[商检标准]-SN 0345-1995 出口蔬菜中杀虫双残留量检验方法.pdf

SN 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 S N 0 3 4 5 一 9 5 出口蔬菜中杀虫双残留量检验方法 Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f d i me h y p o r e s i d u e s i n v e g e t a b l e s f o r e x p o r t 1 9 9 5 一 0 5 一 2 9 发布 1 9 9 5 一 1 ， 一 0 ， 实施 中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口蔬菜中杀虫双残留量检验方法 034 5一 95 Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f d i me h y p o r e s i d u e s i n v e g e t a b l e s f o r e x p o r t 主题 内容与适 用范围 本标准规定 了 出口蔬菜中杀虫双残留量检验的抽样， 制样和气相色谱测定方法。 本标准适用于出口青菜中杀虫双残留量的检验。 抽样和制样 2 . 1 检验批 以不超过 1 0 0 0 件为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征， 如包装、 标记、 产地、 规格和等级等。 2 . 2 抽样数量 批量， 件最低抽样数， 件 1 2 5 1 2 61 00 5 1 01- 2 50 1 0 2 51 1 0 00 1 5 2 . 3 抽样方法 按2 . 2 规定的 抽样件数随机抽取， 逐件开启。 每 件至少取5 0 0 g 作为原始祥品， 其总量不少于2 k g , 放入洁净容器内， 加封， 标明标记， 及时送交实验室。 2 . 4 试样制备 从原始样品中取可食部分， 用四分法缩分出不少于 5 0 09样品放人组织捣碎机中捣碎、 混匀， 均分 成两份试样. 装入洁净容器中， 加封， 标明标记。 2 . 5 试样保存 将试样于一1 8 以下冷冻保存。 注:在抽样及制样的操作过程中， 必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 3 测定方法 3 , 1 方法提要 用稀盐酸溶液提取试样中的杀虫双， 在碱性条件下， 以硫化钠作催化剂. 使杀虫双转化为沙蚕毒素， 然后用乙酸乙酷提取， 液一液分配净化以后， 用配有电子俘获检测器的气相色谱仪进行测定， 外标法定 量 。 I2 试剂和材料 3 . 2 . 1 无水硫酸钠: 分析纯， 经6 5 0 C 灼烧 4 h以上， 置于干燥器内备用。 3 . 2 . 2 乙酸乙酷: 分析纯， 经全玻璃系统重蒸馏。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1 9 9 5 - 0 5 - 2 9 批准1 9 9 5 - 1 1 - 0 1 实施 I S N 03 45 一 9 5 3 . 2 . 3 助滤剂: 硅藻土( c e l i t e ) 5 4 5 0 3 . 2 . 4 盐酸: 分析纯， 配成。 . 1 m o l / L , 2 m o l / L水溶液。 3 - 2 - 5 氢氧化钠: 分析纯， 配成 2 mo l / L , 1 0 mo l / L水溶液。 3 . 2 . 6 硫化钠: 分析纯， 配成。 ， 2 m o l / L 水溶液。 12 . 7 杀虫双标准品: 纯度)”肠。 3 . 2 . 8 杀虫双标准溶液: 准确称取杀虫双标准品， 以燕馏水配成 0 . 1 m g / mL的标准贮备液， 用时根据 需 要用蒸馏水稀释至适当 浓度的标准工作溶液。 3 . 3 仪器和设备 3 , 3 - ， 气相色谱仪: 配备电子俘获检测器. 3 - 3 - 2 微量注射器: 1 p L , 1 0 fL L , 3 . 3 . 3 高速组织捣碎机: 配有捣碎杯。 3 . 3 - 4 全玻璃系统蒸馏装置。 13 . 5 分液漏斗: 5 0 m L , 1 2 5 mL , 3 . 3 . 6 平底漏斗: 9 c m( 内径) 。 3 . 3 . 7 抽滤瓶: 5 0 0 m L , 3 . 3 - 8 刻度试管: 具磨口 塞， 1 0 m L , 3 . 4 测定步骤 3 . 4 . 1 提取 称取试样1 0 0 g ( 精确至。1 g ) , 置于捣碎杯中， 加入1 0 0 m L盐酸溶液( 0 . l m o l / L ) ， 用组织捣碎机 匀浆 5 m i n , 经铺有助滤剂的布氏漏斗过滤于 2 5 0 m L圆底烧瓶内， 滤渣用 2 X 2 5 mL盐酸溶液 ( 0 . 1 m o l / L ) 洗涤并过滤， 合并滤液。 3 . 4 . 2 转化及净化 用氢氧化钠( 2 m o l / L) 将上述滤液的 p H调至 8 . 5 -9 . 0 ， 加入 2 mL硫化钠溶液( 0 . 2 m o l / L ) ， 于 7 0 水浴中加热 2 h 。待溶液冷却， 用 3 X2 0 mL乙酸乙酷提取， 合并提取液。用3 X5 mL盐酸溶液 ( 2 mo l / L ) 提取乙酸乙酷提取液， 合并盐酸提取液。用氢氧化钠溶液( 1 0 mo l / L ) 调至碱性， 立即( 2 0 mi n 之内) 用5 m L 乙酸乙 醋提取， 提取 液经无 水硫酸钠脱水， 供气相色谱测定。 3 . 4 . 3 标准工作溶液的处理 移取适量的杀虫双标准工作溶液， 按试样提取( 3 . 4 . 1 ) 、 转化和净化( 3 . 4 . 2 ) 进行处理后， 供测定用。 3 . 