缝隙连接蛋白CX43的磷酸化对缝隙连接通讯的调控.pdf

C h i n e s e J o u r n a l o f C a r d i o v a s c u l a r Me d i c i n e , A p r i l 2 0 0 8 , V o l . 1 3 , N o . 2 缝隙连接蛋白C x 4 3的磷酸化对缝隙连接通讯的调控 王荣综述张存泰， 王琳审校 摘要墨 缝隙连接介导细胞间通讯. 磷酸化通过影响缝隙连接蛋白 生命周期中的各个过程而调节细胞间通讯， 这些 过程涉及到缝隙连接蛋白的转运、 组装/ 解离、 降解以及通道的门控等。 本文将探讨缝隙连接蛋白C x 4 3 的磷酸化 对缝隙连接通讯的调控， 继而讨论C x 4 3 蛋白的磷酸化特异性抗体， 有助于我们深人研究特定位点的磷酸化事件对 缝隙连接通道功能的影响。 关键词: 缝隙连接;连接蛋白4 3 ; 磷酸化 中图分类号:Q 2 6文献标识码:A文章编号:1 0 0 7 - 5 4 1 0 ( 2 0 0 8 ) 0 2 - 0 1 5 0 - 0 4 缝隙连接是沟通相邻细胞胞质的细胞间通道， 这些通道紧密聚集形成簇， 介导细胞间通讯。缝隙 连接是由缝隙连接蛋白( C o n n e x i n s , C x s ) 所构成。 在人类， C x s 家族包括大约 2 0 个成员， 心室肌中以 C x 4 3 为主。连接蛋白中大多数都属于磷蛋白， 它们 处于不同的磷酸化水平。磷酸化是蛋白转录后非常 普遍的一种修饰， 它是调控细胞信号转导的主要方 式， 通过蛋白激酶和蛋白磷酸化酶的相互作用， 控制 着许多细胞内过程。这些过程可能涉及到连接蛋白 生存周期中的各个环节， 如C x 转运、 组装、 解离、 降 解以及通道的门控等。本文首先讨论C x 4 3 在稳态 细胞中的生命周期， 然后探讨其磷酸化是如何调控 连接蛋白组装成缝隙连接， 以及各种激酶不同的磷 酸化位点， 最后讨论 C x 4 3 蛋白的磷酸化特异性抗 体， 这些正在研制的抗体有助于我们更深人地研究 特定位点的磷酸化事件对缝隙连接通道功能的影 响。 膜， 在那里由两个半通道对接组装成缝隙连接。已 有大量的研究显示， 半通道存在于缝隙连接周边的 非连接区胞膜上。这些半通道在调节细胞内C a t 十 、 A T P , N A D + 水平中起着重要的生物作用 4 . 5 。很 明显， 有功能的半通道必须被严密地管制， 因为在细 胞质和细胞外液间不受限制的沟通会导致细胞的死 亡。有丝分裂原激活的蛋白激酶( MA P K ) 和蛋白 激酶C ( P K C ) 都能够通过磷酸化反应保持半通道的 关闭 6 0 已发现在子宫肌层存在着缝隙连接组装和解离 的急性调节， 而缝隙连接对于分娩时子宫平滑肌的 电和机械活动的同步化是非常必要的。在分娩前和 分娩时可以马上检测到 C x 4 3的mR N A和蛋白水 平升高5 - 1 0 倍。C x 4 3 蛋白聚集在胞浆内直到分 娩， 然后快速地转运到细胞膜， 组合成缝隙连接， 分 娩后蛋白又快速地减少川。 2 C x 4 3 蛋白的磷酸化 1 稳态细胞中的 C x 4 3生命周期 实时细胞显像研究中清楚地显示缝隙连接是动 态的胞膜结构， 更新速度非常快。是否所有的C x s 均按照传统的合成途径， 如首先在内质网合成， 然后 通过高尔基体转运再转移到细胞膜上， 目前尚存在 争议。 但目 前所有的数据均显示C x 4 3 是按照该途 径合成 1 。 通过使用各种抑制剂的交联研究显示， C x 4 3 是在反面高尔基网聚合而成 2 ， 而其他研究显 示C x 2 6 / C x 3 2在内质网和高尔基体中间隔聚 合 3 。聚合而成的半通道或称连接子然后转运至胞 基金项目: 国家自 然科学基金资助项目( 编号: 3 0 3 7 0 5 7 3 ) 作者单位: 华中科技大学同济医学院附属同济医院， 武汉4 3 0 0 3 0 作者简介: 王荣( 1 9 7 9 - ) ， 女， 博士， 主要从事心脏电生理研究. 审 校 者: 张存泰， 男， 教授。 在细胞培养和组织研究中显示 C x 4 3 的半衰期 在1 - v 3 h ' 。这么快的 更新速度意味着有较高水平 的转录后调控。实际上， 在先前的一些研究中已发 现， 在稳态细胞的生命周期中C x 4 3发生着不同的 磷酸化 s . 1 0 1 。采用聚丙烯酞胺凝胶电泳分析 C x 4 3 发现， 有多个电泳条带亚型， 包括迁移速度较快的非 磷酸化的C x 4 3 亚型( P O 或者 N P ) 和至少两个迁移 较慢的磷酸化的C x 4 3 亚型， P 1 和P 2 。