吉林省长春市2020届高考生物三轮复习 生物技术实践 微生物的培养与应用1.doc

生物技术实践微生物的培养与应用1、下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方数据表，据此回答下列问题：培养基配方含量培养基配方含量KH2PO41.4g葡萄糖10.0gNa2HPO42.1g尿素1.0gMgSO47H2O0.2g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL（1）培养微生物的培养基中，一般都含有碳源、氮源、_等营养物质。若用于培养乳酸菌，培养基中除上述营养物质外，还需要添加_。细菌能利用尿素作为氮源，是由于其能合成_酶。（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入_指示剂。接种前一般采取_对培养基进行灭菌。（3）某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为105的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为161、155、158、170个，则每毫升原土壤样液中尿素分解菌的数量为_。某同学在纯化土壤中的尿素分解菌时，培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_。（4）常采用_法将纯化得到的目的菌长期保存。2、对十二烷基苯磺酸钠（LAS）是洗涤剂的主要成分，LAS对人体的皮肤、血液、肝脏有一定的危害，LAS不易被生物降解，从而容易造成环境污染。某同学尝试从长期被洗涤剂污染的土壤中筛选出LAS降解菌，并对该菌种进行培养和计数。回答下列问题：（1）该同学从长期被洗涤剂污染的土壤中取样后，将样本置于在以_作为唯一碳源的液体培养基上进行培养，该培养基为_，其作用是_。（2）经过初步培养后，该同学对获得的LAS降解菌溶液进行梯度稀释，吸取105稀释倍数的降解菌液各0.1mL，分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次为20、14、14，该同学以平均菌落数16进行计数。以平均菌落数16进行计数，可求得原菌液中LAS降解菌的浓度为_个/mL。你认为该同学的计数方法是否正确？_（填“正确”或“不正确”），说明理由_。（3）稀释涂布平板法不适宜用于某些食品工业（比如酸奶等）的质量检测，原因是_，此时应采用_统计细菌的数目。3、毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答：（1）用于分离木霉菌种的培养基属于_培养基。配制此培养基时，应加入_作为唯一碳源。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基_，以确定培养基是否被污染。 （2）纯化木霉时，统计出0.2 mL的稀释液在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为_个。用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量_，原因是_。（3）探究pH对木霉降解毒死蜱活性的影响研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，5天后检测毒死蜱的残留量（图1）。由图可推知：在偏酸性的土壤中，_。研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，再分别接种1 mL木霉悬液，混合均匀，5天后检测毒死蜱的残留量（图2）。在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可对土壤作何处理？_。4、生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题：（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用_法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_进行一系列的梯度稀释。（2）将稀释后的水样分别接种到LB固体培养基，_（填“正置/倒置”）于恒温培养箱，在_条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_（填“需要/不需要”）设置对照组。（3）对于生活饮用水中大肠杆菌的数量统计，也可以采用滤膜法，该法是利用滤膜的直径_（填“大于/小于”）大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。（4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是_（多选）。A步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B步骤接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线 C步骤多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D步骤恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数1、【答案】 水和无机盐 维生素 脲 酚红 高压蒸汽法 1.61×108 菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够） 甘油管藏2、【答案】 LAS 选择 初步筛选LAS降解菌，并增大其浓度 1.6×107 不正确 应涂布多个稀释倍数的稀释液，以获得菌落数在30-300个的平板 置的食品容易变质，导致大量目的菌死亡，而稀释涂布平板法只能测活菌数目 显微镜计数法3、【答案】 选择 毒死蜱 是否产生菌落 2×107 多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 毒死蜱稳定性较好 适当提高土壤的pH至7左右4、【答案】 高压蒸汽灭菌 无菌水 倒置 37 需要 小于 ABD