2018年高中生物课本最全必修实验归纳与整理.pdf

第 1 页 共 20 页 实验一：观察 DNA 、RNA 在细胞中的分布 一实验目的：初步掌握观察DNA和 RNA在细胞中分布的方法 二实验原理 1甲基绿 +DNA 绿色 两种试剂不是单独使用，应混合使用 吡罗红 +RNA 红色 2 8%盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的 DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮细胞正常形态 蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片 三方法步骤 操作步骤注意问题解释 取口腔上皮 细胞制片 载玻片要洁净，滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液（生理盐水） 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁 上轻刮几下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态 消毒为防止感染，漱口避免取材失败 杀死并固定装片；烘干时应来回移 动，防止受热不均破裂 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8% 的盐酸（ HCl）溶液中，用30 0C水浴 保温 5min 改变细胞膜的通透性，加速染色剂 进入细胞 促进染色体的DNA 与蛋白质分离而 被染色，细胞为死细胞 冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在外的盐酸 缓水流：防止细胞被冲走 染色 用吸水线除去多余的水分 滴 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上 染色 5min 吸取染色剂除去多余的染色剂并盖上盖玻片 观察 先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽 浅的区域，移至视野 中央，调节清晰 后才换用高倍物镜观察： 使观察效果最佳 现象 细胞核大部分被染成绿色 细胞质大部分被染成红色 细胞核也有小部分被染成红色 细胞质也有小部分被染成绿色 结论 DNA主要集中分布于细胞核中 RNA主要集中分布于细胞质中 在细胞质中也有DNA分布 在细胞核中也有RNA分布 几种液体 的作用 第 2 页 共 20 页 实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应 。 1还原糖 （如葡萄糖、果糖、麦芽糖）+ 斐林试剂砖红色沉淀 。 甲液： 0.1g/ml NaOH 溶液 乙液： 0.05g/ml CuSO 4 溶液 实质： 是还原糖（全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖）与新制的Cu ( OH ) 2反应生成砖红 色氧化亚铜（Cu 2O）。 2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色）。 3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（ 蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用，产生紫色反应。 ） A液： 0.1g/ml NaOH 溶液 B液： 0.01g/ml CuSO 4 溶液 实质： 在碱性条件下，肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物。 4. 淀粉遇碘变蓝色。 三实验材料 1做 还原糖鉴定 实验：应选 含糖高，颜色为白色或近白色的植物组织，如苹果、梨。（因 为组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察。） 2做 脂肪的鉴定 实验：应选富含脂肪的 种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34 小时（也可用蓖麻种子）。 3做 蛋白质的鉴定实验：可用 富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。 四、实验试剂 斐林试剂、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂、体积分数为50% 的酒精溶液，碘液、蒸 馏水。 五、方法步骤 （一）可还原糖的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹 果或梨组织液必须临时制 备。 要取 组织的颜色较浅，最好无 色，易于观察。 因苹果多酚氧化酶含量高， 组织液很易被氧化成褐色， 将产生的颜色掩盖。 2. 取 1 支试管，向试管内注 入 2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的 斐林试剂，振荡（此时呈 现斐林试剂的颜色：浅蓝 色）。 应将组成斐林试剂的甲液、乙 液分别配制、储存，使用前才 将甲、乙液等量混匀成斐林试 剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹 斐林试剂很不稳定，易分 解。 甲、乙液分别加入时可能无 4. 试管放在盛有50-65 0C 温 水的大烧杯中，加热约2 分 钟 ，观察到溶液颜色：浅蓝 色 棕色砖红色（沉 淀） 最好用试管夹夹住试管上部， 使试管底部不触及烧杯底部， 试管口不朝向实验者。 也 可用酒精灯对试管直接加 热。 防止试管内的溶液冲出试 管，造成烫伤； 缩短实验时间。 留适当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原糖 水浴加热 斐林试剂使用时：甲乙液等量混匀后立即使用 双 缩 脲 试使用时： 先加 A 液后加 B 液 第 3 页 共 20 页 （二）脂肪的鉴定 显微镜观察法 操 作 方 法注 意 问 题解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子 叶薄片， 将薄片放在载玻片的水滴 中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡34 小 时，新花生的浸泡时 间可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片， 浸泡时间过长，组织较软，切 下的薄片不易成形。切片要尽 可能薄些，便于观察。 取最理想的薄片，放在载玻片中央 在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏 丹染液 ，染色 1 分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50% 酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色 防止浮色影响对橘黄色脂肪 滴的观察。 