在使用了碱 性磷酸酶处理后， 电泳结果显示， 原P 1 和P 2 条带 迁移到P O 条带位置处， 表明磷酸化是主要的共价 修饰E 9 , 1 0 1 0磷酸氨基酸序列分析表明， 大多数的磷 酸化事件发生在C x 4 3 蛋白的丝氨酸位点E g o ， 而当 P P 6 0 5 “ 激活时， 也可以出现酪氨酸的磷酸化1 9 3 。对 于C x 4 3 ， 其C 末端是其主要的磷酸化区域， 而它在 1 5 0 、 万方数据 中国心血管杂志2 0 0 8 年4 月第 1 3 卷第2 期 胞内拌没有丝氨酸残基， 也没有研究报道C x s 的N 末端出现磷酸化。 在培养的成纤维细胞中， C x 4 3 最初的磷酸化出 现在其合成的 1 5 m i n内 9 7 。当使用转运抑制剂 m o n e n s i n 或者 B r e f e l d i n A后， 导致电泳时 P 1 , P 2 和更高磷酸化形式的条带减少， 而出现类似于磷酸 醋酶处理后的迁移条带， 仅仅在N P条带之上c 1 1 7 单体的C x 4 3 某片断磷酸化后， 迁移在 P 1 条带位 置川。 这些研究结果是否代表着按顺序进行的磷酸 化事件， 不得而知， 但很明显， C x 4 3 的磷酸化是发生 在其抵达胞膜以前。这些早期的磷酸化事件的功能 相关性还有待于阐明， 但它们参与了C x 4 3 从内质 网到组装成连接子的正确的转运过程， 或者 C x 4 3 连接子从反面高尔基网络离开。尚无直接的证据证 明C x 4 3 的磷酸化参与了聚合成半通道的调控。实 际上， 在截断 C x 4 3 蛋白的 2 5 1 位残基以后的序列 ( 即移走2 5 2 - , - 3 8 2 号氨基酸残基和C末端的2 1 个 丝氨酸中的2 0 个) 就无法观察到磷酸化对聚合的影 响， 但是截断后的蛋白仍然能够转运至胞膜， 只是没 有全长的蛋白转运效率高 1 2 7 。由于在胞膜上可以 发现有非磷酸化的C x 4 护0 1 3 ， 这些早期的磷酸化事 件可能是暂时性的， 或者对于其转运至胞膜不是必 须的。与后种观点一致的是， 磷酸化连接子中的 1 ， 个或者2 个亚单位， 可能对于高尔基体转运或者转 出至胞膜就已经足够。虽然在非细胞连接处的 C x 4 3 并不一定非得磷酸化， 但已有报道在许多细胞 类型中位于缝隙连接处的C x 4 3 主要磷酸化成 P 2 形式， 而且不溶于T r i t o n X - 1 0 0 1 3 7 。而在非缝隙连 接处的胞膜上C x 4 3 和胞浆内的C x 4 3 则可溶于1 % T r i t o n X - 1 0 0 1 x 7 。 对于磷酸化成P 2 形式， 是否对稳 定缝隙连接所必需尚不清楚， 但磷酸化事件不可能 不产生影响。 这些性质尚未清楚的磷酸化事件被认为是与组 装的改变、 不溶解于 T r i t o n X - 1 0 0特性的获得， 以 及通道的降解有关， 因此它在缝隙连接通讯的调控 中起重要作用。已知一些蛋白激酶如蛋白激酶 A ( P K A ) , P K C , 酪蛋白激酶 1 ( C K i ) ， 对于磷酸化以 及缝隙连接的组装调控非常重要， 以下将会详细叙 述。 2 . 1 C A MP水平增加后的C x 4 3 的磷酸化 一些增加胞内C A MP的药物能够增加磷酸化 的C x 4 3 以及C x 4 3 调控的细胞间通讯。对于不同 的细胞， 不同的药物能增加胞内C A MP ， 而且不同的 刺激能增加缝隙连接的形成。缝隙连接的形成的增 加是由于C x s 合成增加以及连接子转运至胞膜增 加， 由此导致缝隙连接大小、 数量的增加， 从而导致 合成新的缝隙连接也增加。C A MP 增加的缝隙连接 组装是由P K A调控的， 注射P K A催化亚基能对缝 隙连接通讯产生迅速的影响 1 a 。虽然这些效应可 能改变缝隙连接通道的门控， 但 P K A对通道的组 装的作用也是非常迅速的 1 6 。 丝氨酸3 6 4 ( S e r 3 6 4 , S 3 6 4 ) 位点是细胞内C x 4 3 的主要的磷酸化位点， 它 对于c A MP增加所致的缝隙连接通道组装很重要， 但对于基础状态下的通道聚合没有影响 1 6 。然而， 相对于P K C或者 MA P K来说， C x 4 3是 P K A的相 对较弱的作用底物 1 6 .