4 . 4 测定 3 . 4 - 4 . 1 色谱条件 从下列a , b , c三种条件中任选一种: a . 色谱柱: 玻璃柱， 1 . 1 mX 3 m m ( 内 径) ， 填充 物3 %( m / m ) O V - 1 涂于C h r o m o s o r b W H P ( 8 0 - 1 0 0目) ; 色谱柱温度: 1 2 0 0C; 进样口温度: 2 2 0 “C ; 检测器温度: 2 5 0 C ; 氮气: 纯度)9 9 . 9 9 0 0 , 7 0 m L / m in , 在此条件下沙蚕毒素的保留时间为 2 . 8 min , b . 色谱柱: 玻璃柱， 2 . 0 mX3 mm( 内径) ， 填充物 1 . 5 %( m / m) O V- 1 7 +2 %Q F - 1 ( m/ m) 涂于 C h r o mo s o r b W HP( 8 0 -1 0 0目) ; 色谱柱温度: 1 7 0 'C; 进样口温度: 2 2 0 'C; 检测器温度: 2 5 0 “C; s N 0345 一 95 氮气: 纯度)9 9 . 9 9 %, 7 0 m L / m i n , 在 此条件下沙蚕毒素的保留 时间 为2 : 4 m i n , c . 色谱柱: 石英毛细管色谱柱， 5 mX0 . 5 3 mm( 内径) ， H P - 1 键合固定相， 2 . 6 p m( 膜厚) ; 色谱柱温度: 1 3 0 -C; 卜朋 进样口温度: 2 2 0 'C; 检测器温度: 2 5 0 'C ; 氮 气: 纯度)9 9 . 9 9 0 0 , 1 4 m L / m i n , 在此条件下沙蚕毒素的保留时间为 2 . 1 mi n , 3 . 4 - 4 . 2 色谱测定 分别注人 5 p L标准工作溶液和样品溶液的待测液于气相色谱仪中， 按 3 . 4 . 4 . 1 的色谱条件进行分 析。样品溶液和标准工作液的响应值应在仪器的检测线性范围之内。否则应对样液和标准工作溶液进 行适当稀释。 15 空白试验 除不加试样外， 按上述测定步骤进行。 I6 结果计算和表述 用色谱数据处理机或按下式计算试样中杀虫双含量: X=h ··V h ,·m 式中: X试样中杀虫双的含量， m g / k g ; h 样液中杀虫双转化物( 沙蚕毒素) 的峰高， mm; 凡标准工作溶液中杀虫双转化物( 沙蚕毒素) 的峰高, m m; c 标 准 工作 溶 液浓 度， p g / m L ; V 样液最终定容体积， m L; m称取的试样量, g , 注: 计算结果需扣除空白值。 测定低限 ， 回收率 4 . 1 测定低限 本方法测定低限为。 . 0 1 m g / k g , 4 . 2 回收率 回收率的实验数据: 杀虫双添加浓度在 。 . 0 1 -0 . 5 m g / k g范围内， 回收率为 7 2 %-1 0 3 % o 附加说明: 本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。 本标准由中国进出口商品检验技术研究所负责起草。 本标准主要起草人庄无忌、 邱月明。 P r o f e s s i o n a l S t a n d a r d o f t h e P e o p l e ' s R e p u b l i c o f C h i n a f o r I mp o r t a n d E x p o r t C o m m o d i t y I n s p e c t i o n S I N 03 45 一 9 5 Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f d i me h y p o r e s i d u e s i n v e g e t a b l e s f o r e x p o r t 1 S c o p e a n d f i e l d o f a p p l i c a t i o n T h is s t a n d a r d s p e c i f i e s t h e m e t h o d s o f s a mp l i n g , s a mp l e p r e p a r a t i o n a n d d e t e r m i n a t io n b y g a s c h r o m a t o g r a p h y o f d ime h y p o r e s i d u e s i n v e g e t a b l e s f o r e x p o r t . T h is s t a n d a r d is a p p l i c a b l e t o t h e d e t e r mi n a t i o n o f d i m e h y p o r e s id u e s i n g r e e n c a b b a g e f o r e x - po r t . 2 S a mp l i n g a n d s a mp l e p r e p a r a t i o n 2 . 1 I n s p e c t i o n l o t T h e q u a n t i t y o f a n i n s p e c t io n l o t s h o u ld n o t b e m o r e t h a n 1 , 0 0 0 p a c k a g e s . T h e c h a r a c t e r i s t ic s o f t h e c a r g o wi t h i n t h e s a me i n s p e c t i o n l o t , s u c h a s p a c k i n g , m a r k , o r i g i n , g r a d e a n d s p e c i f ic a t i o n , s h o u l d b e t h e s a m e . 