课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2).pptx
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1、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,第二课时,专题二 课题2,二.实验的具体操作 .土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。 取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。.制备培养基: 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基,应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,塞好棉塞。在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行。,(三)样品的稀释,分离不同的微生物采用不同的稀释度,其原因是不同微生物在土壤中含量不同,其目的是保证获得菌落数在30300之间、适于计数的平板。 细菌稀释度为104、105、106 放线
2、菌稀释度为103、104、105 真菌稀释度为102、103、104,实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。,.取样涂布,.微生物的培养与观察,在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。,培养不同微生物往往需要不同培养温度细菌:3037 培养12d放线菌:2528 培养57d霉菌:2528 培养34d,如果得到了2个或2个以上菌落数目在30300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。,为了提高效率,
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