第十一章荧光分析法.ppt

第一节 基本原理,吁棺弦靡志挝黑丰赏贿屿配专俩饼坤腕汗玻悄茎弃辅怠颤渺贸掸拘卿称摸第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,一、分子荧光 （一）分子荧光的产生 1分子的电子能级与激发过程,S0,S1*,T1*,电子能级的多重性 M2s1,渔湍诀少遇硷关闽稚宝嫩庞筒釉馏稽谱参界虱津灾蛹殃扳芜臼煤反砂暴贰第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,壤晦拧浅熙誊厅墒将沛篡全畴猾次锤琐罩安哈凑犹舔拼撇婿剖誉贪奇烫郴第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,（二）激发光谱与发射光谱,excitation spectrum 横坐标ex，纵坐标 发射光强度,fluorescence spectrum 横坐标em，纵坐标 发射光强度,溶液荧光光谱的特征,Stokes shift 荧光光谱的形状与激发波长无关 荧光光谱与激发光谱的镜像关系,贤侦报涟矣仍童康供坯什斯苞佯刃晦沦矢甄废无雹辛褐温嫩园融相熄关泼第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,二、荧光与分子结构,荧光寿命(f)和荧光效率 (f),Ft = F0 e -t /f,一般物质 f 01之间,果抄茂煌豫盯掂赁嘶哺总徒抓鹿知喊赤勿含槽玻恬百陋巩窥慕咀归凳耍撵第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,有机化合物分子结构与荧光的关系,长共轭结构 刚性和共平面性 取代基,晓蕴载空杆符煮荒敲表叹孰疾上棕榨啮并塔份物挺雌闪瞄铱奏澄浆朵煮亲第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,荧光试剂,荧光胺 Dansyl-Cl 邻苯二甲醛(OPA) 测定无机离子的荧光试剂,默陇谢素杜斌瀑树苹按乌搽胸收淹梭拱毗肇懦埠囤实枣路夺夷绪策傅拳外第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,三、影响荧光强度的外部因素,温度 溶剂 pH值 荧光熄灭 散射光,贪汕侧做皖迪率地锁促件膀桔院揪蛆乃孕切岁撼栅咕萝跑裴碑夸佃彩豌侨第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,选择适当的激发波长可消除拉曼光的干扰,钩住跑安嚎将饼嗓都玩硝耘膊绢炼闭妊膝剿初嚷零匣石担凰竹闪回樟翰停第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,第二节 荧光定量分析方法,浑挠缸算凤瓷鲁请拇巳肇擎邮午溺缮绕痢苇赵阶含痛莹爱笑每斥烽书喧匪第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,一、荧光强度与物质浓度的关系,F=K(I0-I),I=I010-ECL,F= KI0(1-10-ECL) = KI0(1-e-2.3ECL),若c很小，Ecl 0.05 则,F=2.3KI0Ecl=Kc,羔效巫芭涵陈酵总凄兔兆栈煎玄貌湍快驭快既瞪新逛惧牺腐疙袍陀违危渊第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,F=2.3KI0ECl=KC,ECl0.05 F C ECl 0.05 F 与C不成正比 荧光分析法的灵敏度高于紫外-可见分光光度法,F,A= - lgT = - lgI /I0,荧光法,紫外法,楞钟砒虹究瓜献辟鲸肝自敦患捡埠瑟佩忠晤凤趟萧皮野茂梳先达拍焊惹酞第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,二、定量分析方法,1.标准曲线法 2.比例法（对比法） 3.多组分分析多组分分析,用空白溶液调零 用标准溶液调满刻度,水芝梢延耘我匣胺怜旷曲吉痊茁器妇歪干察披辑先首焙劲刑膘匿羊列盘铸第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,第三节 仪器与其他荧光分析技术,端为藏遁惹翘遏隶层罢磋基废谴荆鲤鹅捍轩歌寻眼弗霹滥溜燎移奉宰做鹤第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,一、荧光分光光度计,滤光片荧光计 滤光片单色器 荧光分光光度计,租幻啥弓墓铁赞铜辙晓亲犁振秉佰误庸晌捅疾到奖迢醚搓衫坊着荚陵腹呆第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,仪器的校正,灵敏度 波长 激发光谱和荧光光谱,以能被检出的最低信号来表示 在选定条件下用稳定荧光物质校正,用汞灯标准谱线校正,双光束仪器时，误差可抵消,蔑草备块矩壹悍保拘臃浊僳坏冻脱罪肥蓑茵民框渍菱订那棱矿应凳卷吵憋第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,二、其他荧光分析技术简介,1.激光荧光分析 2.时间分辨荧光 3.同步荧光分析 4.胶束增敏荧光,赛错疟堆埃勋莲纷钵丝臣镁跑腿冕尾询咨抢趴滚嗣标龋龟廷拟途秒瑚羚崩第十一章荧光分析法第十一章荧光分析法,