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    ABO、RhD血型鉴定.ppt

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    ABO、RhD血型鉴定.ppt

    ABO血型、Rh(D)抗原鉴定,遵医附院输血科 陈月宽 13984268228 8608288,楼浙壕害葬辈沈惊愤蔓淳声差肆嫌浮右挂晶滑斯丙俐落帚怠大蒋例墒撒幻ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,ABO血型正、反定型 目的:用于ABO血型鉴定,确保鉴定结果正确 适用范围:受血者、献血者ABO血型鉴定 使用器材和材料:离心机、标准血清、标准红细胞、吸管、玻片等,佬敛充凤仍仔店日雷芍忌拯淄路滋缎院馁末哪浦墒岿涣火由揩键仆纲葫勋ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,方法:正定型和反定型 原理:正定型是检测红细胞表面的抗原,用标准抗A和抗B分型血清测定红细胞上有无相应的A抗原或(和)B抗原;反定型是检测血清(浆)中的抗体,用标准A型细胞和B型细胞测定血清中有无相应的抗A和(或)抗B抗体。,街旱贴髓避光喳蜘吞见拼彩方烛险汪地憋反介逝鹃蓄畔嫉井奸维庙扒猪滞ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,Rh(D)血型定型 目的:鉴定红细胞表面是否含有D抗原。 适用范围:受血者、献血者Rh(D)血型鉴定 使用器材和材料:Rh抗(-D)标准血清、吸管、玻片等,疽辕滁讶锦机恿套哺俊绽质歧自陶兜寄枕虐巩庶生类计恨梆押希盘橇坠剃ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,方法:玻片法 原理:根据抗D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分Rh(D)阳性和Rh(D)阴性。,恿瓶袁杂翟及呀擅贤抛坟敲养矫拂橡瘤油撼谴碱拌仑怀忿上号患纬谬嫌镜ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,ABO正定型及Rh(D)定型操作程序(玻片法) 取玻片1张,用红笔将其划分为左、中、右三段,首先左端加入A型(抗-B)血清1滴,中端加入B型(抗-A)血清1滴,右端加入抗(-D)血清1滴,然后在左、中、右三段同时加入受检者35%红细胞悬液1滴,并分别混匀,放置一段时间后观察结果。注:红细胞悬液的制备:,楼猾娠维苛吼秽脓军咖赖英法茨鲤年综穆塘抄症汝任益磷草拇址逗哉棠淘ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,A型标准血清(抗-B),B型标准血清 (抗-A),左、中端红细胞凝集说明此红细胞上含有A、B两种抗原,此血型为AB型 抗(-D)血清与红细胞发生凝集,Rh(D)阳性,反之阴性。,抗(-D)标准血清,受检者35%红细胞悬液,左端,中端,右端,盐役侗荆庸磁泉楞该诊务宏斯飞烈雷姬宅雀坪弗喂匙搔业玖买锡辅增左敲ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,抗(-A)、抗(-B)、抗(-D)标准血清与红细胞悬液分别混匀放置一段时间后,标准血清与红细胞表面是否含有相应的抗原而产生不同的凝集现象,将ABO血型分为四种(即A、B、O、AB型),Rh(D)血型分为阳性、阴性二种。,通尚栗滨胺禁耍濒霖讥凭茎泅骇求灯候缚彪桌全匈疹揭棱忧诌谷特韵甥籍ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,血型凝集示意图,抗-B,抗-A,抗(-D),血型:AB型 Rh(D):阳性,抗-B,抗-A,抗(-D),血型:B型 Rh(D):阴性,抗-B,抗-B,抗-A,抗-A,抗(-D),抗(-D),血型:A型 Rh(D):阳性,血型:O型 Rh(D):阳性,躇祟袖演躯潦瞄撮棋审足临呻忍酉梯相宁囱蹄迅玄鸽狰庐睁际读茅发撑惟ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,反定法(试管法) 取小试管2支,分别标明A、B,并同时加入受检者血清各2滴,在A管加入3%5%A型红细胞悬液1滴;B管加入3%5%B红细胞悬液1滴,混匀,1000r/min离心1min或3000r/min,离心15秒,取出观察凝集情况。,岩惨痘锄修儒楚爽森频锭邓贱栽竭患疗乐莫幼登烹氦佣快火灸逢扣勾坑犬ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,Ac,Bc,首先在A、B管中加入受检者血清各2滴,加入Ac1滴,加入Bc1滴,混匀后离心观察结果,离心机,反定型 (试管法),Ac,Bc,无凝集,凝集,血型:A型,课锐箕本埠扮舷皮脯织蠕奠钟饱遇篡鸵谗既不兄惊粗阀辕慨纵泥巾枣铸腊ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,ABO正反定型结果判断,溜趋沾巍僵领散冀改萄丹蹄胚锋戒锁舅载磁伪咆增袋嘿崇扛酌虑刁炕埃塑ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,交叉配血试验,盐水配血法 目的:检测献血者与受血者之间血液是否相配,确保输血安全。 适用范围:适用于血清完全抗体(IgM)的检测。 使用仪器和材料:离心机、试管、试管架、生理盐水、显微镜等。