动物实验基本技术ppt课件.ppt
动物实验基本技术,动物实验基本技术,实验动物的抓取、保定,1,实验动物的分组和编号,2,实验动物的给药与取血,3,4,实验动物被毛去除,实验动物的粪便采集,5,6,实验动物的处死,7,实验动物的麻醉,一、实验动物编号与分组,（一）编号： 1、被毛涂染法： 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂：3-5苦味酸溶液，可染成黄色。 2%硝酸银溶液 (咖啡色) 0.5%中性品红溶液 (红色) 煤焦油的酒精溶液(黑色),www.nordridesign.com,2、穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代表个位。实验动物：兔、犬、猪 3、标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上 实验动物：犬、猴,穿耳孔法,www.nordridesign.com,4、烙印法 直接把标记编号烙印在实验动物身体上的方法。 5、电子标签法 用电子芯片标记动物。,www.nordridesign.com,实验动物编号与分组,（二）分组： 1、组别的要求： 正常对照组 模型组 赋形剂（或溶剂组） 阳性药组 药物不同剂量组,随机区组分组 步骤： 1）给小鼠编号（在尾巴上写数字） 2）称重 3）按体重重新编号 4）按区组分组,在EXCEL中建立随机数字表,www.nordridesign.com,例如：3个实验组，分3个区组，每个组5只动物。,www.nordridesign.com,大鼠,豚鼠,家兔,犬,二、抓取、保定,小鼠,www.nordridesign.com,小鼠的捉持,1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠提起，放在饲养盒的笼盖上。,用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后及颈背部的皮肤，将小鼠提起。,翻转左手掌，以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条直线。,用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后及颈背部的皮肤，将小鼠提起。,www.nordridesign.com,http:/www.tudou.com/programs/view/X886nZsvP14/,www.nordridesign.com,大鼠的捉持,首先戴好防护手套,用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的笼盖上。,左手顺势按、卡在大鼠躯干 背部，稍加压力向头颈部滑行。,以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取固定。,www.nordridesign.com,www.nordridesign.com,豚鼠的捉持,先用左手轻轻扣、按住豚鼠背部。,顺势抓紧其肩胛上方皮肤， 拇指和食指环箍其颈部。,用右手轻轻托住其臀部， 即可将豚鼠抓取固定。,www.nordridesign.com,兔的捉持,用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤，轻轻把兔提起。,用左手托住兔的臀部,家兔的固定方式有腹卧式和仰卧式两种,家兔的抓取、称重、麻醉、固定 http:/v.ku6.com/show/d7ULngHLl5tTDvhAXDJfzQ.html,www.nordridesign.com,www.nordridesign.com,犬的捉持,实验者先抚摩，逐步接近，勿使其惊恐或将其激怒。,用粗棉绳兜住狗的下颌，并在上颌打结（勿太紧）。,如犬不合作，则先用一根特制长柄狗头夹，从后面夹住犬颈，限制犬头部活动，再按上述方法捆住犬嘴。,www.nordridesign.com,三、动物被毛的去除,拔毛法：用拇指和食指拔去被毛的方法 剪毛法：用剪刀紧贴皮肤剪去被毛 剃毛法：用剃毛刀剃去动物被毛。 脱毛法：用化学药品脱去动物被毛。,www.nordridesign.com,四、实验动物的给药与取血,www.nordridesign.com,灌胃给药大小鼠,1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量的药液。,左手捉持动物，使头部向上。,右手持针，把灌胃针头的前端放进动物的口腔，顺着上腭部插入咽部，顺咽后壁轻轻往下推。,用右手食指将针栓慢慢往下压，将注射器中的药液灌入动物的胃中。,剂量：小鼠约0.1-0.5ml10g体重。最大体积为1.0ml/只 大鼠约1-2 ml100g体重，最大体积为5.0ml/只,大鼠的灌胃 http:/video.tudou.com/v/XMjAyMTgyMTI0.html?from=s1.8-1-1.2,www.nordridesign.com,灌胃给药兔,将兔放进固 定架内，灌胃者用左手拇指和中指挤压兔两颊，将下颌挤开使兔被动张口。,右手将开口器从一侧口角插入口腔并固定。,胃管经开口器的孔插入，向前推进约15cm，可达胃内。,在插管时应将胃管另一端泡在水中确认没有冒气泡，即可用注射器经 胃管注入药液。,豚鼠灌胃同家兔,家兔的灌胃 http:/v.youku.com/v_show/id_XNDIzNzgwMTMy.html,www.nordridesign.com,皮下注射给药大小鼠,颈背部、腋下、腹侧和后肢的皮下,注射针头取一锐角角度刺入皮下。,将针头轻轻向左右 摆动，易摆动则表示已 刺入皮下。