原癌基因在生精细胞中的表达及其作用.pdf

· 5 3 2· 第 1 1 卷第7 期 2 0 0 5 年7 月 中华男科学杂志 N a t i o n a l J o u r n a l o f A n d r o l o g y Vo l . 1 1 No . 7 J u l . 2 0 0 5 会 宗 摘要: j 叁 原癌基因在生精细胞中的表达及其作用 杨俊玲综述; 徐斯凡审校 ( 江西医学院生理学教研室， 江西 南昌3 3 0 0 0 6 ) 象丸生精细胞中有许多原癌基因特异表达。在正常肇丸生精过程中， 原癌基因的正常表达对精原细胞的有 丝分裂、 精母细胞的减数分裂及精子变形、 成熟有重要的调控作用。 关键词: 原癌基因; 生精细胞; 表达; 调控 中图分类号: R 3 3 9 . 2 ; Q 3 4 4 十 . 1 3文献标识码: A文章编号: 1 0 0 9 - 3 5 9 1 ( 2 0 0 5 ) 0 7 -0 5 3 2 - 0 4 E x p r e s s i o n o f P r o t o - o n c o g e n e s a n d I t s R o l e in S p e r m a t o g e n ic C e l l s Y A N G J u n - l i n g ， X U S i - f a n D e p a r t m e n t o f P h y s i o l o g y ， J i a n g x i M e d i c a l C o l l e g e ， N a n c h a n g , J i a n g x i 3 3 0 0 0 6 ， C h i n a C o r r e s p o n d e n c e t o : Y A N G J u n - l i n g ， E - m a i l : y a n g i u n l i n g 4 1 9 y a h o o . c o m . c n A b s t r a c t : T h i s a rt ic l e r e v i e w s t h e s p e c i f ic e x p r e s s i o n o f m a n y p r o t o - o n c o g e n e s d u r i n g m a l e g e r m c e l l d e v e l o p m e n t . T h e n o r m a l e x p r e s - s i o n o f p r o t o - o n c o g e n e s p l a y s a n i m p o r ta n t r o l e i n t h e r e g u l a t io n o f s p e r m a t o g o n i a l m it o s i s ， s p e r m a t o c y t e m e i o s i s a s w e l l a s s p e r m i o g e n - e s i s a n d s p e r m m a t u r a t i o n . N a t l J A n d r o l , 2 0 0 5 , 1 1 ( 7 ) : 5 3 2 - 5 3 5 K e y w o r d s : p r o t o - o n c o g e n e ; s p e r m a t o g e n i c c e l l ; e x p r e s s i o n ; r e g u l a t i o n 原癌基因又称细胞癌基因， 是一类细胞内高度 保守的正常基因。这类基因在正常细胞中的表达严 格受时间、 空间、 程序的调控， 通过其表达产物 蛋白质分子调节不同组织细胞增殖及分化。采用免 疫组化、 W e s t e r n 印迹及核酸杂交等先进技术分析表 明， 在正常翠丸生精细胞中有原癌基因的表达产物。 进一步研究发现， 其表达产物在精原细胞的有丝分 裂、 精母细胞的减数分裂及精子细胞的变形、 成熟过 程中起重要作用。本文就近年来原癌基因在生精细 胞的表达及其调控作用的研究进展作一综述。 1 原癌基因与精原细胞 1 . 1 c - k i t 基因 精原细胞包括A型、 I n型, B型精 原细胞， A型精原细胞又分为A s , A p r , A a l , A ， 一 A , 型。其中A 。 细胞是精原干细胞， 通过有丝分裂增 殖、 分化为其他类型的生精细胞。为了研究。 - k it 在 精原细 胞中 的 表 达 情况， S c h r a n s - S t a s s e n 等川对维生 素A缺乏症( v i t a m i n A d e f i c i e n c y , V A D ) 及经过视黄 醛治疗后的小鼠动物模型进行观察， 利用3 种不同 的c - K i t 抗体进行免疫组化， V A D小鼠的A型精原 细胞只能与其中1 种 c - K i t 抗体结合， 阳性细胞为 ( 8 2 士 4 ) %。