2 . 2 Qu a n t i t y o f s a m p l e t a k e n Nu mb e r o f p a c k a g e s i n Mi n i mu m n u mb e r o f e a c h i n s p e c t i o n l o t p a c k a g e s t o b e t a k e n 1 - 2 5 1 2 6- 1 00 5 1 01 - 2 50 10 2 51 - 1 00 0 15 2 . 3 S a m p l i n g p r o c e d u r e A n u mb e r o f p a c k a g e s s p e c i f i e d i n 2 . 2 a r e t a k e n a t r a n d o m a n d o p e n e d o n e b y o n e . At l e a s t 5 0 0 g r a ms o f t h e s a m p l e s h o u l d b e t a k e n f r o m e a c h p a c k a g e a s t h e p r ima r y s a m p l e . Th e t o t a l w e i g h t o f a l l p r i m a r y s a m p l e s s h o u l d n o t b e l e s s t h a n 2 k g , w h i c h s h o u l d b e s e a l e d , l a b e l e d a n d s e n t t o l a b o r a t o r y i n ti m e . 2 . 4 P r e p a r a t i o n o f t e s t s a m p l e F r o m t h e c o mb i n e d p r i m a r y s a m p l e , t h e e d i b l e p o r t io n s a r e t a k e n a n d r e d u c e d t o n o t l e s s t h a n 5 0 0 g b y q u a r t e r i n g , w h i c h i s h o mo g e n i z e d b y b l e n d i n g a n d t h e n d i v i d e d i n t o t w o e q u a l p o r t i o n s . E a c h p o r t io n i s p l a c e d i n a c l e a n c o n t a i n e r a s t e s t s a mp l e I w h i c h i s t h e n s e a l e d a n d l a b e le d . 2 . 5 S t o r a g e o f t e s t s a m p l e T h e t e s t s a mp le s s h o u l d b e s t o r e d b e l o w一1 8 C“ No t e ; I n t h e c o u r s e o f s a mp l in g a n d s a mp l e p r e p a r a t i o n , p r e c a u t io n mu s t b e t a k e n t o a v o i d t h e c o n t a min a t i o n o r a n y f a c t o r s w h i c h ma y c a u s e t h e c h a n g e o f r e s id u e c o n t e n t . A p p r o v e d b y t h e S t a t e A d m i n i s t r a t i o n o f I m p l e me n t e d f r o m N o v . 1 , 1 9 9 5 I m p o r t a n d E x p o r t C o m mo d i t y I n s p e c t io n o f t h e P e o p l e ' s R e p u b l i c o f C h i n a o n Ma y 2 9 , 1 9 9 5 S N 03 45一 9 5 3 Me t h o d o f d e t e r mi n a t i o n 3 . 1 P r i n c i p l e D i m e h y p o , e x t r a c t e d l , y d i l u t e h y d r o c h l o r i c a c i d s o l u t i o n , i s c o n v e r t e d i n t o n e r e i s t o x in in a l k a l i n e me d iu m wit h s o d i u m s u l f i d e a d d e d a s c a t a l y s t . T h e n e r e i s t o x i n i s e x t r a c t e d b y e t h y l a c e t a t e , p u r if i e d b y l i q u i d - l i q u i d p a r t i t i o n a n d f in a l l y d e t e c t e d b y g a s c h r o ma t o g r a p h e q u ip p e d w i t h e l e c t r o n c a p t u r e d e - t e c t o r . E x t e r n a l s t a n d a r d me t h o d i s u s e d f o r q u a n t i t a t i o n . 