骨髓细胞学.ppt

骨 髓 细 胞 学 检 查 (Bone Marrow Examination),主要内容,血细胞的生成与发育 正常血细胞形态 常用血细胞化学染色 骨髓细胞检查的临床意义 常见血液病血细胞特征 急性白血病的MICM分型,骨髓是主要造血组织（hemopoietic tissue） 组成：网状组织（reticular tissue） 造血细胞（hemopoietic cell） 基质：调节造血细胞的增殖与分化 观察骨髓中血细胞数量和质量的变化 对造血系统疾病的诊断和防治都有重要意义,一、血细胞生成与发育,造血干细胞的功能特点,造血组织中一类目前尚无形态学特征描述的功能细胞 具有高度自我更新的能力，可维持干细胞数量的恒定 具有多向分化的能力即可向各系列祖细胞分化，然后 增殖分化为各系血细胞,血细胞发生示意图,血细胞发育规律 (原 始 成 熟), 胞 体 大小 (巨核细胞相反,早幼粒较原粒大) 胞 浆 量： 少 多 颜 色：深蓝浅蓝 浅红 颗 粒：无有,非特异性特异性 胞 核 大小 (巨核细胞相反) 核 型： 规则不规则 染色质： 细致疏松粗糙密集紧缩成块 核 仁： 有无 核 膜： 不明显明显 核浆比 大小 (巨核细胞相反),二、正常血细胞形态,红细胞系(Erythrocyte Series),原 红 细 胞 (proerythroblast),早 幼 红 细 胞 (Basophilic erythroblast),中 幼 红 细 胞 (Polychromatic erythroblast),晚 幼 红 细 胞 ( normoblast ),粒细胞系(Granulocytic Series),原粒细胞 （myeloblast）,早幼粒细胞 (promyelocyte),中幼粒细胞 (myelocyte),晚幼粒细胞 (metamyelocyte),杆状核粒细胞 (stab granulocyte ),分叶核粒细胞 (segmented granulocyte),单核细胞系(Monocytic Series),原单核细胞（monoblast） 幼单核细胞（promonocyte） 单核细胞 （monocyte）,淋巴细胞系(Lymphocytic Series),原淋巴细胞 (lymphoblast),幼淋巴细胞 (prolymphocyte),淋巴细胞 (lymphocyte),巨核细胞系 (Megakaryocytic Series),原巨核细胞 （megakaryoblast）,幼巨核细胞 （promegakaryocyte）,颗粒巨核细胞 （granular megakaryocyte ）,产板巨核细胞,浆细胞系统 (Plasmacytic Series),原浆细胞 (plasmablast) 幼浆细胞 (proplasmacyte ) 成熟浆细胞 (plasmacyte ),三、常用血细胞化学染色,血细胞细胞化学染色,以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，应用骨髓涂片进行固定、化学反应显色、复染等程序染色，然后在光镜下观察细胞的化学成分及其变化的一项检验方法 研究血细胞在生理或病理情况下细胞化学成分的变化，有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变 可用作血细胞类型的鉴别，对某些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、发病机制探讨等均有一定价值,血细胞化学染色,过氧化物酶( POX) 非特异性酯酶( NSE) 特异性酯酶 (SE) 糖原染色 (PAS) 中性粒细胞碱性磷酶 ( NAP),过氧化物酶染色 (Peroxidase, POX),原理：H2O2 H2O O2 POX 联苯胺 联苯胺兰亚硝基铁氰化钠 O2 暗蓝色的颗粒 结果：粒细胞(+)；单核细胞( ±)； 淋巴细胞( ),非特异性脂酶 (Non specific esterase, NSE),原理： NSE水解 醋 酸 奈 酚 奈 酚 有色沉淀 重氮染料偶联 临床意义： 单核、巨噬(+),特异性脂酶 (Specific esterase, SE),原理： SE水解 氯醋酸奈酚ASD 奈酚ASD 红色沉淀 重氮盐偶联 临床意义： 粒(+)；单( ±)；淋(),中性粒细胞碱性磷酸酶染色 Neutrophil alkaline phosphatase, NAP,原理： NAP 甘油磷酸钠 磷酸钠甘油 PH 9.2 磷酸钠氯化钙 磷酸钙硝酸钴 硫化钴 硫化铵 + 磷酸钴,NAP临床意义,慢粒NAP，类白NAP 