大鼠脑出血后神经细胞凋亡和蛋白激酶B表达及β七叶皂甙钠的干预作用.pdf

·论著· 大鼠脑出血后神经细胞凋亡和蛋白激酶 B 表达 及 -七叶皂甙钠的干预作用 张勇，丁新生，高飞，顾萍，张化彪 ，宋春杰 ，邓晓宣，姚娟，朱国庆 【摘要】 目的 观察大鼠脑出血后神经细胞凋亡和蛋白激酶 B （AKt） 的表达， 探讨 -七叶皂甙钠的干预 作用及机制。方法 将雄性 SD 大鼠随机分为正常组、 假手术组、 脑出血组和 -七叶皂甙钠治疗组。后 3 组 又各分为 6 h、 12 h、 1 d、 3 d、 7 d 组； 用型胶原酶注入到大鼠右侧苍白球诱导脑出血模型， 采用原位末端标记 技术 （TUNEL） 和免疫组化方法检测损伤侧皮质区细胞凋亡及 AKt 表达的动态变化以及 -七叶皂甙钠对此的 影响。结果 脑出血组 TUNEL 阳性细胞于脑出血后 6 h 出现，AKt 于脑出血后 12 h 表达增多， 二者均在第 3 d 达到高峰， 1 周仍有表达。治疗组 1 d、 3 d、 7 d 时间点 TUNEL 阳性细胞较脑出血组明显减少 （P 0. 05） ，术后 12 h 7 d 血肿周围 表 1 治疗组、 ICH 组及假手术组大鼠 TUNEL 阳性细胞数的比较 （-x ±s， 个/ 视野， n =5） 组别 6 h12 h1 d3 d7 d 假手术组1.26 ±0.371.55 ±0.611. 97 ±0. 581. 73 ±0. 741. 68 ±0. 64 ICH 组 7.37 ±2.6615.57 ±3.9830. 84 ±5. 987. 30 ±10. 7923. 82 ±4. 70 治疗组 6.26 ±2.5112.46 ±3.1422. 62 ±3. 8=69. 33 ±7. 92=13. 73 ±3. 80 与假手术组比较 P 0. 05） ， 1 d 及以后才显著高于 ICH 组。其原因可能与 ICH 后氧自由基产生的时间 有关。浸润的中性粒细胞是 ICH 后氧自由基产生的 重要来源， 大量氧自由基可能主要在 ICH 24 h 后产 生 10， 本实验亦观察到 - 七叶皂甙钠治疗作用在 ICH 24 h 后， 并持续1 周， 这也为 - 七叶皂甙钠抗凋 亡的时间窗提供了参考。 参 考 文 献 1冯美江， 丁新生. AKT 与细胞生存 J . 国外医学. 分子生物学分 册， 2002， 24： 283. 2Rosenberg GA. Collagenase induced intracerebral hemorrhage in rats J . Stroke， 1990， 21： 801. 3Qureshi AI， Suri MF， Ostrow PT， et al. Apoptosis as a form of cell death in intracerebral hemorrhage J . Neurosurgery， 2003， 52： 1041. 4Subramanian RR， Masters SC， Zhang HY， et al. Functional conser- vation of 14-3-3 isoforms in inhibitingbad-induced apoptosis J . Exp Cell Res， 2001， 271： 142. 5李珺， 吴家幂， 储照虎， 等. 半胱氨酸蛋白酶抑制剂对大鼠脑出 血后神经元凋亡的影响 J . 临床神经病学杂志， 2004， 17： 111. 6吴碧华，胡长林，余震， 等. 大鼠脑出血后脑组织中胰岛素样生 长因子-1 蛋白和 mRNA 表达的研究 J . 中风与神经疾病杂志， 2004， 21： 118. 7揣兰香， 张微微， 戴卫平， 等. 血管内皮生长因子和第因子相 关抗原在脑出血大鼠脑内的表达 J . 中华老年心脑血管病杂 志， 2003， 5： 53. 8Saito A，Hayashi T，Okuno S，et al. Oxidative stress affects the in- tegrin-linked kinase signaling pathway after transient focal cerebral ischemia J . Stroke， 2004， 35： 2560. 9Foitzik T， Hotz HG. Eibl G， et al. Therapy for microcirculatory dis- orders in severe acute pancreatitis ：effectiveness of Platelet-activa- ting factor receptor blockade vs. endothelin receptor blockade J . J Gastrointest Surg， 1999， 3： 244. 10Wang J， Tsirka SE. Tuftsin fragment 1 - 3 is beneficial when deliv- ered after the induction of intracerebral hemorrhage J . Stroke， 2005， 36： 613. （收稿日期 2005-03-10 修回日期 2005-06-15） ·25· J Clin Neurol， February 2006， Vol. 19， No. 1