川芎嗪对溶血磷脂酸诱导的心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.pdf
·3 1· 第2 1 卷第1 期 2 0 0 8年 1 月 医 学 研 究 生 学 报 V o l . 2 1 N o . l J o u rna l o f M e d i c a l P o s t g r a d u a t e s J a n . 2 0 0 8 ·论著·著 川芍嗓对溶血磷脂酸诱导的 心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响 蔡辉， 修春英， 郭郡浩， 沈思枉， 赵智明 ( 南京军区南京总医院中西医结合科， 江苏南京 2 1 0 0 0 2 ) 摘要: 目 的: 观察溶血磷脂酸( L P A ) 对体外培养的心脏成纤维细胞( C F ) 增殖的影响， 进一步研究中药川芍嗓单体 对其的干预作用。 方法: 用消化法培养新生S D大鼠心脏成纤维细胞， 用单四哇( M TT) 比色法测定细胞增殖， 经 脯氨酸碱水解法测定胶原合成， 分别观察不同浓度L P A对C F 增殖和胶原合成的影响及川芍嗓的干预作用。 结 果: 随着L P A 浓度的升高， M TT 比 色法A .值呈上升趋势。 C F 分泌的胶原随着L P A浓度和作用时间的 增加呈递增 趋 势。 2 0 p g / m l 的 川 芍嗓 作用4 8 h 即 能明 显抑制L P A ( 1 0 - 6 p m o V L ) 诱导的细胞增殖作用( P 0 . 0 5 ) ， 仅2 0 p g / m l 浓度 组产生明显抑制增殖作用( P 0 . 0 5 ) , 1 0 和2 0 w 酬m l 组抑制 作用明显( P 9 0 % ) o C F 具有增殖能力， 构成心肌间质网络的基 本结构蛋白的 I , D I 型胶原主要是由间质细胞分泌 的。在心室肥厚的过程中， 心肌细胞肥大的同时， 伴 有C F的增殖及其合成分泌胶原增多， 即心肌间质 构型重建， 这些变化将导致心肌代谢及功能异常， 使 其僵硬度增高、 舒缩功能障碍， 最终引发心力衰竭。 因此， C F 在心室肥厚发病过程中起重要作用。 L P A是一种结构简单的脂质信号分子， 存在于 正常血浆中， 主要由激活的血小板产生 3 1 o L P A受 体广泛分布于心血管组织， 其受体通过祸联多种G 蛋白， 激活多种信号转导途径， 从而发挥了不同的生 物学效应4 1 。 研究发现， 在一定的条件下， L P A会 促进动脉粥样硬化和血栓形成而可能加重心血管疾 病特别是缺血性心脏病的发展。在冠状动脉粥样硬 化早期， L P A增加血管内膜的通透性， 使内膜的屏障 功能异常， 并在发病的后期加重血小板在内膜的聚 集及赫附， 于是形成动脉血栓， 甚至引发粥样斑块破 裂， 冠状动脉闭塞， 以致发生心肌缺血或心肌梗死。 L P A还具有促进心肌细胞肥大和成纤维细胞增殖等 作用 5 ,6 1 ， 加重了心肌梗死后的心室肥厚， 因此， 可 以认为L P A是引起心室肥厚乃至纤维化的一种新 的生物活性物质。 川芍嗓是传统的活血化疲药， 现已证实其具有 扩张冠状动脉、 增加冠状动脉血流量和扩张血管、 降 低血压， 改善微循环， 抑制血小板聚集、 抗血栓形成 等作用。故临床上已广泛用于治疗高血压、 冠心病、 充血性心力衰竭等疾病。以往有研究报道， 川芍嗦 能抑制C F的D N A合成、 复制及有丝分裂， 从而抑 制其增殖及胶原合成 7 ,8 1 。 本研究发现川芍嗓2 0 ji g / m l 组在药物作用4 8 h 和5 W mI组作用7 2 h 后， 可明显抑制 C F 增殖作 用， 表明川芍嗓具有抑制 L P A诱导的C F 增殖的作 用， 并呈现时间和浓度依赖性。 本研究还表明， 川芍嚓可明显抑制 L P A诱导的 C F 胶原合成作用。心脏内胶原的组成和含量与心 肌的收缩和舒张功能密切相关， 川芍嗦抑制 C F的 胶原合成， 可减少心脏间质的胶原生成， 这对减轻心 脏僵硬度， 改善心脏顺应性和心脏收缩和舒张功能 有重要影响。 