黑木耳黑色素体外抗氧化性能力测定.doc
《黑木耳黑色素体外抗氧化性能力测定.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《黑木耳黑色素体外抗氧化性能力测定.doc(5页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、9-12月份,实验计划9-11月中旬,黑木耳黑色素体外抗氧化性能力测定11月下旬至1月,数据处理及论文写作黑木耳黑色素的体外抗氧化活性 FC 3.146 LWT 2.114 农业工程学报真菌黑色素研究进展微生物学通报预实验:黑木耳黑色素体外抗氧化性能力测定1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 实验样品黑木耳黑色素(自己提纯)(无标记 HPLC检测纯度99%)1.1.2主要试剂1.1.3主要仪器超微弱化学发光测量仪可见分光光度计1.2 样品溶液的准备精密称取4.6mg melanin,70%乙醇定容至10mL,配成浓度为10-3mol/L的溶液。分别吸取0.1mL、0.5 mL、1.0 mL
2、、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL依次定容至10mL,配成110-5mol/L、510-5mol/L、1010-5mol/L、1510-5mol/L、2010-5mol/L和2510-5mol/L的溶液。1.3 试剂的配制(1)0.2mol/L的PBS(pH6.6)(2)0.3%的K3Fe(CN)6(3)10%三氯乙酸(4)0.05mol/L的鲁米诺:用0.05mol/L的NaOH溶液配制,在避光处保存,临用前用双蒸水稀释成1mmol/L的溶液。(5)0.01mol/L的邻苯三酚:用1mmol/L的HCl溶液配制,4冰箱中保存,用前用双蒸水稀释成6.2510-4mol/L的溶液。(6)
3、0.05mol/L的pH10.2的Na2CO3-NaHCO3缓冲溶液:含0.1mmol/L的EDTA,用前现配。(7)鲁米诺-碳酸盐缓冲溶液a:将(6)与(4)按体积比2:1混合而成。(8)1mmol/L的CuSO4溶液(9)1mmol/L的邻菲啰啉溶液(10)0.05mol/L的硼砂溶液(11)1mmol/L的Vc溶液(12)0.15%的H2O2溶液(13)0.15mol/L H2O2(14)鲁米诺-碳酸盐缓冲溶液b:0.1mmol/L的鲁米诺与pH9.5的0.05mol/L碳酸盐缓冲溶液(V/V,1:17)配制而成。1.4实验方法1.4.1还原力的测定取1mL的样品溶液+0.2mL的0.2
4、mol/L的PBS(pH6.6)+1.5mL0.3%K3Fe(CN)6于试管中混匀,50水浴反应20min,流水速冷,加入1mL10%三氯乙酸混匀,以3000r/min离心10min,取2mL上清液,加0.5mL0.3%FeCl3混匀,再加3mL蒸馏水摇匀,以蒸馏水调零,测定A700,A700越大,表示还原能力越强。用蒸馏水作为无还原能力对照,Vc作为有还原能力对照。1.4.2清除超氧阴离子能力的测定采用邻苯三酚-鲁米诺化学发光体系测定清除超氧阴离子能力:测定时,向发光池中注入10.0L不同浓度的样品(以样品缓冲溶液为对照)然后注入6.2510-4mol/L的邻苯三酚0.05mL,最后加入鲁米
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 黑木耳 黑色素 体外 氧化 性能力 测定
![提示](https://www.31doc.com/images/bang_tan.gif)
链接地址:https://www.31doc.com/p-14527067.html