而经视黄醛治疗2 4 h 小鼠A型精原细 胞与3 种 c - K i t 抗体均能结合着色， 阳性细胞数为 ( 8 6 土 3 ) % 。这些数据提示， 两种动物模型中A型 精原细胞表达c - K i t 不同， 同时也说明了在视黄醛治 疗后 A型精原细胞发生了变化。为了进一步证实A 型精原细胞对c - K i t 的阶段依赖性， 分别进行正常小 鼠生精上皮周期v i , v u , I X / X、) M 中A型精原细胞 收稿日期 基金项目 作者简介 通讯作者 : 2 0 0 4 - 0 8 - 2 7 ; 修回日 期: 2 0 0 4 - 1 1 - 1 1 : 国 家自 然科学基金( 3 0 3 6 0 0 3 2 ) 杨俊玲( 1 9 7 6 - ) ， 女， 山西交城县人， 住院医师， 硕士研究生， 从事生殖内分泌专业。 杨俊玲， E - m a i l : y a n g j u n l i n g 4 1 9 y a h o o . c o m . c n 第7 期杨俊玲 等原癌基因在生精细胞中的表达及其作用 5 3 3 c - K i t 染色阳性细胞计数， 结果表明M期为( 1 6 1 2 ) %, V II 期为 一( 4 5 土 1 5 ) %， 而IX / X 和M I 期阳 性率明显 增高， 分别为( 7 8 士 1 4 ) %和( 9 0 土 1 . 9 ) %， 而此期也 正是未分化A型精原细胞的增殖期， 其间产生大量 的A a l 细胞。此外， 免疫组化c - K i t 阳性细胞经常成 簇存在， 表明c - K i t 主要在A a l 细胞表达。与此相一 致， c - K i t 受体( K i 产 9 F ) 突变的1 0日 龄小鼠攀丸中 增 殖的精原细胞明显减少， 而且生精小管厚度与出生 后6 一 7 d 的 小管厚度相类似 2 ) 0以 上实验结果表 明: 未分化的A型精原细胞与分化的A型精原细 胞中。 - k i t 表达不同; ( 2 ) c - k it 在A型精原细胞分化过 程中起重要作用。为了 研究c - K it 的作用机制， F e n g 等3 和D o l c i 等4 利用磷脂酞肌醇 - 3 激酶( p h o s - p h o i n o s it id e - 3 k in a s e , P l 3 - K ) 抑制剂沃漫青霉素 ( w o r tr m a n n i n ) 、 核糖体蛋白S 6 激酶( P 7 0 r i b o s o m a l p r o t e i n S 6 k i n a s e , P 7 0 S6 K ) 抑制剂雷帕 霉素( r a p a m y - c i n ) 和丝裂原激活的蛋白激酶激酶( m i t o g e n - a c t i v a - t e d p r o t e i n - k i n a s e k i n a s e , M A P K K ) 抑制剂U 0 1 2 6 ， 采 用免疫印迹及免疫沉淀法分析表明， c - K i t 受体激酶 与其配体干细胞因子( s t e m c e l l f a c t o r , S C F ) 结合， 通 过S C F / c - K i t / P I 3 - K / P K B / P 7 0 SI K 及M A P K K / M A P K / 胞外信号调节激酶( e x t r a c e l l u l a r s i g n a l - r e g u l a t e d k i - n a s e , E R K ) 通路来增加核内周期蛋白 D , ( c y c l i n D , ) 的含量并使其S e r - 7 8 0 磷酸化， 引起一系列级联 反应诱导其他周期蛋白( 如c y c l i n E及c y c l i n A , ) 及 R b 蛋白的磷酸化， 从而导致细胞周期 G , / S 转变。 有资料表明， c - k i t 的表达受骨形成蛋白( b o n e m o r - p h o g e n e t i c p r o t e i n 4 , B M P , ) / I A型 B M P受体( t h e t y p e I A B M P r e c e p t o r ) / A l k , / S m a d ， 通路形成的 S m a d s / S m a d , / D N A 复 合 物 的 调 控 。 以 上 实 验 结 果 证实了原癌基因。 - k i t 的正常表达是未分化型精原 细胞向分化型精原细胞转变的关键。 1 . 2 c 一 基因 与。 