丹参饮应用于运动损伤性血瘀证治疗机理的实验研究.pdf
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1、第2 4卷第9 期 2 006年 9月 中医药学刊 CHI NE SE AR CHI V E S OF T R A DIT I ON A L CHI NE SE ME DI CI NE . 2 4 N o . 9 .20 0 6 丹参饮应用于运动损伤性血痕证治疗机理的实验研究 王 滔 , 王大 安2 ( I . 广州市番禺职业技术学院, 广东 广州5 1 1 4 8 3 ; 2 . 广州体育学院, 广东 广州5 1 0 0 0 7 ) 摘要: 目 的: 探讨丹参饮治疗运动损伤性血0证机理, 观察丹参饮对急性缺血组织病理改变及细胞凋亡干 预作用。方法: 采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性组织
2、缺血模型, 巧 条犬随机分为对照组、 模型组、 丹 参饮组, 每组5 条。采用H E染色 及D N A末端标记法( T U N E L ) 分别观察组织病理变化和细胞调亡的变化。结 果: 对照组组织无明显变性与坏死等改变, 仅见少量凋亡阳性细胞; 模型组有明显组织坏死, 细胞凋亡增多; 丹参 饮组示细胞坏死及细胞凋亡均较模型组显著减轻。结论: 丹参饮可有效抑制细胞坏死及凋亡, 减轻组织损伤, 对 缺血组织有保护作用。 关键词: 运动损伤性血疥证; 坏死; 调亡 中图分类号: R- 3 3文献标识码: B文章编号: 1 0 0 9 - 5 2 7 6 ( 2 0 0 6 ) 0 9 一1 6 4
3、 6 - 0 2 祖国医学认为血癖证应包括两个方面。一是血不循 经, 溢出脉外, 不能及时消散的一类寮血; 二是运行于脉中 之运行不畅的癖血。由此可见目 前运动损伤造成的血痕证 均可以用此种理论加以分析, 并且可以以此为据指导治疗。 目 前, 临床之中多用丹参饮为基础方进行加减配伍治疗运 动损伤性血癖证, 并且取得了很好的疗效。为了了解丹参 饮治疗运动损伤性血痕证的具体机理, 本实验就丹参饮对 急性缺血组织病理改变及细胞凋亡的干预作用进行了实验 研究。 1 材料和方法 1 . 1 实验动物和药物健康成年杂种犬, 体重( 1 1 士 3 ) k g , 雌雄不拘; 丹参饮按文献剂量购买中药材,
4、浸泡、 煎煮、 浓缩、 灭菌、 4 冷藏保存备用。戊巴比妥钠由上海化学试 剂厂进口分装。 1 . 2 实验器材D H一 1 动物人工呼吸机( 型号: D H一 1 , 浙江医科大学医疗仪器实验厂制造, 流量: I O m Uk g , 呼吸 频率2 0 次/ m i n , 呼吸比1 : 2 ) ; B 3 双目 摄影生物显微镜( 麦 克奥迪实业集团公司) ; 体视显微镜图象系统 S M Z一 1 4 3 ( 麦克奥迪实业集团公司) ; 6 1 一 1 海鸥照相机( 上海光耀电 影照相厂) ; F i n e s s e 3 2 5 ( T h e r m o S h a n D o n l
5、i m it e d A s t m o o r . R u n c o r n , s h e s h ir e , W A T I P R U K ) ; 气管 插管 及相应的 手术 器械。 1 . 3 实验方法 动物模型复制: 参考文献 用戊巴比 妥钠( 3 0 m g / k g , i v ) 麻醉犬, 固定, 铺巾单, 行气管插管并连 接动物呼吸机。分离股静脉, 插管予0 . 9 %生理盐水补液。 取胸骨正中切口暴露心脏, 剪开心包并缝至胸壁呈摇篮状, 于冠状动脉左前降支第二角支处穿线, 对照组仅穿线不结 扎, 余各组行完全结扎。动物分组与给药: 实验分组: 先 按体重分层, 再用
6、随机数字表法随机分为3 组: 对照组、 模 型组、 丹参饮组, 每组5 条。造模前灌胃 给药, 每天1 次, 给 药剂量2 0 m Uk g , 连续5 天, 对照组及模型组: 蒸馏水; 丹参 饮( 含生药1 0 . 2 g / 1 0 k g “ d - ) 。 连续灌胃5 天, 并于第5 天 冯连泽, 王卫, 杨莲雪, 等. 当归补血汤对脑缺血的保护作用 的 形态学研究 J . 科技前沿, 2 0 0 0 , ( 1 ) : 巧 王伟中, 乌云娜, 王爱萍. 当归补血汤的血液流变学研究 J 内 蒙 古中 医 药, 2 0 0 5 , ( 1 ) : 3 4 陈淑民, 孟华民. 当归补血汤抗
