明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则-20120430-2.ppt

明胶药用空心胶囊中铬 检测方法指导原则的解读,目 录,一、背景资料,4月15日，央视每周质量报告栏目披露了国内部分医药生产企业使用皮革明胶制胶囊，空心胶囊铬超标，在社会上反响巨大。工业明胶违法用于生产药用明胶内幕：,一、背景资料,一、背景资料,一、背景资料,4月15日晚国家药监局发出紧急通知，要求对媒体报道的13个铬超标产品暂停销售和使用。待监督检查和产品检验结果明确后，合格产品继续销售，不合格产品依法处理。对违反规定生产销售使用药用空心胶囊的企业，将依法严肃查处。 4月16日中检院组织召开关于对部分胶囊剂产品开展监督抽验的紧急会议，成立了以李云龙为组长的应急工作领导小组，成立了应急检验技术专家组，安排部署应急检验的具体事宜。,一、背景资料,发布明胶药用空心胶囊铬检测 方法指导原则的通知 各省、自治区、直辖市(食品)药品检验所（院）： 根据国家食品药品监督管理局的要求，为指导明胶药用空心胶囊中铬检测，保证检验质量，我院依据中国药典2010年版（二部）的标准，结合前期工作经验，组织制定了明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则（见附件），供各单位检测时参考。 附件：明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则 (http:/www.nifdc.org.cn/CL0149/3480.html) 二一二年四月二十一日,4月27日国家食品药品监管局在全国范围内对药用明胶和胶囊生产企业进行了全面排查，对18家药用明胶生产企业抽验了166批明胶，检出1批产品铬超标；对117家药用胶囊生产企业抽验了941批药用胶囊，检出15家企业74批胶囊铬超标，不合格率为7.9%。 并责成相关省食品药品监管局依法从重从快处理严重违法企业 。 4月27日国家食品药品监管局发布第25号公告，药监局表示自2012年5月1日起，凡药用明胶、胶囊和胶囊剂药品生产企业必须对购进的原辅料和销售的产品逐品种、逐批次严格检验（具体要求已另文通知），否则不得生产和销售相关产品。,一、背景资料,一、背景资料,明胶空心胶囊（Vacant Capsules） 系由胶囊用明胶加辅料制成的空心硬胶囊。由帽、体两节胶囊壳组成，可容纳各种药粉、液体、半固体和药片。可掩饰药物的异味，易于吞服，具良好的崩解能力，较长的保质期等优点。 规格尺寸：从大到小依次为000#、 00#、0#、1#、2#、3#、4#、5#等8种型号。,明胶药用空心胶囊的成分,主要原材料：由明胶、甘油、水以及其它的药用材料(TiO2)组成。明胶约占所有原辅料的90%以上）。 明胶是从动物（牛、马、猪、鱼、驴）的皮、骨、腱、鳞等含胶原蛋白的组织，经过酸、碱或酶水解处理以后降解生成的非均匀多肽混合物，由多种氨基酸所组成。 明胶成分：8590%蛋白质，0.3%0.2%矿物质，9%12%水分。 外观近于无色或者呈淡黄色， 为透明、无特殊臭味的固体， 分子量为1.75-45万。,明胶的生产和安全性,明胶：以新鲜牛皮和猪皮为原料，采用全套不锈钢设备，严格筛选鲜骨皮，通过反复洗浸、脱脂中和、蒸煮液化、灭菌过滤、浓缩烘干等几十道工序流水线制成。生产出的明胶为一种无味、无色（略带浅黄色）、半透明、坚硬的非晶态物，其不溶于有机溶剂，它吸水性强、粘度高，明胶是肽分子聚合物质，是胶原蛋白质的水解产物，所以可作为一种添加剂，它可以直接制成浓汤、肉皮冻子、水晶冻、色拉、奶油糖、巧克力、饮料等供人们食用。 工业明胶为无色至淡黄色透明或半透明等薄片或粉粒。无味，无臭。在冷水中吸水膨胀。广泛用于纺织、印刷、印染、塑料、电子、国防、航空，等工业和部门中。,明胶(Gelatin）是胶原的水解产物，是一种无脂肪的高蛋白，且不含胆固醇，是一种天然营养型的食品增稠剂。食用后既不会使人发胖，也不会导致体力下降。明胶还是一种强有力的保护胶体，乳化力强，进入胃后能抑制牛奶、豆浆等蛋白质因胃酸作用而引起的凝聚作用，从而有利于食物消化。,铬的危害,皮革在工业加工鞣制时使用含铬的鞣制剂，会导致铬残留，使用这种“蓝矾皮”加工的工业明胶，重金属铬的含量一般都会超标。 铬是一种毒性很大的重金属，容易进入人体细胞，对肝、肾等内脏器官和DNA造成损伤，在人体内蓄积具有致癌性并可能诱发基因突变。,明胶的分类和行业标准,根据用途分为三类：药用明胶，食用明胶和工业明胶(照相明胶)。 有关标准 胶囊用明胶： 中国药典2010年版（二部）（Cr:2.0mg/kg） Gelatin ： EP7.0/BP2010 （Cr:10ppm） USP34（Cr:没有规定） JP16（Cr:没有规定） 药用明胶： QB 2354-2005 （Cr:2.0mg/kg）(QB:轻工行业标准) 食品添加剂 明胶： GB 6783-94 （A级：1.0mg/kg，B级：2.0mg/kg） 食用明胶： QB /T 4087-2010 （Cr:2.0mg/kg） 工业明胶： QB/T 1995-2005 （Cr:没有规定。用途：1，火柴的起火剂；2，粘合剂；3，电解工业；4，纺织工业；5，感光耐蚀膜；）,二、检测方法,中国药典2010年版（二部）明胶空心胶囊项下铬检查项（P1204） 取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸510ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法制备试剂空白溶液；另取铬单元素标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0g的铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬080ng的对照品溶液。 取供试品溶液与对照溶液，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（附录IV D第一法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。含铬不得过百万分之二（2mg/kg）。,二、检测方法试验设备,仪器 原子吸收分光光度计（含石墨炉原子化装置） 电子天平 微波消解仪 电热板或其他赶酸设备，如：恒温消解仪、赶酸器等。 