目 前尚 不清楚是否是P K A 激活另一种激酶， 然后那种激酶磷酸化 C x 4 3的 S 3 6 4 位点， 或者 P K A不是很有效地直接磷酸化这 个位点。 2 . 2 PKC P K C已经引起人们的相当的重视， 因为 P K C 的激活剂( P MA或T P A) 在许多细胞类型中均可以 增加 C x 4 3的磷酸化， 降低细胞间通讯 “ · ， 。P MA 能够通过磷酸化 S 3 6 8位点来降低 C x 4 3 通道的通 透性( 1 e 。它除了能影响通道的门控， 还能显著地降 低缝隙连接的组装。时间动态演变、 脉冲追踪和细 胞表面生物素化的实验研究表明， 存在于胞膜上的 C x 4 3 是P MA作用的底物， 它可以使新形成的缝隙 连接失去稳定性， 而不影响大的缝隙连接斑 1 6 。但 是尚不认为 P MA对组装的影响与 C x 4 3某特定位 点的磷酸化有关。P MA作用的动力学非常复杂， 因为它能影响到通道的门控、 缝隙连接的组装和 C x s 的半衰期。另外， P MA作用后， 随着时间的演 变， P K C可以被下调， 而逆转某些效应。因此对于 不同的或者相同的细胞类型， P MA或P K C激活所 产生的不同的影响， 我们应该仔细地比较。 最近有一些报道开始从分子基础仔细研究 P K C对 C x 4 3的调控， 它通过定义哪个残基被P K C 磷酸化， 哪个残基能够在 P MA作用后显示出磷酸 化增加， 哪种特定 P K C同工酶可能参与了这些过 程。在离体研究中已显示， P K C能够磷酶化S 3 6 8 和S 3 7 2 位点 i s 。而使用了P MA作用后， S 2 6 2 和 S 3 6 8 位点的磷酸化也增加了。前者可能通过某种 机制促进细胞增生， 而后者则可能与P MA诱导的 细胞间通讯下降和单通道电导改变有关 1 8 。但是 这些或者其他潜在的P K C位点也可能参与了缝隙 1 5 1 万方数据 C h i n e s e J o u r n a l o f C a r d i o v a s c u l a r Me d i c i n e , A p r i l 2 0 0 8 , V o l . 1 3 , N o . 2 连接通道的组装和降解的调控。通过使用一些作用 于P K C亚型的抑制剂和激活剂， 有助于我们研究 P K C亚型在细胞间通讯的下游调控中的作用。 例 如， 在晶状体上皮细胞过度表达 P K C y或者 P MA 作用后， 可引起细胞表面的C x 4 3 减少， 同时可以检 测出P K C y 和C x 4 3 共沉淀 1 9 1 。在各种成纤维细胞 系统， 缝隙连接细胞间通讯依赖于P K C a , P K C 日 和 P K C S 而受到不同程度的抑制 ' 0 1 . P K C y 和P K C S 被发现与心肌细胞的C x 4 3 有关。所以可能一些传 统的和新的P K C家族成员影响到缝隙连接细胞间 通讯。一个复杂的因素就是不同的细胞表达不同的 亚型和调控蛋白， 而且对这些药物产生不同的反应， 所以对特殊亚型调控缝隙连接细胞间通讯的重要性 的概括尚不成熟。在我们完全了解不同的 P K C亚 型对缝隙连接细胞间通讯的重要性之前， 弄清磷酸 化的确切位点以及磷酸化事件所产生的结果是非常 必要的。 2 . 3 C K 1 和其他激酶 离体研究中发现， C K 1 特别是它的 8 亚型， 能 够与C x 4 3 相互作用并磷酸化其 3 2 5 , 3 2 8或者 3 3 0 位点的丝氨酸。在体研究中发现 C x 4 3也可能是 C K 1 的直接作用底物， 因为这些残基是 C x 4 3的主 要的磷酸化位点。免疫荧光和细胞表面生物素化实 验显示: C K 1 抑制剂可以增加C x 4 3 在胞膜上的定 位， 但却减少了缝隙连接的形成， 表明这条途径对于 缝隙连接的组装很重要。 当然， 其他的激酶也可以磷酸化C x 4 3 。给予促 卵泡激素， 在丝氨酸重复序列区的一些残基可以被 磷酸化( 如丝氨酸 3 6 5 , 3 6 8 , 3 6 9 和3 7 3 位点) ， 可能 部分是由P K A调节的机制所致。已有实验表明， 在C x 4 3 蛋白， 胞浆末端( 氨基酸 2 5 0 - 3 8 2 ) 2 1 个丝 氨酸中至少有 1 2 个被磷酸化和2 个酪氨酸被磷酸 化。当然也可能多种激酶磷酸化相同的位点。例 如， 丝氨酸2 5 5 位点可以被 MA P K和。 d c 2 磷酸化。 所以， 有大量的实验表明 C x 4 3 是一个高度磷酸化 的、 被调控的蛋白。