07-第9章 呼吸道传播的病原微生物-其他细菌.ppt

,Department of Microbiology, Harbin Medical University,Medical Microbiology 医 学 微 生 物 学,Department of Microbiology, GMC,第9章 呼吸道传播的病原微生物,第8节呼吸道途径传播的其他细菌,第9章 呼吸道传播的病原微生物,1、棒状杆菌属Corynebacterium,白喉棒状杆菌（Cdephtheriae） 类白喉杆菌（diphtheroid bacilli）,白喉棒状杆菌,Corynebacterium. dephtheriae,形态与染色,革兰阳性，细长弯曲，一端或两端膨大呈棒状 美蓝或奈瑟染色，菌体两端或一端可见着色较深的异染颗粒,培养特性,需氧或兼性厌氧 吕氏培养基 亚碲酸钾（K2TeO23H2O）血琼脂平板,变异、抵抗力,变异 形态、菌落和毒力 S型变为R型 抵抗力 较其他无芽孢细菌强 对青霉素及广谱抗生素敏感，对磺胺不敏感,致病物质,白喉毒素（diphtheria toxin） 索状因子（cord factor） K抗原,白喉棒状杆菌,（鼻咽腔）,飞沫、污染物品,鼻 咽喉气管,局部细菌和毒素的作用,灰白色假膜,粘膜水肿及假膜脱落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。,外毒素入血,毒血症,心肌,肝,肾上腺,外周神经,内脏出血,心肌炎,软腭麻痹 声嘶,肾上腺功能障碍,2-7天潜伏期,所致疾病：白喉,免疫性,抗毒素免疫 锡克试验（Schick test） 原理：毒素和抗毒素的中和试验,微生物学检查法,标本 直接涂片镜检 分离培养 毒力试验,防治原则,人工自动免疫 人工被动免疫 抗菌治疗,2、鲍特菌属（Bordelella）,革兰阴性小球杆菌 常寄居于人和动物的上呼吸道 引起人类百日咳和急性呼吸道感染 百日咳鲍特菌（B. pertussis） 人类百日咳的病原体,分类,百日咳鲍特菌(B.pertussis) 副百日咳鲍特菌（B.parapertussis） 支气管鲍特菌(B.branchiseptica) 鸟鲍特菌(B.avium) 欣氏鲍特菌(B.hinzii) 霍氏鲍特菌(B.holmesii),临床意义,是百日咳的致病菌 一年四季均可发病，冬春季多发，小儿多于成人 传播途径：飞沫 传染源：病人 潜伏期：12周 致病因素：百日咳毒素(PT)、丝状血细胞凝集素 (FHA)腺嘌呤环酶毒素(ACT)、气管细胞毒素、 皮肤坏死毒素,临床表现： 1.卡他期：12周，明显卡他症状，传染性强，感染标本培养阳性率高 2.痉挛期：14周，阵发性剧烈咳嗽，直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止 3.恢复期：12周，阵咳减轻，渐趋停止,生物学特性,革兰阴性短小杆菌 无芽孢，有荚膜 支气管鲍特菌、鸟鲍特菌有鞭毛 专性需氧，最适温度35 ， 最适pH6.87.0,百日咳鲍特菌革兰染色,O抗原为共同抗原，K抗原的因子7为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌所共有。经多次传代后，菌落变为粗糙而呈多形性；失去荚膜变为无毒株。 变异：相位变异等 抵抗力弱，但在低温能生存，对紫外线敏感，日光照射60分钟可死亡。,培养：B-G培养基，菌落特点有珠光色泽的菌落。 引起百日咳 检查：鼻咽拭子或咳碟法 防治：DPT三联疫苗 我国目前采用百日咳杆菌死菌苗与白喉、破伤风类毒素进行人工主动免疫，取得良好预防效果,3、军团菌属（Legionella）,军团菌,是引起军团菌病的病原体 首发于1976年的美国一次军人聚会，故称作军团病 1982年,在我国南京首次证实了军团菌病。,分类,军团菌属(Legionella) 属于军团菌科（Legionellaceae） 常见的与人类疾病有关的军团菌： 嗜肺军团菌（Legionella pneumophila） 米克戴德军团菌（L. micdadei） 长滩军团菌（L. longbeachae） 杜莫夫军团菌（L. dumoffii） 波兹曼军团菌（L. bozemanii）,形态染色,革兰阴性，但不易被着色 球杆菌，形态有多形性 Gimenen染色，菌体呈红色，背景为绿色 用Dieterle镀银法染成黑褐色 不形成芽孢，无荚膜 ， 有端生或侧生鞭毛,培养特性,营养要求高 专性需氧 需2.55CO2 生长缓慢 常用培养基及菌落特征 BCYE培养基：灰白色、圆形光滑湿润菌落 F-G培养基：针尖大小、黄色荧光,军团菌菌落形态(CYE琼脂培养基),抗原结构,抗原：具有型特异性 军团菌病约90%的是由嗜肺军团菌所致,已发现15个血清型 ，其中以Lp1血清型最常见, Lp6次之。,抵抗力,分布广泛、抵抗力强 水中存活时间长 军团菌病的主要污染源是供水系统及冷却塔和空调系统,临床意义,致病物质：内毒素、外毒素、侵袭性酶 传染途径：呼吸道（吸入含有军团菌的气溶胶） 所致疾病：军团菌病 引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染 肺炎型:多器官损害，肺部、消化道及神经系统症状及体征，致死率高。医院感染可高达23% 。 非肺炎型（类似感冒） 慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病，且死亡率高达45% 免疫性：感染者血清中出现特异性IgG、 IgM抗体,临床意义,引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染 肺炎型：多器官损害，肺部、消化道及神经系统症 状及体征，致死率高 医院感染可高达23% 慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病，且死亡率高达45%,临床意义,空气乳胶微粒传播 发病机制：内毒素和细胞产生的多种酶 裂解红细胞 消化卵黄囊,定期清洗空调 预防军团菌病,标本采集：,临床标本：痰、气管分泌物、胸水和血液为主。 