,再轻轻抽吸， 如无回血，可缓慢地将 药物注入皮下,大鼠的抓取、灌胃、皮下注射、肌肉注射、脱颈处死、尾静脉、舌下静脉给药、心脏取血、心电图测定http:/www.tudou.com/programs/view/MnX5SwFkpSQ,表皮 真皮 皮下组织,皮下注射,腹腔注射,小鼠腹腔注射 http:/baidu.ku6.com/watch/5375809652565256639.html?fr=ps_ala11,www.nordridesign.com,皮内注射,www.nordridesign.com,静脉注射给药大小鼠,将大小鼠放在金属笼或小鼠固定器 中，通过金属笼或大小鼠固定器的孔拉出鼠尾巴,用左手捏住鼠尾巴中下部，用75酒精棉球反复擦拭尾部,注射时，以左手拇指和中指捏住鼠尾两侧，用食指从下面托起尾，,右手持4号针头的注射器，使针头与 静脉平行（小于30度角）,大鼠亦可用舌下静脉注射,小鼠尾静脉注射 http:/baidu.ku6.com/watch/995040663718715991.html?fr=ps_ala11,www.nordridesign.com,静脉注射给药兔,兔放在固定架内，酒精消毒并揉搓血管，使兔的耳缘静脉充盈。,用左手食指和中指夹住兔的耳缘静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指和小指放在耳郭下作垫。,右手拿注射器，针尖的斜面朝上，将针 头从远心端插入血管,回抽有血即可注射，拔针后用棉球止血,豚鼠可用足背静脉注射,http:/www.tudou.com/programs/view/VJijCxQAhH0/,www.nordridesign.com,实验动物的采血,尾尖采血,眼眶静脉丛采血,断头采血,腹主动脉采血,心脏采血,腹主动脉采血,静脉采血,www.nordridesign.com,方法：固定动物并露出鼠尾，将尾部在45的温水中浸泡数分钟，使尾部血管扩张。将鼠尾擦干，用锐器切去尾尖0.30.5cm，让血液滴入盛器或直接以吸管吸取。 对象：大、小鼠 特点：小量采血，可以多次采血。,1,尾尖采血,www.nordridesign.com,www.nordridesign.com,方法：用左手捉鼠，拇指及中指抓住头颈部皮肤，食指按于眼后，使眼球轻度突出，眼底球后静脉丛淤血。右手持取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管（临用前折断成1-1.5cm长的毛细管段，浸入1肝素溶液中，干燥后用）刺入深度小鼠23mm，大鼠45mm。当感到有阻力时再稍后退，得到所需要的血量后，拔出。 对象：大、小鼠等。 特点：中等血量（0.20.3ml，小鼠；0.51.0ml，大白鼠），避免动物死亡。,2,眼眶静脉丛采血,小鼠眼眶取血 http:/www.tudou.com/programs/view/8WZs89uJQN0/,www.nordridesign.com,方法：左手以拇指和食指保持动物的头颈部，使其头略下倾，右手持剪刀猛力剪断鼠颈，让血液滴入盛器。 对象：大、小鼠等。 特点：需要血量较大（小白鼠可采血0.81.0ml，大白鼠可采血5.08.0ml） ，且不需要继续保存动物生命时用本法。,3,断头采血,www.nordridesign.com,www.nordridesign.com,方法：动物要麻醉后进行，用针管在腹主动脉与血管平行刺入。 对象：大、小鼠等。 特点：需要血量较大，且不需要继续保存动物生命时用本法。,4,腹主动脉采血,大鼠腹主动脉取血、灌流 http:/v.youku.com/v_show/id_XNjMyNTYxODMy.html,www.nordridesign.com,腹主动脉采血,腹主动脉,www.nordridesign.com,方法：将动物背位固定，在左胸第2至第4肋间剪毛一块，用碘酒和酒精消毒。然后用配有7号针头的10ml注射器，在心跳最明显处作穿刺。针头刺入心脏后即见血液流入注射器；或边刺边抽，直至血液流入注射器。取得所需血量后，迅速将针头拔出，这样心肌上的穿刺孔较易闭合。 对象：大鼠、兔、豚鼠等。 特点：采血量较大，继续保存动物生命。,5,心脏采血,www.nordridesign.com,方法：将家兔放在固定箱内，剪去拟采血耳壳上的毛，用电灯照射加热或用二甲苯棉球涂擦耳壳，使耳部血管扩张。用粗针头刺破耳缘静脉或以刀片在血管上切一小口，让血液自然流出，滴入已放有抗凝剂的盛器中。采血完毕，用干棉球压住出血口，以待止血。如一时不易止血，可用木夹夹住耳壳1020分钟。 对象：兔 特点：采血量较大，继续保存动物生命。,6,静脉采血,兔耳缘静脉取血方法,www.nordridesign.com,麻醉方法： 吸入、注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔） 常用麻醉药物： 挥发性麻醉药：异氟烷、乙醚（吸入）， 非挥发性麻药：戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮（静脉）,五、实验动物的麻醉,常用麻醉药的剂量及注射途径,麻醉注意事项,麻醉前应准确称体重； 注意麻醉剂量，麻醉过程中注意观察动物的反应情况； 注意保温，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平； 静脉注射时，速度要均匀，不宜太快。 动物在麻醉状态体温容易下降，手术中和手术后要采取保暖措施； 及时处理麻醉过量的动物，使用10%的咖啡因，按0.1ml/kg静脉注射或用10%的可拉明按0.20.5 ml/kg静脉或肌肉注射。,www.nordridesign.com,六、实验动物的粪便采集,压迫膀胱法 代谢笼法 导尿法（用导尿管 插入膀胱，用于大型 动物）,七、实验动物处死方法,颈椎脱臼处死法 断头处死法 放血处死法 空气栓塞处死法（家兔） 过量麻醉处死法,谢谢,