试剂 硝酸（优级纯,国药集团） 铬单元素标准溶液（1000µg/ml，国家标准物质）,二、检测方法试验步骤,检验样品： 胶囊剂（由明胶空心胶囊壳装载的胶囊） 检验项目： 明胶空心胶囊中的铬 检验所需检品量的参考值：,二、检测方法试验步骤,空心胶囊壳的制备： 参考附录I E 胶囊剂装量差异项（附录8） 具体制备方法：倾出胶囊剂的内容物，胶囊壳用棉棒或小刷试净（不得损坏囊壳），放置，待用。 胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬的测定方法： 铬标准贮备液的制备：取铬单元素标准溶液（1000µg/ml），用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0g的铬标准贮备液(不得超过一个月)。 标准溶液的制备：分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬080ng的对照品溶液。临用时现配。,二、检测方法试验步骤,胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬测定方法(过夜) ： 供试品溶液的制备：精密称取本品0.5g(胶囊整体称重，如1号胶囊约7个，精密称定)，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸510ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波炉内消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干(12mL)，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法制备试剂空白溶液，作为空白校正。 测定法： 取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（中国药典2010年版（二部）附录IV D第一法，标准曲线法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。,二、检测方法试验步骤,胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬新测定方法(不过夜)： 取样品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5ml，10030分钟使溶解，补加硝酸2ml，加水1mL，待冷却至室温，加0.5ml氢氟酸，进行第一次微波消解（参考程序为10min升温至120，保持5min，10min升温至140，保持15min）。冷却放气（无需完全打开消解罐盖，只需扭松即可）。随后进行第二次消解（参考程序为10min升温至150，保持5min，10min升温至185，保持15min）。冷却后，加热赶酸至12ml， 2%硝酸溶液至50ml，作为供试品溶液。同法制备试剂空白溶液；另取铬单元标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0ug的铬标准储备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬080ng的对照品溶液。 测定法：取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（中国药典2010年版（二部）附录IV D第一法，标准曲线法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。,三、方法学验证,线性： 制备含铬的对照品溶液至少5份，浓度依次递增，最高浓度吸收值应在0.8以下，保证具有较好的线性范围，相关系数（r）0.99。检测波长： 357.9nm。 准确性： 应进行整个实验过程的（包括前处理）方法学回收率验证，暂定回收率应为80%-120%的范围内。每波次测定需进行随行回收试验，每10个样品加一个质控样品。,2ppm,LOQ:0.5ppm,三、方法学验证,重复性 取限度浓度的标准品溶液重复测定5次，吸收度（测定值）的变化范围（RSD）不得过5%。 定量限（LOQ） 本方法定量限应不低于0.5mg/kg。,四、注意事项,消解： 样品前处理是试验中的关键步骤，既要保证消解完全，又要保证消解过程样品中的铬不损失，因此试验中建议加入10ml硝酸（优级纯），并需要浸泡过夜后一步消解/或不过夜二步消解。参考消解程序为：5min由室温升至120，维持3min；6min由120升至150，维持2min；6min由150升至180，维持20min。 为避免玻璃容器的干扰，试验中宜采用塑料容量瓶（聚丙烯材质）定容。,四、注意事项,不同原子吸收仪试验参数可能不同，可根据原子吸收仪说明书中推荐程序设定测定参数（国产参考石墨炉升温程序如下：5s升温至100，保持10s；5s升温至500，保持10s；0s升温至2100，保持3s；0s升温至2200，保持2s） 含钛白粉的胶囊壳（不透明胶囊）建议在微波消解时，样品中除加硝酸外可另加0.5ml氢氟酸，其他同供试品溶液制备，注意空白校正和方法学验证。,四、注意事项,实验用水：应采用纯化水，储藏水的容器宜用聚乙烯塑料材料制成，不宜选用玻璃容器长期储存。 试剂应采用优级纯及以上级别试剂。 试验中所用容器及器皿均需在每次使用前用盐酸溶液（浓盐酸：水/1:1）浸泡1h，再用硝酸溶液（浓硝酸：水/1:1）浸泡1h，再用纯化水冲洗干净后使用。微波消解容器应采用仪器清洗程序清洗，不得采用铬酸清洗液洗涤容器。,四、注意事项,可供选择的铬元素标准溶液（1000µg/mL）由国家有色金属及电子材料分析测试中心提供（电话：010-82241362；传真：010-82241346）；也可以由中国计量科学研究院提供（电话：010-64525678-4703)。铬对照贮备溶液应密封，冷暗处保存。 结果判断：标准规定不得过百万分之二(2mg/kg)。由于是微量测定，测定结果的偏差会较大，一般两份样品的相对偏差10%，取平均值即可（低浓度尤其明显）。,四、注意事项,样品检测应严格遵守中国药典2010年版（二部）“明胶空心胶囊”铬项下方法试验，如因试验需要改变样品前处理方法及检测波长，应按照实验室有关质量管理程序(偏离)进行。 若试剂空白溶液测定值过高（宜不超过标准曲线最低浓度点吸光度值的50%），应换用空白干扰小的溶液重新试验。,四、注意事项,注意试验所需的所有仪器均应在计量检定合格效期内。 若供试品溶液浓度过高，可稀释到标准曲线范围内进行测定。,联 系 方 式,钱 洁 0551-3368775 Email：jenniferaiwf126.com,