急粒NAP，急淋NAP，急单正常或 再障NAP， PNH者NAP 化脓感染NAP， 病毒感染NAP,糖原染色 (Periodic-schiff. PAS),原理： 过碘酸氧化 1.2乙二醇 双 醛 基 Schiff 红色品红 紫红色 临床意义： 淋粗颗粒或团块状阳性 粒弥漫均匀状阳性 单细颗粒状阳性,铁染色：普鲁士兰反应染色法,原理： 细胞 铁+ 亚铁氰化钾 亚铁氢化铁 呈兰色 临床意义： 缺铁性贫血时：细胞外、内铁依次减少 非缺铁性贫血时：细胞外铁多增高 铁粒幼贫血时：铁粒幼细胞增多，出现环铁,内,外,H+,四、骨髓细胞学检查的临床意义,适 应 症 诊 断 造 血 系 统 疾 病: 白 血 病 贫 血 血小板减少性紫癜 诊 断 非 造 血 系 统 疾 病： 原 虫 感 染 代 谢 性 疾 病 转 移 性 癌 肿 原因不明： 发热、恶病质 肝、脾、淋巴结肿大 血细胞单项或多项减少、增多 周围血出现幼稚细胞、可疑细胞,禁 忌 症 ,明显出血倾向：血友病,常用取材部位,髂后上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 胸骨（对向心性病变阳性率高，有一定危险性） 胫骨粗隆（2岁以下小儿）,骨髓涂片检查的内容和方法,低倍镜检查 （1) 观察涂片的取材、制片、染色是否满意 （2）确定骨髓增生程度(Hypercellularity ) 有核细胞、巨核细胞 （3）注意有无特殊细胞 油镜检查 （1）有核细胞分类 ( Normal rate of cells in different series ) (Normal rate of cells at different stages ) （2）计算：粒红=241 （3）观察细胞形态有无异常 （4）观察有无特殊细胞及寄生虫,骨髓增生程度,增生程度 成熟RBC/有核细胞 有核细胞(%) 极度活跃 1 ： 1 50 明显活跃 10 ： 1 1020 增生活跃 20 ： 1 27 增生减低 50 ： 1 1 极度减低 300 ： 1 0.5,正 常 骨 髓 象,1. 增 生 活 跃 2. 粒 红 比 正 常（24/1） 3. 粒 系(约4060)增 生 良 好，各 阶 段 比 例 适 当 细 胞 形 态 无 异 常 4.红 系(约20)增 生 良 好， 各 阶 段 比 例 适 当， 细 胞 形 态 无 异 常 5.淋巴细胞（约20） 、单核细胞（ 约4）的百分率、各阶段比例及形态正常。 6.巨 核 细 胞（ 735个/1.5）3血片易见，以产 板 巨 多 见 7.可 见 少 量 非 造 血 细 胞 8.无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫,骨髓象检查的临床意义,增生程度 极度活跃亢进：白血病 明显活跃旺盛：白血病、增贫 增生活跃正常 增生减低减低: 慢性再障 极度减低衰竭：急性再障,粒/ 红( 有 核 红 细 胞)：24/1,临 床 意 义 正 常： 正常骨髓象 粒,红两系以外造血系统疾病：ITP、MM 粒,红两系平行增高或减低：再障 增 高：粒系增高 红系减低 减 低：红系增高：增生性贫血 粒系减低：粒缺,五、常见血液病血细胞特征,贫 血,概念：单位容积循环血液中红细胞数、血红蛋白量 及（或）血细胞比容低于参考值 按骨髓增生情况可分为 增生性贫血 增生不良性贫血,缺铁性贫血 (小细胞低色素性贫血),血 象 （1）HGB、RBC，不成比例 （2）小细胞低色素RBC （3）网织红细胞/正常 （4）WBC、PLT正常 骨 髓 象 （1）增生活跃明显活跃 （2）M/E （3）红系增生，以中、晚幼红为主呈核老幼浆 （4）粒系，巨核系正常 （5）外铁消失，内铁减少,再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA) 特 征： 全 血 细 胞 减 少,血 象 1. 全血细胞减少,淋巴细 胞相对增高 2. 网织红细胞减少 骨 髓 象 1. 增生低下 2. 红系(晚幼红多见),粒 系,巨系减 低 3. 非造血细胞增高:浆细 胞,淋巴细胞多见,白 血 病,是造血系统的一种恶性肿瘤 特点为造血组织中白血病细胞呈过度异常增生与分化成熟障碍，并浸润其它器官和组织，而正常的造血功能则受抑制 分为急性和慢性两大类,急性白血病血液学特征共同点,骨髓增生活跃或明显活跃。 一系或两系原始细胞增多。 因白血病类型不同，其它系列血细胞均受抑制而减少 涂片中分裂型细胞和退化细胞增多,急 性 白 血 病(Acute Leukemia),血 象 1. 血红蛋白、红细 胞 减少,可见幼红细胞 2. 