病理组织标本：必须制成悬液，再进行涂片和分离培养。 环境污染标本：应先浓缩再接种。,微生物学检验,检验程序,标本 （痰、支气管分泌物、血液、）,涂片染色镜检 （Giemsa染色）,分离培养（BEYE琼脂）,鉴定试验,结果报告,形态染色 菌落特征 氧化酶、触酶 荧光抗体染色等,分离培养： 营养要求苛刻，生长缓慢 生长温度为35 最适pH6.77.0 初次分离必须采用(BCYE) 35天可形成12mm直径的光泽菌落,微生物检验,核酸检测：是快速特异的方法，采用DNA探针及PCR扩增rRNA的方法均可用于军团菌的快速诊断 抗体检测：是检测军团菌感染临床常用手段，常采用方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等,血清学试验,检测指标：检测患者血清中特异性抗体 方法：ELISA 意义： 检测特异性IgM：诊断军团菌病 检测特异性IgG：军团菌病流行病学调查,军 团 菌 感 染 诊 断 试 验,适 应 症：,军团菌病、肺炎支原体肺炎、肺炎衣原体肺炎、沙眼衣原体结膜炎、厌氧菌所致口腔感染、空肠弯曲菌肠炎、百日咳等。,4、嗜血杆菌属（Haemophilus）,嗜血杆菌属是一类革兰阴性短小杆菌、常呈多形态性、无鞭毛、无芽胞，可形成荚膜，营养要求高，需要特殊物质才能生长的一类细菌。,分类,嗜血杆菌属（Haemophilus）隶属于巴斯德菌科，嗜血杆菌属 流感嗜血杆菌（H.influenzae） 副流感嗜血杆菌（H.parainfluenzae） 溶血嗜血杆菌(H.haemolyticus) 副溶血嗜血杆菌（H.parahaemolyticus） 克雷嗜血杆菌（H.ducreyi） 埃及嗜血杆菌（H.aegyptius） 嗜沫嗜血杆菌（H.aphrophilus） 副嗜沫嗜血杆菌(H.paraphrophilus) 迟缓嗜血杆菌（H.segnis）,临床意义,几种主要嗜血杆菌常栖部位及所致疾病,生物学特性,G-短小球杆菌 呈双球形或短丝状或多形性 无芽孢、无鞭毛 有毒菌株形成荚膜,以流感嗜血杆菌（H.influenzae）为例,1.形态与染色,流感嗜血杆菌,培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培养基） X因子血红素 V因子辅酶或辅酶 菌落光滑、无色透明、露滴状 初次培养需要CO2培养 “卫星现象”,卫星现象,流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，由于后者能合成较多的V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。,致病性,呼吸道常见菌 对人有致病作用的代表菌种是流感嗜血杆菌 杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌也是致病 其余菌种多为条件致病菌,根据荚膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最强 可产生自溶酶 致病物质：荚膜、菌毛、内毒素、 IgA蛋白酶 所致疾病 原发感染：脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿童 继发感染：鼻窦炎等，多见于成人,微生物学检查,标本采集 检验程序 抗原检测及核酸检测 分离培养与鉴定 药物敏感试验,标本采集原则,在疾病早期采取标本，立即送检。 在取标本时以肉汤湿润，防止干燥。 对心内膜炎、患者取血液标本。 痰液标本，应洗涤、消化，再接种。,DNA探针杂交 （快速检测）,35 5-10%CO2,X、V因子需求试验,吲哚、尿素酶、鸟氨酸脱羧酶（生物分型）,分离培养,培养条件： 需要X、V因子 营养要求高 生长温度为35 血琼脂平板培养基 巧克力琼脂培养基,菌落特征：巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落,流感嗜血杆菌巧克力琼脂养基菌落,鉴定,培养需要X、V因子 菌落形态 卫星现象,卫星现象(satellite phenomenon),卫星现象,流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，由于后者能合成较多的V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。,注：D为不同结果,嗜血杆菌属中种的特征,鉴定依据,革兰阴性小杆菌、多形性 培养采用巧克力色培养基，CO2培养 血平板上有“卫星现象” X、V因子需求试验,5、克雷伯菌属 Klebsiella,肺炎克雷伯菌 肺炎亚种 引起多种感染，有肺炎、肺脓肿、败血症、脑膜炎 鼻炎亚种（臭鼻杆菌） 慢性萎缩性鼻炎 鼻硬结亚种（鼻硬节杆菌） 慢性肉芽肿样病变,肺 炎 衣 原 体 （只有一个血清型：TWAR株）,（一）生物学特性： 1、原体平均直径0.38um，梨形，有周浆间隙，原体无质粒DNA； 2、与其他衣原体同源性小于10%，但不同来源的TWAR同源性高（大于94%）； 3、只有一个血清型； 4、用HEp-2和HL细胞系易分离和传代，但在第一代细胞内很少形成包涵体。,传播途径：经飞沫或呼吸道分泌物传播，扩散较慢,所致疾病 引起青少年急性呼吸道感染较多见。 致肺炎（10%-12%）、支气管炎、咽炎、扁桃体炎和鼻窦炎等，但症状较轻，还可引起心包炎、心肌炎和心内膜炎。 还与慢性冠心病、急性心肌梗塞有密切关系,（二）致病性与免疫性,传染源：病人或带菌者,