而困难在于如何将特定的磷酸 化调节事件和C x 4 3 生命周期的不同步骤联系起 来。 别H E R - 2 / n e u 、 表皮生长因子受体、 胰岛素样生长 因子受体、 P K C亚型、 S T A T家族成员、 牙 链蛋白、 S m a d 家族成员、 p 5 3 , R b 等。在 E R K / MA P K信号 途径中， 一系列磷酸化特异性抗体用于追踪上游和 下游的发生在 c - R a f , ME K 1 / 2和 E R K 1 / 2的磷酸 化事件。现在临床上这些抗体被广泛用于各种疾病 的检测和治疗， 如A l z h e i m e r 病、 帕金森病、 癌症。 两种商品化的识别 C x 4 3的磷酸化特异性抗 体， 一个是识别S 3 6 8 位点的磷酸化( p S 3 6 8 ) ， 另一 个是识别 S 2 6 2位点的磷酸化( p S 2 6 2 ) , 5 3 6 8是 T P A作用后P K C的主要作 角底物 18 ， 在外源性表 达C x 4 3 的H e L a 细胞， T P A作用后， p S 3 6 8 抗体的 结合增加 8倍。比较大鼠成纤维细胞野生型和 S 3 6 8 A突变型发现， 5 3 6 8 位点磷酸化后能导致缝隙 连接单通道电导的下降( 5 0 p S 的通道多于l o o p s 的 通道) 。通过使用p S 3 6 8 抗体， 发现在细胞周期的S 期和G 2 / M期S 3 6 8 位点的磷酸化增多。商品化的 单克隆抗体Z y m e d / I n v i t r o g e n 1 3 - 8 3 0 0 ， 能够结合C 末端附近的抗原表位， 但仅仅发生在C末端未被磷 酸化时。但是， 其他实验也发现该抗体也能结合 T P A处理后的磷酸化的C x 4 3 ， 可能结合在其他部 位。还有一些其他商品化的磷酸化特异性抗体， 它 们的特异性还有待证实。有个别的研究者制备出特 异性结合C x 4 3 蛋白磷酸化S 2 7 9 / 2 8 2 和5 3 2 5 / 3 2 8 / 3 3 0 位点的抗体。使用p S 2 7 9 / 2 8 2 抗体检测发现， 表皮生长因子能够显著地增加位于缝隙连接表面和 胞浆内的C x 4 3 这些位点的磷酸化。所有这些有助 于阐明缝隙连接调控机制的C x 4 3 的磷酸化特异性 抗体正在研制发展之中。 4 小结 3 C x 4 3 的磷酸化特异性抗体 磷酸化特异性抗体的出现革新了细胞信号转导 的研究， 已有成百上千的抗体能够特异性识别目的 蛋白的某一磷酸化事件。比如磷酸化特异性抗体识 1 5 2 · 磷酸化参与了C x s 生命周期中的各个过程， 如 转运、 组装/ 解离、 降解以及半通道和全通道的门控， 由此影响到缝隙连接细胞间通讯，这些磷酸化过程 受许多的激酶调控。 磷酸化蛋白特异性抗体的研制 发展革新了细胞分子生物学的研究手段， 有助于我 们探明缝隙连接功能与特定的生物过程之间的联 系， 如发育、 细胞坏死、 生长控制、 肿瘤发生。而且我 们相信， 这些调控事件不仅仅影响缝隙连接细胞间 通讯， 也会影响到与 C x s 相互作用的蛋白。虽然 C x 4 3 蛋白目 前已发现近1 6 个磷酸化位点， 但目前 用于免疫杂交的商品化的磷酸化特异性抗体却还很 少。虽然目前这些少量的磷酸化特异性抗体不能完 万方数据 中国心血管杂志 2 0 0 8 年4 月第 1 3 卷第2 期 全覆盖所有的C x 4 3 蛋白磷酸化位点， 但已取得的 研究结果是令人可喜的。当我们了解了更多的磷酸 化的作用， 研制了更多的磷酸化特异性抗体， 并且了 解了连接蛋白与其相关蛋白之间的作用后， 我们相 信会探明更多的受C x s 影响的生物过程。、 - d e f i c i e n t 2 0 8 8 . 1 1 t a i r d D L , c e l l l i n e s J .J C e l l B i o l1 9 9 0 , 1 1 1 : 2 0 7 7 - C a s t i l l o M, K a s p r z a k L . G a p t u r n o v e r , i n t r a c e l l u l a r p h o s p h o r y l a t i o n o f c o n n e x i n 4 3 t r a f f i c k i n g , j u n c t i o n a n d i n b r e f e l d i n A- t r e a t e d r a t m a m m a r y t u m o r c e l l s J . J C e l l B i o l , 1 3 1 ，1 9 9 5 参考文献: 1 S a la m e h A . L i f e c y c l e o f c o n n e x i n s : r e g u la t io n o f c o n n e x i n s y t h e s is a n d d e g r a d a t i o n J .A d v C a r d io l , 2 0 0 6 , 4 2 : 5 7 - 7 0 . 