总之， 本研究以细胞增殖及胶原合成为指标， 观 察到川芍嗓呈浓度依赖性地抑制 L P A诱导的C F 增 殖， 并抑制胶原合成， 表明川芍嗦可以通过调节 C F 的生长而抑制心室肥厚的形成和发展， 因此， 进一步 研究川芍嚷对C F 的调节作用及其机制可能对防治 心室肥厚有重要意义。 参考文献: L ij n e n P J , P e t ro v V V , F a g a r d R H . A n g i o t e n s i n 1 1 - i n d u c e d s t i m u l a - t i o n o f c o ll a g e n s e c re t i o n a n d p r o d u c t i o n i n c a r d i a c f i b ro b l a s t s i s m e d i a t e d v i a a n g i o t e n s i n II s u b t y p e 1 r e c e p t o r s J . J R e n i n A n g A L D S y s t , 2 0 0 1 , 2 ( 2 ) : 1 1 7 - 1 2 2 . 坷n e n P , P e t r o v V , F a g a r d R . T r a n s f o r m i n g g ro w t h f a c t o r - b e t a 1 - m e d i a t e d c o l l a g e n g e l c o n t r a c t i o n 奸c a r d i a c f i b ro b l a s t s J . 1 R e - n i n A n g A L D S y s t , 2 0 0 3 , 4 ( 2 ) : 1 1 3 - 1 1 8 . A o k i J , T a i m A , T a k a n e z a w a Y . a l . S e r u m l y s o p h o s p h a t id i c a c i d i s p r o d u c e d t h r o u g h d i v e rs e p h o s p h o l i p a s e p a t h w a y s J . J B i o l C h e m , 2 0 0 2 , 2 7 7 ( 5 0 ) : 4 8 7 3 7 4 8 7 4 4 . 1 r a n e n b u r g 0 , M o o l e n a a r W H . R a o - M A P k i n a s e s i g n a li n g 师l y s o - p h o s p h a t i d i c a c i d a n d o t h e r G p ro t e i n - c o u p l e d r e c e p t o r a g o n i s t s J 7 . O n c o g e n e , 2 0 0 1 , 2 0 ( 1 3 ) : 1 5 4 0 - 1 5 4 6 . 修春英， 蔡辉， 赵智明， 等. 溶血磷脂酸对心脏成纤维细胞增 殖和胶原合成的影响 7 J . 医学研究生学报， 2 0 0 6 , 1 9 ( 7 ) : 5 8 9 - 5 9 1 , 5 9 5 . 修春英， 蔡 辉. 溶血磷脂酸与缺血性心脏病【 J 7 . 医学研究生 学报， 2 0 0 6 , 1 9 ( 2 ) : 1 7 2 - 1 7 4 , 1 7 8 . 郭自 强， 牛福玲， 朱陵群， 等. 川芍嗓对血管紧张素II 致心肌肥 大的影响 J J . 北京中医药大学学报， 2 0 0 1 , 2 4 ( 3 ) : 3 2 - 3 4 . 屈越林， 方 勤， 陈高翔. 汉防己甲素、 川芍嗓和苦杏仁贰对人 肾成纤维细胞的影响 7 J . 中华肾脏病杂志， 2 0 0 0 , 1 6 ( 3 ) : 1 8 6 - 1 8 9 . JlweJ工J 6700 r.Lr二Lr胜L ( 贵任编辑: 蔡明红; 英文编辑: 李晓军) 万方数据
