如何测定食品中的维生素.ppt
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1、2019-07-31,1,概述,维生素是维持机体正常生理功能及细胞内特异代谢反应所必需的一类微量低分子天然有机化合物。,http:/ http:/ http:/ http:/ yyy,2019-07-31,2,二、类别,2019-07-31,3,三、分类 根据维生索的溶解性可将其分成两大类: 1脂溶性维生素 包括维生素A、D、E、K,它们不溶于水而溶于脂肪及有机溶剂(如苯、乙醚及氯仿等)中;在食物中它们常与脂类共存,在酸败的脂肪中容易破坏;其吸收与肠道中的脂类密切相关,主要储存干肝脏中; 2水溶性维生素 包括B族维生素(维生素B1、B2、PP、B6、叶酸、B12,泛酸、生物素等)和维生素C。与
2、脂溶性维生素不同,水溶性维生素及其代谢产物较易排出,体内没有非功能性的单纯的储存形式。 有些化合物,其活性类似维生素,曾被列入维生素类,通常称之为“类维生素”,如生物类黄酮、辅酶Q、肌醇、硫辛酸、对氨基苯甲酸、乳清酸和牛磺酸等。,2019-07-31,4,四、测定意义 食品科学研究者需要准确的食品成分分析信息,计算营养素的膳食摄入,以改善人类的营养; 食品营养价值评价; 食品生产工艺设计及强化食品的评价; 五、测定方法 涉及人体和动物的生物分析方法; 利用原生生物、细菌和酵母等的微生物分析方法; 化学法、分光光度法、荧光法、色谱、酶法、免疫和放射等物理化学分析方法。,2019-07-31,5,
3、脂溶性维生素的测定,脂溶性维生素的理化性质: 溶解性:不溶于水,易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、苯、乙醚等有机溶剂。 耐酸碱性:VA、VD对酸不稳定,对碱稳定; VE对酸稳定,对碱不稳定。 耐热性:VA、VD、VE耐热性好,能经受煮沸 耐氧化性:VA易被氧化,光、热促进氧化 VE易被氧化,光、热、碱促进氧化 VD性质稳定,不易氧化,2019-07-31,6,一、维生素A的测定,维生素A类是指含有-白芷酮环的多烯基结构、并具有视黄醇生物活性的一大类物质。广义而言包括已经形成的维生素A和维生素A原。 动物体内具有视黄醇生物活性功能的维生素A类包括视黄醇、视黄醛、视黄酸等物质,4-氧视黄酸、4-羟视黄
4、酸等不具有视黄醇生物活性功能。 维生素A分为维生素A1和维生素A2,A1主要存在于海产鱼中,A2主要存在于淡水鱼中。 在植物中不含已形成的维生素A,在黄、绿、红色植物中含有类胡萝卜素,其中一部分可在体内转变成维生紊A的类胡萝卜素称为维生素A原,如-胡萝卜素、-l胡萝卜素、-胡萝卜素等。目前已经发现的类胡萝卜素约600种,仅有约1/10为维生素A原。,2019-07-31,7,维生素A1(视黄醇),维生素A2,2019-07-31,8,(一)三氯化锑比色法,1 原理 维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用,生成蓝色物质,其颜色深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。 该蓝色物质不稳定,需在一定时间
5、内(6秒)用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。 2 试剂 无水乙醚、无水乙醇、三氯甲烷等试剂需预先处理。 维生素A标准溶液 3 操作步骤 维生素A极易被光破坏,实验操作应在微弱光线下进行,或用棕色玻璃仪器。,2019-07-31,9,3.1样品处理:根据样品性质,可采用皂化法或研磨法。 3.1.1皂化法:适用于维生素A含量不高的样品,可减少脂溶性物质的干扰,但全部试验过程费时,且易导致维生素A损失。 皂化:根据样品中维生素A含量的不同,称取0.55g样品于三角瓶中,加入10mL 1:1氢氧化钾及2040mL乙醇,于电热板上回流30 min至皂化完全为止。 根据上述性质,测定脂溶性维生素