2 M u s i l L S , G o o d e n o u g h D A . Mu l t is u b u n i t a s s e m b l y o f a n i n t e g r a l p l a s m a m e m b r a n e c h a n n e l p r o t e i n , g a p j u n c t i o n c o n n e x i n 4 3 , o c c u r s a f t e r e x i t f r o m t h e E R J . C e l l , 1 9 9 3 , 7 4 : 1 0 6 5 - 1 0 7 7 . 3 D ie z J A , A h m a d S , E v a n s WH . A s s e m b l y o f h e t e r o m e r i c c o n n e x o n s i n g u i n e a - p i g l i v e r e n r o u t e t o t h e G o l g i a p p a r a t u s , p l a s m a m e m b r a n e a n d g a p j u n c t i o n s J . E u r J B i o c h e m, 1 9 9 9 , 2 6 2 : 1 4 2 - 1 4 8 . 4 B r a e t K, V a n d a m m e W, Ma r t i n P E , e t a l . P h o t o l i b e r a t i n g i n o s i t o l - 1 ， 4 , 5 - t r i s p h o s p h a t e t r i g g e r s A T P r e l e a s e t h a t i s b l o c k e d b y t h e c o n n e x i n m i m e t i c p e p t i d e g a p 2 6 J . C e l l C a l c i u m, 2 0 0 3 , 3 3 : 3 7 - 4 8 . 5 B r u z z o n e S , F r a n c o L , G u i d a L , e t a l . A s e l f - r e s t r i c t e d C D 3 8 - c o n n e x i n 4 3 c r o s s - t a l k a f f e c t s N A D + a n d c y c l i c A D P - r i b o s e m e t a b o l i s m a n d r e g u l a t e s i n t r a c e l l u l a r c a l c i u m i n 3 T 3 f i b r o b l a s t s J .J B i o l C h e m, 2 0 0 1 ， 2 7 6 : 4 8 3 0 0 - 4 8 3 0 8 . 6 S a e z J C , R e t a m a l M A , B a s il io D , e t a l . C o n n e x i n - b a s e d g a p j u n c t i o n h e m i c h a n n e l s g a t i n g m e c h a n i s m s J . B i o c h im B io p h y s A c t a , 2 0 0 5 , 1 7 1 1 : 2 1 5 - 2 2 4 . 