幽门螺杆菌感染诱导胃黏膜上皮细胞凋亡及端粒酶逆转录酶表达.pdf

一 6 7 2一中华消化杂志2 0 0 5年I I 月第2 5卷第I I 期C h i . I D ig , N -, 2 0 0 5 , V . I . 2 5 , N o . I 1 · 论 著 · 幽门螺杆菌感染诱导 胃戮膜上皮细胞凋亡 及端粒酶逆转录酶表达 祝荫吕农华陈江谢勇徐萍黄德强 摘要】 目的 研究幽门 螺杆菌( H p ) 根除前后胃戮膜上皮细胞凋亡和端粒酶逆转录TN( h T E R T ) 表达及其与b c l - 2 , c - m y c 蛋白 表达的 关系。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记 ( T U N E L 技 术 及 免 疫组 化 染 色 方 法 检 测3 9 例你阳 性 患 者根 除 治 疗 及2 1 例枷阴 性 患 者 对 症 治 疗 前 后 胃 猫 膜上 皮 细 胞 凋 亡, h l 'E R T , b c l - 2 , c - m y 。 蛋自 表 达 的 变 化。 结 果 治 疗 前孙阳 性 者胃 翁 膜上 皮 细 胞 凋 T - 指数 为1 6 . 2 %， 显 著 高 于H p 阴 性 者( P 0 . 0 5 ) . T h e re w e r e s i g n if i c a n t c o r re l a ti o n s b e t w e e n h T E R T a n d b c l - 2 ( r 。 二 0 . 2 6 9 , P 5 0 %。 5 统计学处理: 等级资料采用W i l c o x o n 秩和 检验， 两样品均数比较采用t 检验; 治疗前后的 配对 资料采用符号秩和检验和配对 t 检验; 两指标相关 一 6 7 4一中华消化杂志2 0 0 5 年1 1 月第2 5 卷第1 1 期 C h i n J D ig . N o r , 2 0 0 5 , V o l . 2 5 , N o . 1 1 性用S p e a r m a n 秩相关分析。P 0 . 0 5 ) ， 见表l o 表1 H p 感染与细胞凋亡, h T E R T 及 癌基因表达的关系( %) 组别例数凋亡指数h T E R T o - . y , 蛋白h o l -2 饰阳性3 9 1 6 . 2 士 6 . 0 5 3 . 8 “ 5 3 . 8 “ 6 1 . 5 对 照组2 1 8 . 9 士 4 . 5 2 3 . 8 2 8 . 6 4 2 . 9 注 与对照组比较， ' P 0 . 0 5 ) ; 而枷 未根除者及你 阴性对照组治疗 后上述指标均无显著变化( P 0 . 0 5 ) ， 见表2 , 三、 h T E R T与6 c 1 - 2 , c - m y c 蛋白的相关性 经等级相关分析表明， b c l - 2 , c - m y c蛋白与 h T E R T 呈显著正相关， 秩相关系数r 分别为0 . 2 6 9 , 0 . 4 7 4 ( P 0 . 0 5 ) ， 而。 - m y 。 蛋白表达阳性与阴 性者间凋亡指数 也差异无统计学意义( P 0 . 0 5 ) 。 讨论 、 饰 感染与胃 茹膜上皮细胞凋亡及h T E R T 表达的关系 端粒酶激活与细胞增殖、 永生化和癌变密切相 关， 不仅在胃 癌中 表达异常， 而 且在胃勃膜癌前病变 中 亦有不同程度的表达。h T E R T为端粒酶催化亚 单位， 对细胞系的 研究显示h T E R T 表达是端粒酶激 活 的 主 要 途径 1 3 .4 , 。 近 年 研究 显 示， H p 感染可 能 是 胃乳膜上皮细 胞端粒酶激 活的一个启动 因子。 K a m e s h i m a 等 5 1 的 动 物 实验 表 明， 枷慢 性 感染 诱导 胃 a膜组织端粒酶活化， 并导致肠上皮化生。本研 究结果显示， H p阳性者胃豁膜上皮细胞凋亡及 h T E R T 表达显著高于H p 阴性者， 表明H p 感染可诱 导胃 勃膜上皮细胞凋亡及h T E R T 异常表达。 枷 感 染后胃 豁膜上皮细胞凋亡及 】 T E R T表达均明显增 加， 导致细胞凋亡及增殖过度， 增加了D N A复制错 误的产生和基因突变的可能性， 增加了患胃 癌的危 险性。 二、 场 根除前后细胞凋亡、 h T E R T 及癌基因 表 达的变化 本研究对H p 感染的慢性vu炎患者进行H p根 除治疗和动态随访( 平均随访时间为2年) ， 并观察 H p 根除前后细胞凋亡、 h T E R T及癌基因表达的变 化。研究显示: H p阳性患者经根除治疗后 枷 转阴 者细胞凋亡指数、 h T E R T 及b c l - 2 , c - m y c 蛋白表达显 著下降， 与治疗前相比 差异有统计学意义， 且与H p 阴性对照组相比差异无统计学意义。