一n 基因 T s u r u t a 等 6 提 取8 日 龄小鼠翠丸的精原细胞， 研究胰岛素样生长因子- II / 6 磷酸甘露糖受体( in s u l i n - l i k e g r o w t h f a c to r - i f / m a n n a s e 6 - p h o s p h a t e r e c e p t o r , I G F - 11 / M 6 P R ) 在精原 细胞增殖中的作用， 结果发现， 精原细胞表面I G F - II / M 6 P R与支持细胞分泌的配体 I G F - II / M 6 P结合 可诱导精原细胞中c 扣、 m R N A的增加， 提示在精原 细胞增殖过程中c 一、 可能起调控作用。进一步的 研 究也证实了 这一假设。 C o b e l l i ， 等 采用免疫沉 淀及W e s t e rn印迹分析青蛙( R a n a e s c u l e n t a ) 的生精 周期中F o s 蛋白 及增殖细胞核抗原( p r o l i f e r a t i n g c e l l n u c l e a r a n t i g e n , P C N A ) 的 水平。 结果表明: 在精 原细 胞增殖活跃期( 1 - 7月份或2 4 0 C ) ， 细胞质中相对 分子质量( M , ) 为5 2 0 0 0 的F o 。 蛋白 减少， 细胞核中 M , 为6 8 0 0 0 的F o s 蛋白增加， P C N A含量增加， 而当 精原细胞处于滞留期( 9 一 1 2 月份或4 c C ) 时， 则发 现A型精原细胞胞质中M , 为5 2 0 0 0 的F o s 蛋白增 加， 胞核中M , 为6 8 0 0 0 的F o s 蛋白及P C N A减少。 而M , 为6 8 0 0 0 的F o s 蛋白 是M , 为5 2 0 0 0 的F o s 蛋白 的 磷酸化 形式。由 此可以 得出题) M ' 为6 8 0 0 0 的F o s 蛋白与细胞增殖指标P C N A呈同向变化， 而与M , 为 5 2 0 0 0 的F o s 蛋白 呈反向变化; 在精原细胞增殖过 程中F o s 蛋白发生了核转移。 c 和n 为孙 n 基因家族成员之一， 实验发现精原 细胞表达c - J u n 。通过观察非哺乳动物晰蝎( P o d a r - c i s S . S i c u l a ) 的缓慢生精过程表明: 在冬季生精滞留 期c - J u n 蛋白位于精原细胞的胞质中， 而在4 , 5 月份 生精活跃期该蛋白却位于胞核内。文献显示， c - J u n 蛋白 之间 或与同 期核内 增高的M , 为 6 8 0 0 0 的F o s 蛋 白 分别形成同源或异源二聚体， 即c - J u n / c - J u n 或c - J u n / F o s , c - J u n 蛋白 在M A P K , J u n 激酶作用下其S e r - 6 3 发生磷酸化并与相应的 D N A结合， 调节转录活 性， 从而影响 精原细胞的分裂 8 1 。 1 . 3 c - m o 、 基因与c - s is 基因 F e r r a r a 等 9 研究青 蛙生精细胞中c - r n 0 : 基因的表达， 其表达产物存在 于精原细胞和精母细胞的胞质中， 在精原细胞分化 为精母细胞的过程中， 胞质中的c - m o s m R N A及M o s 蛋白水平下降。当生精活跃时， 精原细胞中c - M o s 表达减少; 生精停滞时， c - M o s 表达增加。这一结果 表明了。 - m o : 表达产物与精原细胞的增殖有关。至 于其作用机制有待进一步的研究。 此外， 原癌基因c - s is 杂交信号主要出现在成年 果丸的精原细胞和初级精母细胞层， 推测。 - s is 的表 达产物可能以一种自 分泌或旁分泌性生长因子的形 式， 促进精原细胞生长与进一步的发育分化为精母 细胞 。 。 提 示原癌基因的正常表达参与调控精原 细胞的增殖与分化。 以上资料表明， 在精原细胞有丝分裂过程中， 原 癌基因通过其正常表达， 参与了调控。进一步研究 其作用机制， 有利于阐明精原细胞发生及发展过程。 2 原癌基因与精母细胞 精母细胞分为初级精母细胞和次级精母细胞。 初级精母细胞由B型精原细胞不分裂而直接分化而 来。此后精母细胞进行减数分裂继续分化为精子细 胞。在精母细胞减数分裂的过程中， 原癌基因的表 达产物也有调控作用。 2 . 1 c - m o : 基因M o s 蛋白不仅存在于精原细胞 ·5 3 4· 中华男科学杂志2 0 0 5 年7 月第1 1 卷 中， 也存在于精母细胞的胞质中 ， 提示原癌基因 c - m o s 可能 也 参与 精 母细胞的 减 数分裂。 N a g o o 1 1 1 对 大鼠生精细胞研究发现， M o s 蛋白可使一种M , 为 3 4 0 0 0 的蛋白 磷酸化， 而此蛋白 分子可能与精母细 胞的减数分裂有关， 尤其是在精母细胞周期中纺锤 体形成的检验点处起作用， 因这检验信号包含动粒 蛋白的磷酸化， 而此蛋白的磷酸化可延迟细胞周期 向后期转变。