酒精是脂溶性溶剂，可将花 生细胞中的脂肪颗粒溶解成油 滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 12 滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处， 可看到细胞中有染成橘黄色 或红色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇 中。 花生种子匀浆 + 苏丹 III染液橘黄色或 花生种子匀浆 + 苏丹 IV 染液红色 三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 制备组织样液 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1 至 2 天，容易研磨成浆， 也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定：加样液约2ml 于试管中 加入双缩脲试剂A，摇匀 再加入双缩脲试剂B 液 34 滴，摇匀溶液变 紫色 A 液和 B 液也要分开 配制，储存。 鉴定时先加A液后加 B液。 CuSO4溶液不能多加。 先加 NaOH溶液，提供一个碱性的环 境。A、B液混装或同时加入，会导致 Cu 2+变成 Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则 CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实 颜色。 可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。 如果稀释不够， 在实验中蛋清粘在试 管壁， 与双缩脲试剂反应后会粘固在 试管内壁上，使反应不容易彻底，并 且试管也不易洗干净。 留适当样液与反应后溶液做对照 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml 待测组织样液，向试 管内滴加 2 滴碘液，观察颜色变化。 碘液不要滴太多以免影响颜色观察 第 4 页 共 20 页 实验三：用显微镜观察多种多样的细胞 一实验目的 （1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点 （2）运用制作临时装片的方法 二实验原理： 利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如： 可以看到 叶绿体、线粒体等细胞器（能看到细胞器，无法看清细胞器结构），从而能够区别 不同的细胞。 光学显微镜细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构 电子显微镜细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构 三显微镜的使用：不能直接使用高倍显微镜，一定是先低倍后高倍观察 低倍显微镜的使用：取镜安放对光压片调焦观察 高倍显微镜的使用：在低倍镜下找到目标移装片使观察对象位于视野中央转动 转换器换高倍镜调焦观察 注：移中央：观察对象在哪往哪移；由低倍换高倍镜后一定不能转动粗准焦螺旋（容 易压坏玻片），只需轻轻转动细准焦螺旋微调即可 四相关问题 物镜：有螺纹，镜头越长，放大倍数越大，距离装片的距离越近 目镜：无螺纹，镜头越长，放大倍数越小 总放大倍数目镜放大倍数×物镜放大倍数 显微镜放大倍数是指物体的长度与宽度放大倍数 物像大小视野范围看到细胞数目视野亮度物镜与装片距离 低倍镜小大多亮远 高倍镜大小少暗近 为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观 察？ 提示： 如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要 先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。 五：讨论 1. 试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的可能 原因： 答：共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁。可能原因是：这些细胞 的位置和功能不同，其结构与功能相适应，这是个体发育过程中细胞分化产生的差异 2. 低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC ） A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜 3. 污点判断： (1 ）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上； (2 ）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； (3 ）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。 显微镜 镜头 放大倍数 第 5 页 共 20 页 实验四：用高倍镜观察线粒体和叶绿体 一、实验目的 使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。 二、实验原理 叶肉细胞中的叶绿体：因其本身含有色素，呈绿色故不需染色，呈扁平的椭圆球形或 球形 。 线粒体 ：本身无色，需染色体才能观察到。线粒体 +健那绿染液蓝绿色 健那绿染液 是专一性染线粒体的活细胞染料 ，染色后细胞仍然是活的。 三、实验材料 观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿 体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。（若用菠菜叶作实验材 料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。） 观察线粒体时选用：人口腔上皮细胞或紫色洋葱鳞片叶内表皮细胞（无色） 四、方法步骤 实 验 步 骤注 意 问 题分 析 观 察 叶 绿 体 1制片：用镊子取一片黑藻的 小叶，放入载玻片的水滴中，盖 上盖玻片。 制片和镜检时， 临时装片中 的叶片不能放干了，要随时 保持有水状态 否则细胞或叶绿体失 水收缩， 将影响对叶绿 体形态和分布的观察。 2低倍镜下找到叶片细胞 3高倍镜下观察叶绿体的形态 和分布 观 察 线 粒 体 1制作人的口腔上皮细胞临时 装片 在洁净载玻片中央滴一滴 健那绿染液用牙签取口 腔上皮细胞盖盖玻片 健那绿染液是 活细胞 染料（不影响细胞生 命） 2低倍找到口腔上皮细胞后， 换高倍镜观察线粒体 蓝绿色的是线粒体，细胞质 接近无色。 专一性染线粒体的 五、讨论 1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？ 答： 不是。 呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体 的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。 2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？ 答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下 改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。