而H p 未根除 者及H p 持续阴性者凋亡指数、 h T E R T z b c l - 2 及 c - m y c 蛋白 表达均无显著变化。表明H p 感染是引起 细胞凋亡失控、h T E R T及癌基 因过度表达的重要 机制之一。根除你 既可使h T E R T 表达下降或消 失， 从而减少细胞增殖， 又可纠正细胞凋亡与失控， 恢复其正常细胞动力学状态， 还能促使癌基因逆转， 从而降低胃 癌发生的可能性。 三、 细胞凋亡、 h T E R T 与b , ,1 - 2 , c - m y c 蛋白 表达 的关系 端粒酶激活确切机制目前尚不清楚。近年研究 表明c - m y c 蛋白对h T E R T 表达 起重要调控作用。 裘2 如 根除前后细胞凋亡、 h T E R T及癌基因表达的变化( %) 凋亡指 数 】 E R 1 c - m y c 蛋白 组别例数 治疗 前治疗 后治 疗前治疗后 治疗 前 治疗 后治 疗前治疗后 27U21 H p根除组 H p未根除组 对照组 1 6 . 9 .6 - 0 1 4 . 7 士 5 . 8 8 . 9 士 4 . 5 9 . 0t 5 . 1 * 1 8 . 0 士 7. 5 7 . 8 士 3. 4 5 9 . 3 41 . 7 2 3 8 2 2 . 2甲 5 0 . 0 2 8 . 62 8 . 6 l 4. 8 5 0. 0 2 8. 64 2. 9 2 5 . 9 6 6 . 7 4 7 . 6 注: 与治疗前比较, ' P 0 . 0 1 中华消化杂志2 0 0 5 年1月第2 5 卷第I t 期C h i n 1 D ig , N o v , 2 0 0 5 , V.1.25, N u . I I 一 6 7 5一 有学 者克隆并分析了h T E R T基因启动子特性， 发现 c - m y c 蛋白 可特异 结合于多种细胞h T E R T 基因的核 心启动子5 ' 端的E盒上， 显著增强 h T E R T基因启动 子转录活性。认为 c - m y c 蛋白在h T E R T基因表达 上调及端粒酶激活中起重要作用L 6 ,7 1 。 本研究结果 显示， 你 阳性组c - m y c 蛋白 表达率显著高于你 阴 性组， 表明枷 感染可诱导c - m y e 蛋白过度表达; 且 c - m y c 蛋白与h T E R T 表达呈显著正相关， 推测 H p 感染导致的 c - m y c 蛋白过度表达可能引起h T E R T 基因 表达上调及端粒酶激活， 从而促进细胞恶性转 化。 原癌 基 因6 c 1 - 2 是 凋亡 抑 制基 因。 M a n d a l 等 【 a 1 研究发现将b c l - 2 基因转染肿瘤细胞后， 转染细胞端 粒酶活性上调; 而当b c l - 2 表达减少时， 细胞端粒酶 活性亦下调， 而加人白 细胞介素 - 2 后， 表明6 c 1 - 2 基 因对端粒酶活性具有调控作用。 本研究发现b c l -2 与 h T E R T表达呈显著正相关 ， 提示 b c l 一对 h T E R T 表达可能有调节作用。细胞凋亡受多种基因 调控， 主要有b c l - 2 , b a x , p 5 3 , c - m y c , F a 。 等。本研究发现， 在饰 阳 性组中b c l - 2 及c - m y c 蛋白阳性者细胞凋亡 指数与阴 性者比较差异无统计学意义。表明H p 诱 导胃戮膜上皮细胞凋亡可能不依赖 b c l - 2 , c - m y c 途径。 ic s u b u n it h o m o lo p fro m f is s i o n y e a s t a n d h u m a n . S c ie n c e , 1 9 9 7 , 2 7 7 : 9 5 5 一 5 9 . 2 M e y -o n M, C o u n te r C M, E a to n E N , e t a l . h E S T 2 , t h e p u t a t iv e h u m a n t e l- c a t a ly ti c s u b u n it g e n e , is u p - re g u la t e d i n tu m o r c e l ls a n d d u ci n g im m o c u li - ti u n . C e ll , 1 9 9 7 , 9 0 ; 7 8 5 - 7 9 5 . 3 R a m a k ni s h m a n S , E p p e n b e r g e r U , M u e ll e r H , e t a l . E z p - i o n p m f d e o f th e p u ta t v e c a ta ly ti c s u b mit o f th e te lo m e ra s e g e n e . C a n c el R e s , 1 9 9 8 , 5 8 ; 6 2 2 -6 2 5 . 