3 . 2 R e ; g e n t s a n d m a t e r ia l s 3 . 2 . 1 S o d i u m s u l f a t e : A n h y d r o u s , a n a l y t ic a l g r a d e , h e a t e d a t 6 5 0 0C f o r mo r e t h a n 4 h , k e p t i n a d e s - E t h y l a c e t a t e : A n a l y t i c a l g r a d e , r e d i s t i l l e d i n a l l g l a s s s y s t e m. F i l t e r a i d: C e b t e 5 4 5 . H y d r o c h l o r i c a c i d ; A n a l y t ic a t g r a d e , f r o m w h i c h 2 m o l / L a n d 0 . 1 mo t / L a q u e o u s s o l u t i o n s a r e p r e p a r e d . 12 . 5 S o d i u m h y d r o x i d e ; A n a l y t ic a l g r a d e , f r o m wh ic h 1 0 m o l / L a n d 2 mo l / L a q u e o u s s o l u t i o n s a r e p r e p a r e d 3 . 2 . 6 S o d i u m s u l f id e ; A n a l y t i c a l g r a d e , f r o m w h i c h 0 . 2 m o l / L a q u e o u s s o l u t i o n i s p r e p a r e d . 3 . 2 . 7 D i m e h y p o s t a n d a r d ; P u r i t y 9 9 0 o - 3 . 2 . 8 D i m e h y p o s t a n d a r d s o l u t i o n : Ac c u r a t e l y w e i g h a n a d e q u a t e a m o u n t o f s t a n d a r d d i m e h y p o , d、 s o l v e i n d i s t i l l e d w a t e r t o p r e p a r e a s t a n d a r d s t o c k s o l u t i o n o f 0 . 1 m g / mL . A c c o r d i n g t o t h e c o n c e n t r a - t i o n r e q u i r e me n t , p r e p a r e a s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n b y d i l u t i n g t h e s t o c k s o l u t io n w i t h d i s t i l l e d w a - ter. 3 . 3 A p p a r a t u s a n d e q u i p me n t 3 . 3 . 1 , G a s c h r o m a t o g r a p h : E q u i p p e d w i t h e l e c t r o n c a p t u r e d e t e c t o r . 3 . 3 . 2 Mic r o - s y r i n g e : I p L , 1 0 p L . 3 . 3 . 3 H i g h s p e e d b l e n d e r , E q u i p p e d w it h g l a s s b l e n d i n g c u p . 3 . 3 . 4 A l l g l a s s d i s t i l l i n g s y s t e m . 3 . 3 . 5 S 叩a r a t o r y f u rt n e 1 : 5 0 r n L , 1 2 5 mL 3 . 3 . 6 B u c h n e r f u n n e l : 9 c m ( i d ) . 3 . 3 . 7 V a c u u m f i l t r a t i o n f l a s k ; 5 0 0 mL . 3 . 3 . 8 G r a d u a t e d t e s t t u b e : 1 0 mL, w i t h g r o u n d s t o p p e r . 3 . 4 P r o c e d u r e 3 . 4 . 1 E x t r a c t i o n We i g h 1 0 0 g ( a c c u r a t e t o 0 . 1 g ) o f t h e t e s t s a mp l e i n t o a b l e n d in g c u p , a d d 1 0 0 m L o f 0 . 