已知M o s 蛋白是一种M A P K K 。研究 发现， M A P K通路有助于维持小鼠精母细胞染色体 浓缩。因此得出这样一个假设: M o s 蛋白激活M A P - K K ， 通过M A P K K / M A P K / E R K / P 9 0 R s K 2 激活N e k 2 ， N e k 2 可诱导染色质的浓缩和中心粒的复制， 从而避 免2 次减数分裂间D N A不正确的复制， 允许2 次没 有正常细胞周期间期的减数分裂中 期的进展 “ 。 至于在精母细胞减数分裂中 M o s 蛋白是否通过 M A P K K / M A P K级联反应发挥作用， 有待研究证实。 2 . 2 A - m y b 基因 M y b 基因家族属核蛋白 类， 包括 3 个成员: A - m y b , B - m y b , C - m y b ， 其表达具有细胞特 异性。其中A - m y b 的表达产物存在于聚丸及外周血 白 细 胞中。 研究表明， A - m y b -' 一 雄性小鼠 成年后表现 为不育。 形态学检查显示: A - m y b -/ 一 小鼠精原细胞、 细线前期的精母细胞正常， 大部分粗线期的精母细 胞降解， 精子细胞及精子完全缺失。而A - m y b ' / 一 小 鼠 平均每个翠丸精子数为( 2 3 . 6 6 士 1 . 1 ) x 1 0 “ 个。 因为不同的生精细胞表达产物不同， 如热休克蛋白 ( h e a t s h o c k p r o t e i n 7 0 - 2 , H s p 7 0 - 2 ) 表达始于精母细 胞细线期， 粗线期达高峰， 环磷酸腺昔反应元件调节 器( c A M P r e s p o n s i v e e l e m e n t m o d u l a t o r , C R E M ) 在减 数分裂后期表达， 故可采用分析它们的表达产物来 确定生精细胞正常与否。 H s p 7 0 - 2 -' 一 小鼠 聚丸中 缺乏 减数分裂后期的精子细胞， C R E M “' 一 生精过程滞留于 减数分裂后期， 肇丸中缺乏精子细胞。上述结果表 明A - m y b -/ 一 小鼠 生精受阻于精母细胞减数分裂的细 线 期 ” 。 因 此可以 得出A - m y b 在精 母细 胞减数分 裂过程中起重要作用。A - M y b蛋白分3个区域: D N A结合区、 反式活化区及调控区， 通过与D N A特 异位点结合来调节其转录， 影响细胞的发育。 2 . 3 r a 、 基因 研究显示， K i - r a s 主要为粗线期精母 细胞表达， H a - r a s 为粗线期的精母细胞和减数分裂 后期的细胞表达“ 0 3 0 R a s 蛋白 属胞质信息传递蛋 白， 与G 蛋白功能相似， 可以与G T P 结合， 参与细胞 内信息传递过程。 由此可见， 在精母细胞减数分裂过程中， 上述原 癌基因各自 起不同的作用， 保证生精的正常进行。 3 原癌基因与精子细胞及精子 精子细胞是由精母细胞经过减数分裂而生成的 单倍体细胞， 精子细胞经过变形运动形成精子。在此 过程中 相关的原癌基因 有J u n - D , N - r a s , F a s 及T r - k i t , 为了研究原癌基因J u n - D对精子的影响， T h e p o t 等 “ 对1 3 例J u n - D 一 突变的 雄性小鼠 攀丸进 行了 研究。组织学检测显示: 有5 例翠丸明显异常， 电镜 下精子细胞密集的头部表现为锤头样改变， 当圆形 精子细胞开始伸长时， 鞭毛及其内微管结构异常改 变， 生精后期鞭毛数量明显减少甚至缺失。其他8 例虽然组织形态正常， 但是精子的几个参数异常， 野 生型J u n - D ' ' + 小鼠 平均总精子数为5 . 1 5 x 1 0 6 个， 头 部 异 常 精 子 数占 总 精子 数( 5 . 5 士 1 . 5 ) %， 而J u n - D -/'- 小鼠 平均精子细胞数为 0 . 5 4 x 1 0 “ 个， 头部异常精子 数占 总精子数( 9 6 . 0 士 5 . 7 ) %。通过S o u t h e rn印迹 分析生精细胞标记物的相关基因显示， 标志生精后 期细胞的基因C a l sp e r m i n , R T , 和维持成年生精的 B M P S 的m R N A 水平下降。 因 此可以 得出， J u n - D -“ - 突变的雄性小鼠不育表型与相关基因的亚单位表达 减少有关。此外， J u n - D 一 小鼠血中F S H水平降低， 表明了激素失衡为其不育的又一因素。 已有研究表明， 早期精子细胞中存在大量的N - r a : 转录 产 物 “ 。 R a ， 属小G 蛋白 家 族成员， 在 体细 胞 多 种 信 号 转 导 过 程中 起调 节 作 用。 