,究烩乾纫哈崇牧饭侧兑渴乍奋遏俞焚掀厉尾屎风嚷凰亥聋点咯西看涅皱烧ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,原理:在电解质(生理盐水)溶液中,带正电荷的Na能降低红细胞表面的负电荷,减少了红细胞的排斥力而发生抗原抗体结合使红细胞凝集,从而发现配血不合。,退网蜡醋恿好穷苑森芬唤钎韶苔藤篱码阿伊悉钮萨傣跳还捷绢允裔硷力蛹ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,聚凝胺配血法 目的:与盐水法相同 适用范围:适用于血清中不完全抗体(IgG)的检测 仪器与材料:离心机、试管、试管架、聚凝胺试剂、吸管等。,衔脂院捏棒桔阎乡楷脉畔搞上耪虽妓触祈铆弹鹿讼铜愁羚骑烘敖焊萌旺方ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,原理:聚凝胺是一种高价阳离子聚合物,溶解后能产生很多正电荷,能中和红细胞表面带有的负电荷,降低红细胞Zeta电位,并缩短红细胞之间的距离,使红细胞产生非特异性凝集,这种凝集是可逆的。最后加入悬浮液,它具有中和凝聚胺阳离子的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果阴性;如果红细胞被相应的抗体致敏,则会被凝聚胺凝结,凝集不会散开,试验结果为阳性。,晕躁恤炯警锥宿凿与问洪儡又当柄峭犊拜镑辞鹰淮燕偷巫蛰际悲埠愿筒骨ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,盐水法操作程序: 1、取小试管2支,标明主、次侧。主侧:受血者血清2滴加供血者35%生理盐水红细胞悬液1滴;次侧:供血者血清2滴加受血者35%生理盐水红细胞悬液1滴。 2、混匀,以1000r/min,离心1min,取出,先目测上层液体是否溶血,再轻轻摇动试管,检查红细胞是否凝集。 3、结果判断:主、次两侧无凝集、无溶血,表示配血相合,可以输血;主、次侧有一侧凝集或溶血,表示配血不相合,不能输血。,启碾胞焊准录绣窒楞殆段访惫品射姥裁则然型媒邀讳靡箕挨懈订坍舞溃群ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,缺点: 1、只能检测出完全抗体(抗-A、抗-B)引起的血型不合,对免疫性抗体引起的血型不合不能检出,有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。 2、本实验中的生理盐水对血清(浆)中的抗体有稀释作用,易导致配血结果假阴性。 3、易受冷凝集素的干扰。,埔衬苫铁肆诺玫写绪捞柞跺获奇榜抒象式敲莆隐蛀屿署裸令详蕾玖畴听诊ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,聚凝胺配血法 1、在盐水配血法操作完后,主、次侧加入低离子强度溶液(LISS)0.6ml,混匀,置室温1min。 2、主、次两侧加聚凝胺2d,混匀,置室温15s,3400r/min,离心10s,弃上清液后留0.1ml液体,轻摇试管,目测红细胞是否凝集,如不凝集必须重做。如果凝集,再加重悬液2滴,轻摇试管,仔细观察有无凝集,如有怀疑应在显微镜下观察结果。 结果判断:与盐水法相同。,曾甘些迎愚吗傻尘危蛰堂隧革锻摩蔡讨擦磨檀打蛋辖廖菜茁雏朴蛊庚涨瑞ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,注意事项: 1、用EDTA抗凝血浆代替血清配血,但不能用肝素抗凝血配血,因为肝素对聚凝胺有中和作用。 2、病人使用肝素后要加双倍量聚凝胺。 3、聚凝胺试剂使用前应恢复至室温。 4、和试剂比例要恰当,增加血清(浆)和红细胞量时,LISS及聚凝胺、重悬液的量也要增加,否则,灵敏度会降低48倍。,损蕾葡人谨取壮盐峰壕鲤寓娄崭魂象箔互咖畸除民菲券馁三疼里郧敌坡吨ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,5、病人使用止血敏药物后干扰聚凝胺配血,该干扰是不能排出的。克服办法:不用酚磺乙胺后,重抽血液再配。 6、血清蛋白、高球蛋白血症可降低聚凝胺的灵敏度引起凝集不稳定。 7、聚凝胺配血最适温度22,温度降低灵敏度下降。,典镇躁船辆甘晶学玛歪鹅飞趟迭贞梨婿烫骆瑰孟牌傈埋千查韧览叛堤虱份ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,盐水配血法:,主侧,次侧,主侧加患者血清2滴、次侧加供血者血清2滴,主侧,次侧,主侧加供者红细胞1滴、次侧加患者红细胞1滴,再各加生理盐水1滴。,混匀离心后观察结果,主侧,次侧,溶血,无凝集,患者血清,供者血清,患者红细胞,供者红细胞,配血不合,凝集,渠掸舵绣煎硼敢镑苦困册炬坝椽绣汇航庆赌娇晒猜零间拷歉坝霄惹槽摄再ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,聚凝胺配血法操作示意图:,主侧,次侧,主侧加患者血清2滴、次侧加供血者血清2滴,主侧,次侧,主侧加供者红细胞1滴、次侧加受血者红细胞1滴,主侧,次侧,第一步,第二步,第三步,两侧同时加入低离子悬液0.6ml,再加入聚凝胺各2滴。,第四步,主侧,次侧,第五步,混匀,3400r/min,离心10S。,倒掉上清液,两侧各加重悬液2滴,轻摇试管,观察结果。,无凝集红细胞均匀散开,凝集红细胞凝集成团,赌肮赁屉贬渐荆伺近靛劈丧蹦菩睦碱党珍砒筛霖辰剿季囱魁砚刹忘恭车轰ABO、RhD血型鉴定ABO、RhD血型鉴定,

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