1 MO O h y d r o c h l o r ic a c i d s o lu t i o n , h o m o g e n i z e a n d e x t r a c t t h e s a m p l e f o r 5 m i n . F i l t e r t h e h o mo g e n i z e d s a m- p i e b y s u c t io n t h r o u g h a B u c h n e r f u n n e l w i t h f il t e r a id i n t o a 2 5 0 m L r o u n d - b o t t o m f l a s k . Wa s h t h e r e s i d u e w i t h 2 X2 5 mL o f 0 . 1 m o l / L h y d r o c h l o r i c a c i d s o l u t io n , c o m b i n e t h e f i l t r a t e s . 3 . 4 . 2 C o n v e r s io n a n d c l e a n u p Ad j u s t t h e c o mb i n e d s o l u t i o n w i t h 2 m o t / I . s o d i u m h y d r o x i d e s o l u t i o n t o p H 8 . 5 -9 . O , a d d 2 mL o f 0 . 2 mo l / L s o d i u m s u l f id e s o l u t i o n, h e a t a t 7 0 、 f o r 2 h i n a wa t e r - b a t h . Af t e r c o o l e d, e x t r a c t t h e r e - a c t i o n p r o d u c t 3 t i m e s , e a c h w i t h 2 0 ml , o f e t h y l a c e t a t e , C o mb i n e t h e e x t r a c t s a n d e x t r a c t i t 3 t ime s , e a c h w i t h 5 mL o f 2 t n o l / 1 . h y d r o c h lo r i c a c i d s o l u t i o n . C o mb i n e t h e e x t r a c t s a n d a d j u s t w i t h 1 0 m o l / L s o d i u m h y d r o x i d e s o l u t i o n t o a l k a l i n e , i n s t a n t l y ( w i t h i n 2 0 m i n ) e x t r a c t it w i t h 5 m l - o f e t h y l a c e t a t e S N 034 5一 95 D e h y d r a t e t h e o r g a n i c e x t r a c t wit h a n h y d r o u s s o d i u m s u l f a t e a n d t h e s o l u t i o n i s u s e d f o r g a s c h r o - m a t o g r a p h i c d e t e r m i n a t io n . 3 . 4 . 3 T r e a t m e n t o f s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n : T r a n s f e r a s u i t a b l e a mo u n t o f d i m e h y p o s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t io n i n t o a c o n t a i n e r , p r o c e e d wit h t h e s a m e p r o c e d u r e s u s e d f o r t h e s a m p l e e x t r a c t i o n ( 3 . 4 . 1 ) , c o n v e r s i o n a n d c l e a n u p ( 3 . 4 . 2 ) a n d t h e s o l ut i on i s us e d a s an e xt e r na l s t a nd ar d f o r GC de t e r mi na t i on. 3 . 4 . 4 De t e r mi n a t io n 14 . 4 . 1 G C o p e r a t i n g c o n d i t i o n C h o s e o n e o f t h e f o l l o w i n g t h r e e c o n d i t i o n s o f a , b , c : a . C o l u m n ; Gla s s , l . 1 mX3 m m( i d ) , p a c k e d w i t h 3 %( m/ m) O V - 1 o n C h r o m o s o r b W H P ( 8 0 - 1 0 0 me s h) ; C o l u mn t e mp e r a t u r e: 1 2 0 'C; I n j e c t i o n p o r t t e mp e r a t u r e : 2 2 0 'C; De t e c t o r t e mp e r a t u r e : 2 5 0 'C; N i t r o g e n : P u r i t y 9 9 . 