N a g D a ， 等 15 采用P a n - R a s 多克隆抗体进行免疫印迹分析， R a s 以 可溶性形式存在于精母细胞及圆形精子细胞的胞质 中， 以及精子的头部和尾部的细胞膜， 说明生精结束 时， R a s 蛋白发生了膜募集。精子膜匀浆免疫沉淀 及免疫共沉淀显示， P 1 3 - K和蛋白激酶C ( j# o t e i n k i - n a s e C , P K C ) 与其共存在， 且 R a s 与其靶分子 P K C 相互作用并使其磷酸化， 而P K C 激酶或磷酸化鞭毛 蛋白的苏/ 丝氨酸残基， 或活化另一些信号转导因 子， 调节精子的运动。 c - k i t 有 两 种表达产物， 即c - K i t 和t r - K i t 16 o t r - K i t 在生精细胞减数分裂后期表达， 并且积聚在成熟 精 子的 中 段和 顶 体 后区 。 S e tt 。 等 17 将tr - K it 注 人 减 数分裂II 期中 期的卵母细胞发现， t r - K i t 活化卵母细 胞胞质的不同酪氨酸激酶， 导致磷脂酶C同源物y 1 ( y l i s o f o r m o f p h o s p h o l i p a s e C , P L C y l ) 的磷酸化。 而P L C y l 的S r c 同源区( S r c - h o m o l o g y , S H 3 ) 与富含 脯氨酸序列相互作用， 诱导卵母细胞的活化。故精 子中t r - K i t 在合子中 发挥其最后的作用。 F r a n c a v ill 。 等 18 研究表明， 成熟精子中表达 F a s ， 通过与支持细胞表达的F a s 配体( F a s l i g a n d , 第7 期杨俊玲 等原癌基因在生精细胞中的表达及其作用 ·5 3 5· F a s L ) 相互作用调节精子的凋亡。与此相反， 另一实 验显示， F a s L 存在于精子细胞的表面， 当精子通过 雌性生殖道时其表面的F a s L与雌性体内淋巴细胞 表面的F a s 形成F a s UF a s 复合物， 诱导淋巴细胞的 凋亡， 使精子免遭雌性体内同种异体免疫反应， 因而 有利于受精 19 。故F a s / F a s L 在精子细胞中的作用 尚有争议。 综上所述， 原癌基因在生精细胞中的表达呈时 间和空间特异性， 通过其表达产物调控生精细胞的 增殖、 分化及分裂。目 前人们正利用分子生物学技 术、 放免等先进手段识别和筛选原癌基因， 试图从分 子水平阐明其作用机制， 并已取得了突破性的进展。 然而， 原癌基因在生精细胞中的研究刚刚起步， 目 前 只对少数原癌基因进行了研究， 哪些原癌基因参与 生精细胞的生长?其作用机制如何?原癌基因在生 精细胞中表达的调控机制如何?这些问题的解决有 助于从基因水平研究精子的发生， 也为因生精细胞 发育异常而致的男性不育提供临床诊断依据。 参考文献 1 S c h r a n s - S t a s s e n B H , v a n d e K a n t H J , d e R o o ij D G , e t a l . D i f - f e r e n t i a l e x p r e s s i o n o f c - k i t i n m o u s e u n d i f f e r e n t i a t e d a n d d i f f e r e n - t i a t i n g ty p e A s p e r m a t o g o n i a J .E n d o c r i n o l o g y , 1 9 9 9 ，1 4 0 ( 1 2 ) : 5 8 9 4 - 5 9 0 0 . 2 K i s s e l H , T i m o k h i n a 1 , H a r d y M P , e t a l . P o i n t m u t a t i o n i n k i t r e c e p t o r t y r o s i n e k in a s e r e v e a l s e s s e n t i a l r o l e s f o r k i t s i g n a l i n g i n s p e r m a t o g e n e s i s a n d o o g e n e s i s w i t h o u t a f f e c t i n g o t h e r k i t r e s p o n s e s J . E M B O J , 2 0 0 0 , 1 9 ( 6 ) : 1 3 1 2 - 1 3 2 6 . 