缺氧环境肝癌SMMC.ppt

缺氧环境肝癌SMMC-7721细胞ABCG2和HIF-l的表达及其关系,卿小松，孔宪炳 (重庆医科大学附属第一医院肝胆外科),研究背景,1、 ABCG2是近年来发现的三磷腺苷结合盒( ATP binding cassette ，ABC)转运体蛋白家族新成员。研究表明，ABCG2参与了多种肿瘤的 发生、发展及耐药，并能维持干细胞特性。缺氧诱导因子一1(hypoxia inducible factor-1 alpha，HIF-1)是目前发现的介导细胞低氧反应最关 键的核转录因子，它可促进血管形成，维持细胞氧及代谢平衡，以保证 肿瘤生长，并导致化疗耐受。 2、 本实验研究了在缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞ABCG2和 HIF-1表达的变化，探索二者表达的关系，并进一步探讨缺氧诱导 ABCG2表达的可能机制，为抗肿瘤治疗提供理论依据。,研究方法,1、SMMC-7721细胞在含10% 小牛血清的RPMI 1640培养基中培养， 将其分为对照组及缺氧组。缺氧组又分为缺氧24h组、缺氧48h组、 缺氧72h组。 2、收集细胞，检测HIF-1和ABCG2蛋白，选GAPDH为内参。 3、缺氧72 h组SMMC一7721细胞加入HIF-1抑制剂YC-1，按浓度分 别为1.0 molL、2.0 molL、4.0 molL组，将不含YC一1的缺氧72 的SMMC一7721细胞设为YC-1对照组。各组分别处理24 h后，用 Western blot检测各组细胞中HIF-1、ABCG2蛋白的含量。 4、用统计学方法分析。,实验结果,结论,缺氧环境中，SMMC-7721细胞ABCG2和HIF-l的表达上 并随时间延长而增加，YC-1抑制HIF-1后可有效下调 ABCG2的表达。本实验表明缺氧时SMMC-772细胞生存 耐药的机制可能是通过缺氧诱导HIF-l的表达而实现，后者 上调ABCG2的表达，增强了肿瘤细胞对缺氧环境 的适应能力及化疗抵抗能力。抑制HIF-1aABCG2这一径 有望成为治疗肝癌以及逆转肝癌患者耐药的治疗靶点。,