9 9 %, 7 0 mL / mi n . Un d e r t h e a b o v e me n t i o n e d c o n d i t i o n s , t h e r e t e n t i o n t i me o f n e r e is t o x i n i s 2 . 8 mi n . b . C o l u m n : G l a s s , 2 . 0 t o X3 t u r n ( i d ) , p a c k e d wi t h 1 . 5 0 o ( m/ m) O V- 1 7 +2 %( m/ m) QF - 1 o n Ch r o mo s o r b W HP( 8 0 - 1 0 0 me s h ) ; Co l u mn t e mp e r a t u r e: 1 7 0 'C; I n j e c t i o n p o r t t e mp e r a t u r e; 2 2 0 'C; De t e c t o r t e mp e r a t u r e : 2 5 0 V; Ni t r o g e n : P u r i t y 9 9 . 9 9 %, 7 0 mL / m i n . Un d e r t h e a b o v e me n t i o n e d c o n d it i o n s , t h e r e t e n t i o n t i me o f n e r e i s t o x i n i s 2 . 4 mi n . e . C o l u m n ; F u s e d s il i c a c a p il l a r y , 5 mX0 . 5 3 mm( i d ) , H P - 1 b o n d e d s t a t io n a r y p h a s e , f i l m t h i c k - n e s s 2 . 6 p m; C o lu mn t e mp e r a t u r e : 1 3 0 C; I n j e c t i o n p o r t t e mp e r a t u r e: 2 2 0 'C; D e t e c t o r t e mp e r a t u r e : 2 5 0 'C; N i t r o g e n ; P u r i t y 9 9 . 9 9 0 a , 1 4 mL / m i n . Un d e r t h e a b o v e me n t i o n e d c o n d it i o n s , t h e r e t e n t i o n t i me o f n e r e i s t o x in is 2 . 1 mi n . 3 - 4 . 4 . 2 GC d e t e r min a t i o n A c c u r a t e l y i n je c t 5 p L o f t h e t e s t s a m p l e s o l u t i o n a n d s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n r e s p e c t i v e l y i n t o t h e g a s c h r o ma t o g r a p h a n d c a r r y o u t t h e a n a l y s is u n d e r t h e c o n d i t i o n i n d i c a t e d i n 3 . 4 . 4 . 1 . T h e r e - s p o n s e s o f n e r e i s t o x i n i n t h e t e s t s a m p l e s o l u t i o n a n d s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n s h o u l d b e i n t h e l i n e a r r a n g e o f t h e i n s t r u m e n t a l d e t e c t io n . O t h e r w i s e , s u i t a b le d i l u t i o n s h o u l d b e m a d e t o t h e s a mp l e s o l u t io n a n d s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n 1 5 B l a n k t e s t Th e o p e r a t io n o f t h e b l a n k t e s t i s t h e s a m e a s t h a t d e s c r i b e d i n t h e me t h o d o f d e t e r mi n a t i o n , b u t wi t h t h e o mi s s i o n o f s a m p l e a d d i t i o n . 3 . 6 C a l c u la t i o n a n d e x p r e s s i o n o f r e s u l t T h e c a l c u l a t io n o f r e s u l t i s c a r r i e d o u t b y GC d a t a p r o c e s s o r o r a c c o r d i n g t o t h e f o l