3 F e n g L X , R a v in d r a n a t h N , D y m M . S te m c e l l f a c t o r / c - k i t u p - r e g u - l a t e s c y c l i n D 3 a n d p r o m o t e s c e ll c y c l e p r o g r e s s i o n v i a t h e p h o s - p h o in o s i t i d e 3 - k i n a s e / p 7 0 S 6 k i n a s e p a t h w a y i n s p e r m a t o g o n i a J 习 . J B i o l C h e m , 2 0 0 0 , 2 7 5 ( 3 3 ) : 2 5 5 7 2 - 2 5 5 7 6 . 4 D o l c i S , P e l l e g r i n i M , A g o s t i n o S , e t a l . S i g n a l i n g t h r o u g h e x t r a - c e l l u l a r s i g n a l - r e g u l a t e d k i n a s e i s r e q u ir e d f o r s p e r m a t o g o n i a l p r o - l i f e r a t i v e r e s p o n s e t o s t e m c e l l f a c t o r J . J B i o l C h e m , 2 0 0 1 ， 2 7 6 ( 4 3 ) : 4 0 2 2 5 1 1 0 2 3 3 . 厂 5 P e l l e g r i n i M , G r i m a l d i P , R o s s i P , e t a l . D e v e l o p m e n t a l e x p r e s - s i o n o f B M P 4 / A L K 3 / S M A D 5 s i g n a l i n g p a t h w a y i n t h e m o u s e t e s - t i s : a p o t e n t i a l r o l e o f B M P 4 i n s p e r m a t o g o n i a d i f f e r e n t i a ti o n 仁 J . J C e l l S c i , 2 0 0 3 ， 1 1 6( P t 1 6 ) : 3 3 6 3 - 3 3 7 2 . 6 T s u r u t a J K , E d d y E M, 0 B r i e n D A . I n s u l i n - l i k e g r o w t h f a c t o r - I I / c a t i o n - i n d e p e n d e n t m a n n o s e 6 - p h o s p h a t e r e c e p t o r m e d i a t e s p a r a c - r i n e i n t e r a c t i o n s d u r i n g s p e r m a t o g o n i a l d e v e l o p m e n t J . B i o l R e - p r o d , 2 0 0 0 , 6 3 ( 4 ) : 1 0 0 6 - 1 0 1 3 . 仁 7 C o b e l l i s G , M e c c a r i e l l o R , F i e n g a G , e t a l . C y t o p l a s m ic a n d n o - c l e a r F o s p r o t e i n f o r m s r e g u l a t e r e s u m p t i o n o f s p e r m a t o g e n e s i s i n t h e f r o g , R a n a e s c u l e n t a 仁 J . E n d o c r i n o l o g y , 2 0 0 2 ， 1 4 3( I ) : 1 6 3 - 1 7 0 8 C h i e f f i P , P i c a s c i a A , S t a n z i o n e R , e t a l . C - J u n p h o s p h o ry l a t i o n ( S e r - 6 3 ) i n t h e t e s t i s o f t h e l i z a r d , P o d a r c i s s . s i c u l a 仁 J . J E n - d o c r i n o l , 1 9 9 9 , 1 6 3 ( 2 ) : 3 3 7 - 3 4 4 . 