7、氧化作用的研究 J . 四川省 卫生管理干部学院学报, 1 9 9 5 , 1 4 ( 2 ) ; 3 阴祯宏, 李兰芳, 金亚宏, 等. 当归补血汤抗自由基作用的药 效 动 力学 研 究【 J . 中 国 实验 方 剂 学 杂志, 1 9 9 9 , 5 ( 1 ) : 2 4 阴祯宏, 李兰芳, 金亚宏, 等. 运用药效动力学研究方法观察 中药含药血清与整体药效的相关性 J . 中国中医药信息杂 志, 1 9 9 9 , 6 ( 1 1 ) : 3 2 尹艳艳, 王宇翔, 江勤, 等. 当归补血汤的镇痛作用【 J . 安徽 医科大学学报, 2 0 0 0 , 3 5 ( 5 ) : 3 5
8、 5 彭延宽. 当归补血汤对肝硬化门脉高压血液动力学的影响 J 山 东中医 药大学学报, 2 0 0 0 , 2 4 ( 5 ) : 3 7 3 张莹雯, 谢丹. 当归补血汤对糖尿病大鼠肾组织的保护作用 J . 中 成药, 2 0 0 5 , 2 7 ( 1 ) : 7 5 李德妓, 蒋伯龄, 朱元莉. 当归补血汤对高眼压兔视网膜神 经节细胞凋亡的抑制作用【 J . 中国中医眼科杂忠, 2 0 0 5 , 1 5 ( 1 ) : 3 0 ,J,J 2内、 八j门j resJFesL 气1.J,J 4哎一 八j内j rJrL ,J,J 户011 冉内j 厂ILrL ,J,J n69 八j飞 厂r
9、L 2 6 阴祯宏, 李兰芳, 金亚宏, 等. 运用药效动力学研究方法观察 中药含药血清药理与整体药效的相关性 J . 中国中医药信 息杂志, 1 9 9 9 , 6 ( 1 1 ) : 3 2 2 7 刁凤声, 张丽秋, 孔力, 等. 当归补血汤对小鼠肝癌淋巴道转 移和脾细胞凋亡的影晌【 J . 中药药理与临床, 1 9 9 9 , 1 5 ( 2 ) : 7 2 8 孔祥英. 黄蔑与当归配伍的免疫实验研究 J . 山东中医药 大学学报, 1 9 9 7 ; 2 1 ( 4 ) : 2 6 6 仁 2 9 郝江, 文家福, 成诗黔, 等. 当归补血汤对创伤小鼠 血日 一内 啡肤和皮质醇的影响
10、与免疫保护作用【 J J . 中国中西医结合 急救杂志, 2 0 0 0 , 7 ( 4 ) : 2 3 4 3 0 马世平, 杨汉样墨, 瞿融, 等. 当归补血汤及其组成药物对红 细胞免疫功能的影响 J . 中成药, 1 9 9 0 , 1 2 ( 8 ) : 2 3 3 1 吴大正, 宋纯清, 韩之芬, 等. 当归补血汤对心肌缺血再灌注 损伤大鼠 心功能的 作用【 J . 中 药药理与临床, 1 9 9 9 , 1 5 ( 5 ) : 1 中医药 1 6 4 6 收稿日 期: 2 0 0 6 - 0 3 - 0 9 4 0 基金项目: 教育部青年骨干教师科研基金资助项目( 2 0 0 0
11、6 5 ) 作者简介: 王滔( 1 9 6 8 一 ) , 男, 广州梅州人, 讲师, 学士, 主要从事高 校体育教育研究。 学刊 第9期王滔等: 丹参饮应用于运动损伤性血癣证治疗机理的实验研究 灌胃 后2 h 行完全结扎术, 对照组仅穿线不结扎。心肌组 织切片的制备: 实验结束后处死动物, 摘取动物心脏于4 % 多聚甲醛中固定, 常规石蜡包埋, 每隔I m m横断面切数张 4 t,m厚的切片, 分别做H E 染色及细胞凋亡检测。 1 . 4 心肌细胞凋亡原位标记检测及计算机图象分析 每 张切片取3 个不同部位的切片各2 张, 以脱氧核昔酸转移 酶( T d T 酶) 介导的荧光的d U T
12、P 缺口末端标记法( T d T - m e d i a t e d fl u o r e s c e i n 一 d U T P n i c k e n d l a b e li n g , T U N E L ) 标记 凋亡细胞核D N A 3 、 一 O H末端。其主要步骤为: 切片常规脱 蜡人水, 标本片加T B S 1 : 2 0 0 新鲜稀释 P r o t e i n a s e K 3 7 消化 1 5 m i n , 0 . 3 % H 2 0 : 甲醛灭活内源性过氧化物酶( P O D ) 活 性, 加人T U N E L 混合液( 含 T d T 酶及 fl u o r
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- 丹参 应用于 运动 损伤 性血瘀证 治疗 机理 实验 研究
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