白细胞计数不定,以 原幼稚为主 3. 血小板减少,急 性 白 血 病 (Acute leukemia),骨髓 象 1. 增生活跃 2. 原幼稚细胞异常 增生30(非红系) 3. 巨核细胞相对受抑,慢 性 白 血 病 (Chronic Leukemia),血 象 1.白细胞增高,分类以 成熟细胞为主 (慢粒:嗜酸,嗜碱增高) 2. 血小板早期正常, 晚 期降低,慢 性 白 血 病(Chronic Leukemia), 骨 髓 象 1.增生明显活跃 2.粒(淋)系极度增 生, 以成熟为主 3.其它系统受抑,原发性血小板减少性紫癜 Idiopathic Thrombocytopenic Purpura,血象 1.血小板减少,可见异 形、巨大血小板 2.血色素、红、白细 胞正常 骨髓象 1.增生活跃 2.粒系、红系正常 3.巨核:增生、产板巨 减少,成熟障碍,六. 急性白血病的MICM分型,MICM TYPING DIAGNOSIS,MICM Morphology Immunology Cytogenetics Molecular,细胞形态学分型(FAB分型),急淋 L 1 小细胞 L 2 大细胞 L 3 空泡 急髓 M 07,the tradition classification (FAB)of leukemia,According to the Differentiation & Kind of cell acute myeloid leukemia（AML） M0 M1 M2 M7 acute leukemia acute lymphocyte leukemia（ALL） L1，L2，L3 chronic leukemia： CML、CLL,急髓白血病FAB 分 型,M1 急粒未分化型 原粒90( 非红系) M2 急粒部分分化型 原粒30-89 M3 急早粒 早幼粒30 M4 急粒-单 粒单两系细胞均增生 M5 急单 原幼单30% M6 红白血病 红系50且形态异常 原粒(原单)早幼粒(幼单)30 M7 巨核白 原幼巨30,急性淋巴细胞白血病(L1),急性淋巴细胞白血病(L2),急性淋巴细胞白血病(L3),急粒未分化型 (M1),急粒部分分化型（M2）,急性早幼粒细胞白血病（M3）,急性粒单细胞白血病（M4）,急性单核细胞白血病（M5）,急性红白血病（M6）,巨核细胞白血病（M7）,几种常见急性白血病的细胞化学染色,SE:,粒系阳性,单核阴性,阳性:,急粒 急单,POX,NSE:,粒系阴性,PAS,单核阳性,阴性: 急淋(NAP) 急粒(NAP) 急单,粒:片状,淋:粗颗粒,环核,单:细颗粒,免疫学分型,急淋 T细胞-CD1、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8 B细胞-CD9、CD10、CD19、CD20 急髓 CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34,细胞免疫分型 （一）急性白血病细胞免疫表型特点,（二）ALL的免疫表型特点,（三）AML的免疫学分类,IMMUNO-PHENOTYPING,mab M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 CD13 + + + + + - - CD33 + + + + + - - CD14 - ± - + + - - CD41 - - - - - - + Ret - - - - - + - Lectoferrin - + - + - - - CD19 CD7 HLA-DR CD2 MPO T - + - + - B + - + - -,细胞遗传学和分子生物学分型,M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR CML t ( 9 ; 22 ) BCR-ABL,MECHANISM Ph CHROMOSONE,复习题,骨髓检查应用于哪些方面？ 血细胞发育演变的一般规律？ 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？ 骨髓增生程度分级？ 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？ 再障的骨髓象与血象特征？ 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？ 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？ 常用细胞化学染色的鉴别？,