6、时通常先用皂化法处理样品,水洗去除类脂物。然后用有机溶剂提取脂溶性维生素(不皂化物),浓缩后溶于适当的溶剂中测定。在皂化和浓缩时,为防止维生素的氧化分解,常加入抗氧化剂(如焦性没食子酸,抗坏血酸等)。对于某些含脂肪量低、脂溶性维生素含量较高的样品,可以先用有机溶剂抽提,然后皂化,再提取。对于那些对光敏感的维生素,分析操作一般需要在避光条件下进行。,2019-07-31,10,3.2 标准曲线制备 准确取一定量的维生素A标准液于45个容量瓶中,以三氯甲烷配制标准系列。 取相同数量比色管顺次取1mL三氯甲烷和标准系列使用液1mL,各管加入乙酸酐1滴(可除去微量吸入的水分),制成标准比色系列。 于6
7、20nm波长处,以三氯甲烷调节吸光度至零点,将其标准比色系列按顺序移入光路前,迅速加入9mL三氯化锑三氯甲烷溶液。于6s内测定吸光度。 以吸光度为纵坐标,以维生素A含量为横坐标绘制标准曲线图。,2019-07-31,11,3.3 样品测定 于一比色管中加入10mL三氯甲烷,加入1滴乙酸酐为空白液。 另一比色管中加入1mL三氯甲烷,其余比色管中分别加入1mL样品溶液及1滴乙酸酐。 其余步骤同标准曲线的制备。 4 结果计算,2019-07-31,12,水溶性维生素的测定,水溶性维生素B1、B2和C,广泛存在于动植物组织中,饮食来源充足。 溶解性:水溶性维生素都易溶于水,而不溶于苯、乙 醚、氯仿等大
8、多数有机溶剂。 稳定性:在酸性介质稳定,既使加热也不破坏; 但在碱性介质中不稳定,易于分解,特别在 碱性条件下加热,可大部或全部破坏。 易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响, 维生素B2对光,特别是紫外线敏感,易被光 线破坏 维生素C对氧、铜离子敏感,易被氧化。,2019-07-31,13,食品中水溶性维生素的测定 食品中维生素B1的测定 食品中维生素B2的测定 食品中维生素C的测定 食品中烟酸的测定 食品中维生素B6的测定,2019-07-31,14,一、维生素B1的测定,维生素B1又称硫胺素、抗神经炎素。 测定方法:比色法 荧光法(GB/T 12390-1990) HPLC法 1. 荧光
9、法原理,2019-07-31,15,硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成噻嘧色素,在紫外线下,噻嘧色素发出荧光。在给定的条件下,以及没有其他荧光物质干扰时,此荧光之强度与噻嘧色素量成正比,即与溶液中硫胺素量成正比。 本方法适用于各类食物中硫胺素的测定,但不适用于有吸附硫胺素能力的物质和含有影响噻嘧色素荧光物质的样品。 本方法的最小检出限为0.05g。,2019-07-31,16,2. 主要试剂 活性人造浮石 硫胺素标准溶液 3. 仪器设备 荧光分光光度计 Maizel-Gerson 反应瓶 盐基交换管,2019-07-31,17,Determination of water-soluble vi
10、tamins,5. Determination of Vitamin C(抗坏血酸) Characteristics of Vitamin C,Oxidation,hydrolysis,食品分析中的所谓总抗坏血酸是指抗坏血酸和脱氢抗坏血酸二者的总量,不包括二酮古乐糖酸和进一步的氧化产物。,http:/ http:/ http:/ http:/ yyy,2019-07-31,18,Determination of Vitamin C,Fluorescence colorimetric method (荧光比色法) Principle,2019-07-31,19,Determination of
11、Vitamin C,2,4-dinitrophenylhydrazine method (2, 4- 二硝基苯肼法) Principle,2019-07-31,20,Determination of Vitamin C,2,6-dichloro-indophenol redox method (2, 6-二氯靛酚氧化还原法) Principle,titration,2019-07-31,21,Determination of Vitamin C,HPLC Sample treatment 称取一定量的样品用冷的17%的偏磷酸均质,离心,过滤。为测抗坏血酸,将500L的滤液同115L的45% K
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