7 L y e S J , N ic h o l s o n B J , M a s c a r e n h a s M, e t a l . I n c r e a s e d e x p r e s s i o n o f c o n n e x i n - 4 3 i n t h e r a t m y o m e t r i u m d u r i n g l a b o r i s a s s o c i a t e d w i t h a n i n c r e a s e i n t h e p l a s m a e s t r o g e n - p r o g e s t e r o n e r a t io J . E n d o c r i n o l o g y , 1 9 9 3 ， 1 3 2 : 2 2 3 8 0 - 2 2 3 8 6 . 8 B e a r d s l e e M, L a in g J , B e y e r E , e t a l . R a p id t u r n o v e r o f c o n n e x i n 4 3 i n t h e a d u l t r a t h e a r t J .C i r c R e s , 1 9 9 8 , 8 3 : 6 2 9 - 6 3 5 . 9 C r o w D S , B e y e r E C , P a u l D L , e t a l. P h o s p h o r y l a t io n o f c o n n e x in 4 鳌 g a p j u n c t io n p r o t e in in R o u s卜 s a r c o m a f i b r o b l a s t s 亡 J . M o l v i r u s - t r a n s f o r me d Ce l l B i o l . 1 9 9 0 . 1 0 u n i n f e c t e d a n d ma mma l i a n 1 7 5 4 - 1 7 6 3 . 1 1 9 3 - 1 2 0 3 . 1 2 Ma r t i n e z A D , H a y r a p e t y a n V, Mo r e n o A P , e t a l . A c a r b o x y l t e r m i n a l d o m a i n o f c o n n e x i n 4 3 i s c r i t i c a l f o r g a p j u n c t i o n p l a q u e f o r m a t i o n b u t n o t f o r h o m o- o r h e t e r o- o l i g o m e r i z a t i o n J .C e l l C o m m u n A d h e s , 2 0 0 3 ， 1 0 : 3 2 3 - 3 2 8 . 1 3 M u s i l I - S , G o o d e n o u g h D A . B io c h e m ic a l a n a l y s i s o f c o n n e x i n 4 3 i n t r a c e l l u l a r t r a n s p o r t , p h o s p h o r y l a t i o n a n d a s s e m b l y i n t o g a p j u n c t i o n a l p l a q u e s J .J C e l l B i o l , 1 9 9 1 ，1 1 5 : 1 3 5 7 - 1 3 7 4 . 1 4 B r it z - C u n n i n g h a m S H , S h a h M M, Z u p p a n C W, e t a l. Mu t a t i o n s o f t h e c o n n e x i n 4 3 g a p j u n c t i o n g e n e i n p a t i e n t s w i t h h e a r t m a l f o r m a t i o n s a n d d e f e c t s o f l a t e r a l i t y J . N E n g l J Me d , 3 3 2 , 1 9 9 5 : 1 3 2 3 - 1 3 2 9 . 