β-内酰胺类抗生素颜色反应快速鉴别系统(讲义-北京修改1).ppt

内酰胺类抗生素 快速鉴别系统,内酰胺类抗生素的结构特点和分类 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 总体思路 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 具体方法与步骤 内酰胺类抗生素的操作要点及注意 事项,内酰胺类抗生素包含的品种较多，剂型几乎覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。,内酰胺类抗生素的结构特点（共性）,母核含有四元-内酰胺环。,结构分类,-内酰胺类药物按骈合环可分为青霉素（骈合五元氢化噻唑环）、头孢菌素（骈合六元氢化噻嗪环）及碳青霉烯类三类。,青霉素类,头孢菌素类,碳青霉烯类,采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分-内酰胺类抗生素与其他药物，且根据颜色的差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物,可疑的-内酰胺类抗生素,羟肟酸铁反应,假药,-内酰胺类抗生素,青霉素类,头孢类,深红色,桔红色,（一）呈色反应,1. 羟肟酸铁反应,呈色,内酰胺类,NaOH,H2NOH,羟肟酸衍生物,H+,Fe3+,羟肟酸铁反应,H+,Fe3+/3,（红、棕、褐）,（开环分解）,似肽键,双缩脲反应 -内酰胺类,内酰胺类,碱性酒石酸铜,¾,¾,¾,¾,¾,®,¾,-,b,碱性酒石酸铜反应,蓝紫,碱性酒石酸铜反应,蓝紫色, 内 酰 胺 类 抗 生 素,口服制剂,注射用粉针剂,片剂、胶囊,颗粒剂、干混悬剂,制 剂 分 类,按辅料不同, 内 酰 胺 类 抗 生 素,片剂、胶囊,注射用粉针剂,辅料成分简单、干扰小,制 剂 特 点,几乎不含辅料或 仅含少量助溶剂， 如精氨酸、碳酸钠,颗粒剂 干混悬剂,辅料含量多、成分复杂、干扰大,主药含量少,辅料成分多,头 孢 氨 苄 颗 粒,【规格】0.125g 0.05g,香 精,色 素,严 重 干 扰 颜 色 反 应 结 果, 内酰胺类抗生素 快 检 系 统 方 法 分 类,按制剂中辅料的多少及种类分为三类： 注射用粉针剂：几乎不含辅料或仅含少量助溶剂，如精氨酸、碳酸钠 片剂、胶囊：辅料成分简单、干扰小 颗粒剂、干混悬剂：辅料含量多、成分复杂、干扰大,注 射 用 粉 针,青霉素类,头孢菌素类,碱性酒石酸铜反应,三氯化铁反应,H-033,H-033,颜色反应鉴别,薄层色谱系统,碱性酒石酸铜反应,三氯化铁反应,H-036,内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路,羟肟酸铁反应,片 剂,青霉素类,头孢菌素类,羟肟酸铁反应,碱性酒石酸铜反应,三氯化铁反应,H-033,H-036,颜色反应鉴别,薄层色谱系统,碱性酒石酸铜反应,三氯化铁反应,H-033,颗 粒 剂 、 干 混 悬 剂,碱性酒石酸 铜(1-5)反应,三氯化铁反应,颜色反应鉴别,薄层色谱系统,H-034,羟肟酸铁反应,- 内 酰 胺 类 抗 生 素,青霉素类,头孢类,注射用粉针,内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 具体方法与步骤,碱性酒石酸铜反应,青霉素钠 氯唑西林钠 苯唑西林钠,氨苄西林钠/舒巴坦钠 阿莫西林钠/克拉维酸钾 氨苄西林钠 氨苄西林钠/氯唑西林钠,阿莫西林钠,美洛西林钠,青 霉 素 类,三氯化铁反应,氨苄西林钠 /舒巴坦钠,阿莫西林钠 /克拉维酸钾,氨苄西 林钠,氨苄西林钠/ 氯唑西林钠,氨苄西林钠 /舒巴坦钠 阿莫西林 /克拉维酸钾 氨苄西林钠 氨苄西林钠 /氯唑西林钠,TLC,阿莫西林钠/克拉维酸钾,氨苄西林钠/舒巴坦钠,氨苄西林钠 /舒巴坦钠,阿莫西林钠 /克拉维酸钾,氯唑西林钠 苯唑西林钠,三氯化铁反应,1%醋酸 反应,氯唑西林钠,苯唑西林钠,微桔红色或 浅桔红色 混浊或沉淀, 有颗粒挂壁,碱性酒石酸铜反应,头孢他啶 头孢曲松钠 头孢唑肟钠 头孢拉定,头孢唑林钠 头孢噻吩钠 头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/ 舒巴坦钠,蓝色变墨 绿色溶液,墨绿色变 棕黄色,美洛培南 亚胺培南/ 西司他丁,头 孢 菌 类,三氯化铁反应,头孢他啶 头孢曲松钠,TLC,头孢曲松钠,头孢 他啶,头孢唑肟钠,头孢拉定,头孢唑林钠 头孢噻吩钠 头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/舒巴坦钠,蓝色变墨 绿色溶液,三氯化铁反应,头孢唑林钠 头孢噻吩钠,TLC,头孢唑 林钠,头 孢 噻 吩 钠,头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/舒巴坦钠,H-033,TLC,头孢呋辛钠,头孢哌酮钠,头孢哌酮钠/舒巴坦钠,头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/舒巴坦钠,H-033,TLC,美洛培南,亚胺培南/西司他丁,H-033,美洛培南 亚胺培南/ 西司他丁,三氯化铁反应,片剂 胶囊,- 内 酰 胺 类 抗 生 