三聚氰胺的检测液相法.PPT.ppt
.,1,三聚氰胺的检测（液相法）,.,2,三聚氰胺 物理与化学性质,.,3,三聚氰胺,分子式： C3H6N6 分子量：126.15 英文名：Melamine,.,4,三聚氰胺-结构式,.,5,三聚氰胺,俗称蜜胺、蛋白精，又叫2 ,4 ,6- 三氨基-1,3,5-三嗪、1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺、2,4,6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。 是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一种重要的有机化工原料。,.,6,三聚氰胺,三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度1.573g/cm3 (16)。 在水中溶解度随温度升高而增大,在20时，约为3.3 g/L，即微溶于冷水，溶于热水，极微溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。,.,7,三聚氰胺,遇强酸或强碱水溶液水解，胺基逐步被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。,.,8,三聚氰胺 检测过程,.,9,检测_选择方法,原料乳与乳制品中三聚氰胺的检测方法：GB/T22388-2008 饲料中三聚氰胺的测定：NY/T1372.29-2007,.,10,检测_试剂,甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 氨水:浓度25%-28%。 三氯乙酸溶液10g/L：称取10g三氯乙酸加水至1L。,.,11,乙酸铅溶液(22g/L):称取22g乙酸铅,用约300mL水溶解后定容至1L。 氨水甲醇溶液：量取5ml氨水，溶解于100ml甲醇中。 20%甲醇溶液：200ml甲醇加入800ml一级水中，混匀。 方法所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。,.,12,检测_标准品,三聚氰胺标准品（纯度99%）。,.,13,检测_标准品,标准储备液 准确称取100mg（精确到0.1mg）三聚氰胺标准品于100mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4避光保存。,.,14,检测_标准品,标准品中间液 精确吸取标准储备液5.00mL于50mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度，配制成浓度为100 g/mL 的溶液，于4避光保存。,.,15,检测_标准品,标准品工作液 精确吸取标准中间液0.50mL、 1.00mL、 2.00mL、 5.00mL、 10.00mL于5个100 mL 容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度.于4避光保存。,.,16,检测_标准品,.,17,检测_标准品,标准工作液浓度可根据所测样品中的具体含量调整。 如果只做单点标样，请选择与样品浓度最接近的一个点。,.,18,检测_标准品谱图,.,19,检测_标准品曲线,.,20,检测_样品预处理,原理： 样品沉淀脂肪和蛋白质，调PH至中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。,.,21,检测_样品预处理,准确称取610g样品于50ml容量瓶中。 加入三氯乙酸溶液约20ml，要徐徐加入，并摇动容量瓶，超声提取10-20分钟，加入2ml乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液稀释至刻度。 静置30分钟，用滤纸过滤，滤液（如不需净化）经滤膜(0.45m)过滤，滤液供液相测定用。,.,22,检测_样品预处理,如需净化，按以下步骤操作: 小柱活化：依次用3mL甲醇和3mL水活化小柱。 上样：准确吸取10mL（可根据实验情况调整）滤液转移至固相萃取柱中。,.,23,检测_样品预处理,净化：再用3mL水和3mL甲醇分别洗涤，抽至近干。 洗脱：用6mL氨化甲醇溶液洗脱，收集全部洗脱液。 控制流速在1mL/min以内。,.,24,检测_样品预处理,洗脱液于50下用氮气吹干，残留物用1mL流动相（或20%甲醇水溶液）溶解，涡旋混合1min，供液相测定用。,.,25,检测_色谱条件,色谱柱：C18或C8柱，或同等性能的柱子；4.6mm250mm，5m。 流动相：称取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取该溶液900ml加入100ml乙腈，混匀。,.,26,检测_色谱条件,流速：1mL/min。 进样量：10L。 检测器：紫外检测器，波长240nm。 根据保留时间定性，外标峰面积法定量。,.,27,检测_样品谱图,.,28,检测_调节流动相,水相乙腈=9010 适宜大多数的样品。 适当增加水相的比例可推迟出峰时间，使分离度变大。,.,29,结果,计算 检出限,.,30,结果_计算,原理：外标法 C标A样D 单点法公式： X A标 m C样D 多点法公式： X m,.,31,结果_计算,式中： X - 样品的含量，mg/kg； C标 - 标准使用液浓度，g/ml； C样 - 样品浓度，g/ml； D - 样品稀释液总体积，mL； m - 样品质量，g； A样 - 样品的峰面积； A标 - 标样的峰面积。,.,32,结果_允许差,在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。,.,33,结果_检出限,液相法检出限:2mg/kg 计算结果2时，应给出具体值； 计算结果2时，应标明未检出，不得给出具体数值，因为这时的数值是不准确值。 峰面积太小无法计算时，应标明未检出，不得将检验结果写为零。,.,34,结果,检测结束后应将标样、样品所有色谱图与原始记录一同存放，色谱图亦为原始记录的一部份。,.,35,谢谢 集团质量管理部 云青2010.11.1,