1 5 T e n B r o e k E M, L a m p e P D , S o l a n J L , e t a l . S e r 3 6 4 o f c o n n e x i n 4 3 a n d t h e u p r e g u l a t i o n o f g a p j u n c t i o n a s s e m b l y b y C A MP J . J C e l l B io l , 2 0 0 1 ，1 5 5 : 1 3 0 7 - 1 3 1 8 . 1 6 L a m p e P D . A n a l y z i n g p h o r b o l e s t e r e f f e c t s o n g a p j u n c t i o n c o m mu n i c a t i o n : A d r a m a t i c i n h i b i t i o n o f a s s e m b l y J . J C e l l B i o l , 1 9 9 4 , 1 2 7 : 1 8 9 5 - 1 9 0 5 . 1 7 L in H, O g a w a K , I m a n a g a I , e t a l. A l t e r a t io n s o f c o n n e x i n 4 3 i n t h e d i a b e t i c r a t h e a r t J . A d v C a r d i o l , 2 0 0 6 , 4 2 : 2 4 3 - 2 5 4 . 1 8 L a m p e P D , T e n B r o e k E M, B u r t J M, e t a l . P h o s p h o r y l a t i o n o f c o n n e x i n 4 3 o n s e r i n e 3 6 8 b y p r o t e i n k in a s e C r e g u l a t e s g a p j u n c t io n a l c o m m u n ic a t io n J . J C e l l B io l , 2 0 0 0 , 1 2 6 : 1 5 0 3 - 1 5 1 2 . 1 9 Wa g n e r L M, S a l e h S M, B o y l e D J ，e t a l . E f f e c t o f p r o t e i n k i n a s e C g a m ma o n g a p j u n c t i o n d i s a s s e mb l y i n l e n s e p i t h e l i a l c e l l s a n d r e t i n a l c e l l s i n c u l t u r e J . Mo l Vi s , 2 0 0 2 , 8 : 5 9 - 6 6 . 2 0 C r u c i a n i V , S a n n e r T , M i k a l s e n S O . P h a r m a c o l o g i c a l e v i d e n c e f o r s y s t e m - d e p e n d e n t i n v o l v e m e n t o f p r o t e i n k i n a s e C i s o e n z y m e s i n p h o r b o l e s t e r - s u p p r e s s e d g a p j u n c t i o n a l c o m m u n i c a t i o n J .C a r c i n o g e n e s i s , 2 0 0 1 ， 2 2 : 2 2 1 - 2 3 1 . 1 0 M u s i l' L S , : C u n n i n g h a m B A , E d e l m a n G M e t a l . p r o t e in ( 收稿日期: 2 0 0 7 - 0 6 - 1 3 ; 修回日期: 2 0 0 7 - I 1 - 0 8 ) Di f f e r e n t i a l c o n n e x i n 4 3 p h o s p h o r y l a t i o n o f g a p j u n c t i o n i n j u n c t i o n a l c o m mu n i c a t io n - c o mp e t e n t a n d 1 5 3 万方数据