石 9 F e r r a r a D , P a l m i e ro C , B r a n n o M , e t a l . T e s t i c u l a r a c t i v i t y o f M o s i n t h e f r o g , R a n a e s c u l e n t a : a n e w r o l e i n s p e r m a t o g o n i a l p r o - l i f e r a t i o n J . B i o l R e p r o d , 2 0 0 4 ， 7 0 ( 6 ) : 1 7 8 2 - 1 7 8 9 1 0 王晓 燕， 谭德勇， 周 翔， 等. 原 癌基因c - m y c , c - H - r a s , c - s is 在小 鼠 卵巢和肇丸中的 转录表达研究 J . 遗传， 1 9 9 8 ,2 0 ( 5 ) :2 -6 . 厂 川N a g a o Y . D e f i n i ti v e e x p r e s s i o n o f c - m o s i n l a t e m e io t i c p r o p h a s e l e a d s t o p h o s p h o ry l a t io n o f a 3 4 k d a p r o t e in i n c u l t u r e d r a t s p e r - m a t o c y t e s I J . C e l l B i o l I n t , 2 0 0 2 ， 2 6 ( 2 ) : 1 9 3 -2 0 1 . 仁 1 2 D i A g o s t i n o S , R o s s i P , G e r e m i a R , e t a l . T h e M A P K p a t h w a t r i g g e r s a c t i v a t i o n o f N e k 2 d u r i n g c h r o m o s o m e c o n d e n s a t io n i n m o u s e s p e r m a t o c y te s J . D e v e lo p m e n t , 2 0 0 2 , 1 2 9 ( 7 ) : 1 7 1 5 - 1 7 2 7 . 1 3 T o s c a n i A , M e t t u s R V , C o u p l a n d R , e t a l . A r r e s t o f s p e r m a t o - g e n e s i s a n d d e f e c t i v e b r e a s t d e v e l o p m e n t i n m i c e l a c k i n g A - m y b J . N a t u r e , 1 9 9 7 ， 3 8 6 ( 6 6 2 6 ) : 7 1 3 - 7 1 7 . 1 4 T h e p o t D , W e i t z m a n J B , B a r r a J , e t a l . T a r g e t e d d i s r u p t i o n o f t h e m u r i n e j u n D g e n e r e s u l t s i n m u l t i p l e d e f e c t s i n m a l e r e p r o d u c - t i v e f u n c t i o n J . D e v e l o p m e n t , 2 0 0 0 , 1 2 7( 1 ) : 1 4 3 - 1 5 3 . 1 5 N a g D a s S K , W i n f r e y V P , O l s o n G E . I d e n t i fi c a t i o n o f r a s a n d i t s d o w n s t r e a m s i g n a l in g e l e m e n t s a n d t h e i r p o t e n t i a l r o l e i n h a m s t e r s p e r m m o t i l i t y J . B i o l R e p r o d , 2 0 0 2 ， 6 7 ( 4 ) : 1 0 5 8 - 1 0 6 6 . 1 6 R o s s i P , D o l c i S , S e t t e C , e t a l . M o l e c u l a r m e c h a n i s m s u t i l i z e d b y a l t e rn a t i v e c - k it g e n e p r o d u c t s i n t h e c o n t r o l o f s p e r m a t o g o n i a l p r o l i f e r a t i o n a n d s p e r m - m e d i a t e d e g g a c