半导体激光血管内照射对人体外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的调节作用.doc
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1、第 6 卷 第 3 期 1997 年 9 月激光生物学报V o l.N o.63A C TA L A SER B IO L O GY S IN ICA Sep. 1997 半导体激光血管内照射对人体外周血 T淋巴细胞亚群及 N K细胞的调节作用徐清史桂英许松林(上海第二医科大学 生物物理教研室, 200025)成柏华王如瑶(上海第二医科大学 神经生物学实验室, 200025)朱雅芬俞庆宪吴之畏(上海东南医院, 200023)摘要本文报道了半导体激光血管内照射对人体外周血 T 淋巴细胞亚群及 N K 细胞的免疫调节作用。 实验结果提示: 在 23 例经 650nm. 5mW 的半导体激光血管内照
2、射治疗一次, 五次和十次的患者 中, CD + 3 细 胞 亚 群 的 百 分 比 与 照 射 前 ( 63166% ) 比 较, 分 别 提 高 到 65186% , 69194% ,75104% 。CD + 4 T 辅助细胞在第十次治疗后也有所增加。除此之外, 半导体激光血管内照射对N K细胞比例及 CD + 4CD + 8 比值具有双向调控作用, 即偏离 (即高于或低于) 正常值的患者经照射后 恢复到正常水平。 这种双向调控作用将对临床治疗更有指导意义。关键词半导体激光血管内照射T 淋巴细胞亚群免疫调节作用The ef f ec ts of D iode L a ser IL IB on
3、 Per iphera lB lood T L ym phocy te s Subpopula t ion s an d NK ce llsX u Q in g S h i G u i- Y in g C h en g B a i- H u a e t a l(Sh an gh a i Seco n d M ed ica l U n ive r sity,200025)A bstra c tT h e imm uno - regu la t io n effec t o f d io de la se r IL IB o n T lym p ho cy te s subpop u la t i
4、o n s and N Kce lls h a s been stud ied.T h e re su lt s show ed th a t th e re w e re an im p ro v ing effec t o n th e CD + 3, CD + 4, CD + 8, and N K ce lls af te r a p e r io d o f d io de la se r (650nm , 5mW , CW ) IL IB in 23 p a t ien t s. T h e m ean va lue o f CD + 3% w a s incea sed o n t
5、h e lst , 5th and 10th t im e s IL IB sep a ra te ly ( 65186% , 69194% , 75104% ) com p a red w ith th e da ta ( 63166% ) be2 fo re t rea tm en t. T h e m ean va lue o f CD + 4% o n ly inc rea sed o n th e 10th t rea tm en t.In sp ite o f th e CD + 8 w a s a inc rea sed tendency and th e m ean va lu
6、e o f N K % w a s inc rea sed o n th e lst t im e o f IL IB (23166 to 26190% ) bu t a m o du la t ing effec t h ad been seen , w h ich m o du la ted th e abno rm a l leve ls o fN K ce ll and CD + 4CD + 8 to th e no rm a l leve ls, so it w o u ld be a m o re u sefu l effec t c lin ica lly.key word s
7、D io de la se rIL IBT lym p ho cy te s subpop u la t io nImm uno - m o du la t io n低功率氦氖激光血管内照射 ( IL IB ) 在临床上的应用已有大量报道。 对机体免疫状态的影国家自然科学基金资助项目收稿日期: 1997- 04- 27响和促进免疫功能的作用, 作者亦已作了临床治疗观察报道。 但半导体激光对人体免疫功能是否也有同样的影响? 是当今人们关注的问题, 迄今尚未见报道。本文将继续采用单克隆抗体 直 接免疫荧光染色方法, 应用流式细胞仪 ( FCM ) 深入观察分析半导体激光 ( 650nm , 5mW
8、 , CW ) 血管内照射对人体外周血 T 淋巴细胞亚群 (CD + 3, CD + 4, CD + 8 及 N K 等) 的影响。 从而 为进一步开发推广半导体激光在临床上的应用, 提供科学实验的依据。1 材料与方法111 观察对象选自上海东南医院病房内接受 IL IB 疗程治疗的患者共 23 例。 正常人对照组: 为体检合格的健康人员共 15 例。112 样品采集IL IB 治疗者分别于照射前, 第一次照射后, 第五次照射后, 或第十次照射后立即由静脉采 血抽取肝素抗凝血 1m l 进行分析, 正常组只采血一次。113 半导体激光器及血管内照射半导体激光器: 末端输出功率为 5mW , C
9、W 波长 650nm 。激光器系采用进口半导体激光管 自行研制而成。 每次照射时间为 40 分钟。 每日一次, 连续五次为一疗程。 部分患者共连续进行十次照射。 第一次照射前及每次照射 以后各抽血进行检测分析。CD + 3, CD + 4, CD + 8, N K 细胞的检测采用微量外周血全血法和单克隆抗体直接免疫荧光法。具体步骤如下: 各取肝素抗凝血 100l, 分别加入 CD + 3 - F IT C. CD + 4 - F IT C. CD + 8 -P E. (由北京医科大学免疫教研室提供) CD 16. CD 56- P E. (美国 BD 公司提供) 单克隆抗体各20l, 孵育 3
10、0 分钟后, 加入 N H 4C 1 溶血剂溶解红细胞, 离心弃上清液, 用 PB S 洗涤后用 300l( 015- 1% ) 甲醛溶液悬浮细胞, 上激光流式细胞仪 FA C Scan (BD 公司) 检测, 每个样品收取10000 个细胞, 以 L IST 模式存储, 用 B. D. 公司所提供的专用程序 L Y SY S 软件分析数据。2 实验结果211健康人外周血中 CD + 3, CD + 4, CD + 8, N K T 细胞亚群的正常值正常 15 例健康人外周血中 CD + 3 亚群平均为 701404111% 。CD + 4 亚群平均为 441153148% 。CD + 8 亚
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