4 N a k a y - 1 , T a h a ra H, T a h a nt E , s t a l . Tel.- a e tc , it io n场 h T E R T in h u m a n n m m a t f ib r o b l s s ts a n d h e p a t o c e l lu 1a r n a r r io n m a s . N a t G e n e t , 1 9 9 8 , 1 8 :6 5 -6 8 . 5 K a m e s h im a H , Y a g ih a s h i A, Y a j i m a 1 , e t a l. H e b c o h a c ta r p y lo r i in fe c ti o n in d u ces t e l o m e e m e a m iv ity i n p r e m a l ig n a n t le s io n s . A m 1 G a s t m e n te ro l , 1 9 9 9 , 9 4 : 5 4 7 -5 4 8 6 T a k a k u m M, K y o S , K a n a y a T , e t a l . C lo n i n g o f h u m a n te l o m e m s c c a t a l 州c s u b u n i t ( h T E R T ) g e n e p ro m o t e r a n d in d e n t if ic a ti o n o f pro,- 即吐 c o r e p ro m o te r s e q u e n c e s e s se n t ia l f o r tr a n s c ri p tio n a l a c t iv a tio n in i m m o rt a l iz e d a n d c a n c e r c e ll s . C a n c er Re, 1 9 9 9 , 5 9 :5 5 1 - 5 5 7 . 7 K y o S , T a k a k u r a M, T a i r a T , e t a l. S p l c o o p e r a t e s w i th c -m y c to a c t iv a te t r a n s c r ip ti o n o f t h e h u m a n t c l o n rc r a s e r e v e rs e t ra n s c ri p te s e g e n e ( h T E R T ) . N u c le ic A c id s R e s , 2 0 0 0 ,2 8 :6 6 9 -6 7 7 . 8 Ma n d a l M, K u m a r R . B c l -2 m o d u la te s tc lu r n e r a s e a c ti v i ty . 1 B i u l C h e m , 1 9 9 7 ,2 7 2 : 1 4 1 8 3 - 1 4 1 8 7 ( 收稿口期二 2 0 0 4 - 0 7 - 1 4 ) 本文编辑: 陆伟) 参考文献 N a k a m u ra T M , M o r in G B , C h a p m a n K B , e t a t . T e lo m e m s e c a t s ly t · 病 例 报 告 · 自发性食管破裂一例 赵奎 患者男性， 4 6 岁， 恶心、 呕吐伴上腹部疼痛3 h 人院。3 h 前患者饮白酒 2 0 0 .1 后出现恶心、 呕心胃内容物、 上腹部及 胸骨下段后剧烈疼痛。体检: 急性痛苦痛苦面容 心肺正常， 腹平软， 中上腹压痛， 无反跳痛及肌紧张， 移动性浊音(一) 。 辅助检查 白 细胞1 . 4 5 x 1 0 / L 。心电图正常。胸片未见明 显异常。急诊胸部 C T提示: 纵隔大量气体征。转心胸外科 手术， 术中见肠肌平面上方食管左侧有一纵行全层裂口 长 约2 . 5e m， 可见胃液涌出， 给予手术修补、 胸腔闭式引流及抗 感染等治疗后患者痊愈出院 讨论食管破裂分为外伤性、 医源性和自发性。自发性 食管破裂是指完全正常的食管发生全层撕裂。此病较为少 见 ， 误诊率在7 4 % -8 5 %， 病死率在 2 5 % 一1 0 0 %。自发性 食管破裂常见的原因为呕吐 又以饮酒后多见。治疗的关键 是早期确诊， 及时行外科手术。现对诊治该病有以下几点体 会 重视患者的首发症状， 呕吐后出现上腹部及胸骨后剧 烈疼痛， 应警惕此病的可能; 及时行X线胸腹片、 心电图、 胸部C T检查， 必要时行食管碘油造影。 ( 收稿日期: 2 0 0 5 -06 - 2 1 ) ( 本文编辑: 杨学文) 作 者单位 :6 1 0 0 8 3 成都 ， 成 都军 区总 医院消 化内科