝胶。,普通电泳设备组成,电泳仪 + 电泳槽,普通电泳槽分三种： 水平电泳 垂直电泳 转移电泳,水平电泳,用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法。借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。 是基因操作中常用的重要方法。,水平电泳槽图片,垂直电泳,作用：用于分离蛋白质和寡糖核苷酸。 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。,垂直电泳槽图片,湿转电泳,将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，转移至固相膜上，再用标记的抗体或二抗与之反应，以显示膜上特定的蛋白条带。 整个电泳过程完全浸在缓冲液中完成的称为湿转电泳,湿转电泳槽图片,半干转电泳,将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，转移至固相膜上，再用标记的抗体或二抗与之反应，以显示膜上特定的蛋白条带。 膜和滤纸均为浸湿而非整个电泳过程完全浸在缓冲液中完成的称为半干转电泳,半干转电泳槽图片,普通电泳仪大体分三种 基础电泳仪 高电流电泳仪 高电压电泳仪,基础电泳仪,参数：一般电压为几百伏特，电流为几百毫安。 应用：主要用于水平电泳、垂直电泳、湿转电泳,高电流电泳仪,参数：一般电压为几百伏特，电流为几千毫安。 应用：主要应用于水平电泳、垂直电泳、湿转电泳、半干转电泳,高电压电泳仪,参数：一般电压为几千伏特，电流为几百毫安。 应用：主要应用于等电聚焦电泳、DNA测序电泳等。,THANKS！ 具体操作及注意事项请见下一个PPT,