微波辐射快速制备电镜标本的实验研究.pdf

第 !“ 卷第 # 期 !$# 年 “ 月 大 连 医 科 大 学 学 报 !“#$%$.、8$.的酒精各 # 次，#$. 酒精 ! 次，每次酒精用量 “ ,0，微波 （#!(+超薄切片及染色：2*A 型超薄切片机切 片后，醋酸双氧铀和枸橼酸铅常规染色，干燥后电 镜观察。 对照组按常规标本制备方法进行，所用试剂与 微波辐射组相同。 !结果 经微波辐射制备的包埋块和常规方法制备的包 埋块，在超薄切片时切割性能相同，软硬度适宜， 无振颤，无空洞。电镜下观察，经微波辐射快速制 备的标本的超微结构与常规方法制备的标本的超微 结构无明显差异。肝细胞内线粒体、粗面内质网等 细胞器保存完好（图 !） ；肾小球滤过屏障三层结 构明确（图 “） ；心肌、骨骼肌纤维内肌丝呈规则 排列，明带、暗带、横小管、肌浆网等结构无人工 损伤（图 #） 。 图 ! 肝细胞核膜、线粒体、内质网 $ !%&&&图 “ 肾小球滤过屏障的三层结构 $ &&& 图 # 心肌纤维内肌丝、肌节、线粒体 $ “&&&& #讨论 微波是一种短波长高频电磁波。在微波能的辐 射下，各种极性分子如生物组织中的各种离子、蛋 白质侧链和水分子等极易受到非离子化放射的影 响，在微波场中呈高频震动。这种快速的分子运动 使整个组织和细胞均匀加热。微波辐射产生的热量 使蛋白质变性，加速了固定剂对组织的渗透，从而 实现了快速固定。另外微波发射高频能量，可能增 加了细胞膜的通透性，提高了极性分子对组织的穿 透力，使之达到快速脱水、渗透的目的 ! 。 我们经过对微波辐射的功率、辐射的时间、标 本在微波炉中的位置、组织的性能及组织块大小的 反复实验研究，发现所取标本的体积最佳约为 &(% )#；处理样品的液体量在 “ )* + # )*。微波炉中 烧杯内的水应每隔 !% ),- 更换一次；严格控制辐 射功率，以小功率辐射为主，采用低功率、间断辐 射的方式，在每步微波辐射之后，最好让样品在药 液中停留一段时间 “ 。保证药液渗入样品并与组织 充分结合，这样既减少了微波对样品的损伤，又保 存了组织超微结构完好性。 在微波辐射制备电镜标本的实验研究过程中， 我们发现聚合步骤不能在微波炉内进行。其原因是 ./0-!“ 包埋液为脂溶性，需在干燥环境中才能硬 化，微波炉内不能放平衡温度的水杯，致使加热温 度不稳定，制成的包埋块内有许多空洞，细胞结构 破坏。为此我们对以前文献报告的方法进行了改 进，将聚合改在 !&& 1温箱中进行，聚合 ! 2。这 样制出的包埋块，切割性能好，无气泡，且图象清 晰，组织结构保存良好，时间上与微波辐射聚合接 近。 常规电镜标本制备约需 3 4，用微波辐射制备 电镜标本从固定到完成聚合只需 3 2，大大缩短了 制样时间，并能良好地保持组织细胞超微结构，得 到清晰的图象。实验结果表明，微波技术应用于电 镜标本快速制备切实可行。这一技术的开展，将有 益于电镜诊断有效地应用于临床。 参考文献： ! 梁莹， 李卫东， 莫肖敏 ( 微波技术在快速电镜标本制备中的应用 5 6广西医科大学学报， !777， !8 （#） ： #7&#7!6 “ 李成 ( 临床电镜快速检测病毒技术 5 6 中国医科大学学报， !77%， “3 （增刊） ： !7“&6 # 颜永碧， 谢志芳， 陆月良 ( 微波技术在超微结构病理诊断标本制 备中的应用 5 6第二军医大学学报， “&&&， “! （8） %76 3 张守臣， 王光耀 ( 微波制样方法在电镜临床活检中的应用 5 6哈 尔滨医科大学学报， “&&&， #3 （“） ： !6 （收稿日期：“&&& 9 !“ 9 “&修回日期：“&&& 9 !“ 9 “） 38大 连 医 科 大 学 学 报第 “# 卷