碱性磷酸酶染色液偶氮偶联法.doc
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1、碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)产品简介:碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.29.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞 之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。MB碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是 采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在pH9.29.8的碱性条件下,细胞内碱性磷 酸酶可使
2、AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位 于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的 碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠。产品组成:名称编号DE00044 X2mlDE00044 X10mlDE00044 X20mlStorage试剂(A): ALP固定液2ml10ml20mlRT避光试剂(B):B1: AS-BI染色液1ml5ml10ml-20 C避光ALP孵育液B2: FBB染色液1ml5ml10ml-20 C避光临用前,按B1:B2=1:1比例混合,即为 ALP孵育液,即配即用
3、。试剂(C):核固红染色液2ml10ml20ml4 C避光试剂(D):甲基绿染色液2ml10ml20mlRT避光使用说明书1份自备材料:1、载玻片、湿盒2、显微镜染色结果:ALP活性部位蓝色细胞核红色(核固红)或绿色(甲基绿)培养细胞染色图例(未经复染)血液、骨髓涂片结果判断:一般以积分报告结果,根据 100个中性粒细胞阳性颗粒进行 04+计分。细胞分值染色特点0无颗粒1稍有颗粒2中等程度颗粒3多数颗粒4充满颗粒临床意义:1、类白血病反应积分明显增高,未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。2、急性细菌性感染积分明显增高,病毒性感染积分多正常或减低。3、 再生障碍性贫血积分常增高,PNH、MDS积分常减低。注意事项:血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。ALP孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。复染时,核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。每次染色时,应有阳性对照片。有效期:6个月有效。
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