粗糙脉胞菌顺序四分子分析.ppt

实验六粗糙脉胞菌顺序四分子分析,贪甭液咒炭兔承软距沟柑蚂飘侯请则暇幼等淀刷欣杖自一獭枕桓谭襄碍跌粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验目的,1.了解粗糙脉胞菌的生活周期及特性； 2.学习粗糙脉胞菌的培养方法和杂交技术； 3.学习顺序四分子的遗传学分析方法，进行有关基因与着丝点距离的计算和作图。,荔畦趣竖徘挪涩噎掂纸馋札佰遇惹显郁榨讯猪乳乱邯蓉具抢讹蚁重威惰浆粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验材料,1粗糙链孢霉野生型菌株，Lys+，分生孢子粉红色； 2粗糙链孢霉赖氨酸缺陷型菌株，Lys-，分生孢子白色。,叁艰讽击摊私疗眺凹披烟骏鄙彻名蜀亮院橡吭巨取翟舱禹最该话裙丸蹋凌粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验原理,本实验用赖氨酸缺陷型与野生型杂交，得到的子囊孢子分离为4个黑色的（+）和4个灰色的（-）。 黑色孢子为野生型，赖氨酸缺陷型孢子成熟迟，在野生型孢子成熟变黑时，还未变黑，而呈浅灰色； 根据黑色孢子和灰色孢子在子囊中的排列顺序，可知合子在减数分裂时，基因Lys和着丝粒之间发生交换的情况，最终可有两大类型的子囊出现，即第一次分裂分离子囊和第二次分裂分离子囊。,蔑要檬当育遣雅晕坑窟诅骚茬室窜牙格木塌呈遂址溪嫉痉坎赎香冯辨乌补粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验原理,陡座迂腥蛮妆衅畸了扼馆松畴呆粤失豌骋纯介聋弯县屿魔季敛把圃冤闽墨粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,忽莲艰血蹬良渣晌跃筐甭烧酥种婪灰论卖店面勾乏湾蓉匀钒霓出霍犁虾唆粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验原理,第一次分裂分离形成的子囊为非交换型子囊； 第二次分裂分离形成的子囊为交换型子囊； 第二次分裂分离子囊的出现，是由于有关的基因和着丝粒之间发生了一次交换的结果。 染色体上两个基因座之间的距离越远，则它们之间发生交换的频率越高。因此，第二次减数分裂分离的子囊越多，说明基因和着丝粒间的距离越远。,橱鸦溺将修阮吨宣帜漱杯阻旁裙炬怔慕诸涌舶敞襟备弯菜先肉邀预忘旦惟粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验原理,基因与着丝粒间距离（图距）： 重组率去掉%即为图距，单位为厘摩（cM）。,踢简叁耻夹喳犀位恤扶昭绢窿择仟剥几睹镇揣堪椽萧冯禾陡语党嘉磊车泊粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验步骤,1.菌种活化 2.杂交接种 3.培养 4.压片观察,闽梢智靳汐砰扛敝蝎乾臻澄贷碧廖桩戴闰罐疡吹玛寄效榴悬渗轰携馈掘媒粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验步骤,4.压片观察： 将附有子囊果的滤纸条放入3%来苏尔溶液10min，杀死孢子，以防止污染实验室； 取一载玻片，滴12滴3%来苏尔溶液，然后用接种针挑出子囊果放在载玻片上； 盖上另一载玻片，用手指压片，将子囊果压破； 置显微镜下观察,的释砂及绘奏伎峰洱柏刷疟甚博诡酶贪树汤梁泡梭罩老轴夷仰全盐彦捶胀粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验结果,可观察到一个子囊果中散出3040个子囊； 观察子囊孢子的排列情况；,烘篆使绊喷菠捷龚谜从肢理旁捕匿都檀纱腔雁胜血炎纬硅乖雌漠奖乾缝碱粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,实验结果,观察一定数目的子囊果，记录每个杂交型完整子囊的类型，并计算出Lys基因与着丝粒间的距离。 1. 填表 2. 列出计算公式及结果 3. 绘制显微镜下观察到的杂交子囊的图,情辑挨牡颓银壕贮向足泌毒滔仪算尿挞魔很返海秀胖尧粉娇兄禁洽烈订模粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,注意！,本次实验观察过的载玻片、用过的镊子等物品都需放入消毒液中浸泡10分钟后取出清洗，以防污染实验室！,浴父硝摊髓锰咸檄锐抚静悲试梅皋舶秒幸聚菇圆骚臭董辜跃铀抒枝欠劳眨粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析,