素,羟肟酸铁反应,阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 氨苄西林 青霉素V钾,头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄,头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯,头孢克洛,阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林 青霉素V钾,碱性酒石酸铜反应,青霉素V钾,阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林,三氯化铁反应,氨苄西林,TLC,阿莫西林,阿莫西林,克 拉 维 酸 钾,H-035,阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林,头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨 苄,三氯化铁 反应,头孢拉定 头孢氨苄,头孢羟氨苄,TLC,头孢拉定,头孢氨苄,头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯,碱性酒石 酸铜反应,头孢呋辛酯,盐酸头孢他美酯,头孢泊肟酯,颗粒剂 干混悬剂,- 内 酰 胺 类 抗 生 素,三氯化铁 反应,头孢氨苄/甲氧苄啶 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 头孢克肟,头孢泊肟酯,头孢地尼,头孢氨苄 /甲氧苄啶 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 头孢克肟,碱性酒石 酸铜反应 （1 5）,头孢氨苄/甲氧苄啶,头孢氨苄 头孢拉定,头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾,头孢克肟,深蓝紫色,浅墨绿色,头孢羟氨苄,墨绿色,深红色,深棕色,头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾,TLC,头 孢 克 洛,阿 莫 西 林,阿 莫 西 林,克 拉 维 酸 钾,H-034,操作要点及注意事项,颜 色 反 应,颜色反应鉴别 一些品种（制剂）的羟肟酸铁反应和三氯化铁反应，反应后溶液的颜色深浅及溶液状态（澄清、浑浊、沉淀等）的判断受实验人员的主观因素的影响较大。为便于判断，标准正文中采用以“或”连接几种颜色、状态的方法进行叙述，举例如下：,注射用粉针剂的羟肟酸铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色混浊或溶液，照片如下：,注射用粉针剂的三氯化铁反应：微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀，照片如下：,颗粒剂、干混悬剂的三氯化铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色，照片如下：,一些品种（制剂）的碱性酒石酸铜反应，反应现象是颜色渐变的过程，如“深葡萄紫色变深棕色”、“墨绿色变棕黄色”、“蓝色变墨绿色”、“深葡萄紫色变深墨绿色”等，且变化速度的快慢依品种各异。因此，操作该反应时需仔细观察现象。,样品的溶解性对颜色结果的影响,注射用亚胺培南西司他丁加水溶解时，发现溶解性不好使供试品溶液出现混浊，但不影响反应现象的观察和结果的判断,辅料对颜色反应结果的影响,由于注射剂辅料较少直接溶解即可，不需过滤；片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大，本实验仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色为主；颗粒剂干混悬剂用普通的过滤方法很难过滤，辅料对实验结果会产生一定影响，大部分颗粒剂仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色，参考快检手册的图片仔细观察颜色,薄 层 色 谱,操作要点及注意事项,操 作 要 点,选择参比物的依据,Rf值的计算,Rf值的计算应以UV254nm下检视的斑点位置为准（舒巴坦钠以碘蒸气熏蒸后的斑点位置计），注意从斑点前沿开始测量。,以Rf值结合相对Rf值定性的稳定性 和重现性比单独以Rf值定性高。,展开剂在展开过程的挥发问题,由于本系列的展开剂中有乙醚和甲酸，挥发性较强，在展开过程中一定要注意圆形展开缸的密闭性，解决方案：在展开缸的盖子与缸的接触的地方要均匀涂布真空硅脂，且用夹子夹好,注意事项,舒巴坦钠UV254nm下检视无斑点，经碘蒸气熏蒸后斑点颜色依然较浅，操作时需仔细观察。,供试品溶液的制备：参照【取样方法参照表】取本品一包，按标示量加入稀乙醇，振摇23分钟，制成每1ml约含25mg阿莫西林的溶液，静置，取上清液作为供试品溶液。,颗粒剂 干混悬剂样品前处理,其 他,因头孢氨苄与头孢拉定的化学结构十分相近，采用目前建立的化学快检方法无法对二者的各种制剂进行有效鉴别，鉴别上述两个品种时应注意结合其它方法，如近红外鉴别、授权HPLC法鉴别。,头孢氨苄,头孢拉定,谢 谢 大 家 ！,