磷酸化的SurvivinThr34蛋白在胃癌中的表达.pdf
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1、 海南医 学 2 以 犯年第19卷第4 期 文章编号: 1 的3 ee6 3 5 0 2 (X)8 ) 以-1 5 8 一 刃 2 实验研究 磷酸化的Surv ivin Thr3 4 蛋白在胃癌中的表达 王 壮 , 郑长青2 ( 1 、 广东医学院附 属医院, 广东 湛江 5 2 4 001 ; 2 、 中国医 科大学附 属二院) 摘要目的 研究磷酸化的, vi n 侧 巨 34在胃癌中的表达及分布。 方法 用免疫组化方法检侧手术切除和 内窥镜活检的胃良恶性组织中磷酸化的, vi n 叭 比 34表达情况。 结果磷酸化的。 明i v in 们 肚 34蛋白在胃癌标本 中的阳 性表达率为76.7
2、 9 %, 与患者的性别、 年龄、 组织分化程度、 病理分期无关, 与其在胃良 性病变标本中的阳 性 表达( 35.29% ) 相比 较, 六15 .3 2 , 差异有显著性( P 0 .01) 。结论 叨 廿 34可能是影响。 uzvivin 功能的位点。 关镇词生存素; 胃癌; 苏氨酸34 中图分类号: R 一 3 3 文献标识码: A 几r 侧 甲 目 口肠 咖 5 1 1 , 1 喇 匕 们 比 34 E x P r . .玩 G 到 蛇 创 让C 盯 d . 0 . . W ANGZhuan g l, z H E N GC 肠 功 g es Q i 心 (l.A 伍1 过曰 h os
3、 P i 回 ofGuangdo ng 此di 侧 公coll e 罗 524 叨1; 2 肠e nd aJ 断 1 认 t 曰 h 加 p i 以 ofC 肠 口 曰1 司 画, i ty) A 肠 。 , Cto bJ 耽 肠 姐 we s t u d ythe p haP b 卿lat曰 。 行 。 们 巨 34 dis州 b ut 曰 in目 姐 tn oc 二,M e 比 “. W euse nlununohi s t OC he 而回 tec俪甲etod e t e 改the e 却n , 姻 i on 试p h OS p h ory垃ed o u 到 i v i n 升r 34
4、in名 as 肠 cti 卜 su .s pe c l 毗ns6 刀 ms u 心cal 比 sectionandend P icbi o ps y . R es ul ts仆e别 龙 iti vee xP i on rate ofp ho叩 ho- 尽 h 盆 记 仙访 vi n 叭 比 34 w as76.7 9 %instOInac h二 m 姻氏衍tC hb ad no r e h 心 on 初 thse x,叫 笋 , 山 玉此 n 6 a t 曰 坛 卜 tologi山 脚d ean dPathol哈以 s tages , 即 d加 m 洲初 e 冲 ion 毗 af阮ni gn
5、lesion(35.2 蝇) , 六15.32尸 0:0l Cond心ons The肠x 34 砚 旧 ybe an id 已 目 】 ysi tetoi nnuence th e vingfu ncti 呱 K 叮 , 价山 s u 月 i vi ng; g ” 州c州 i n o 口 叫叭即址 ne34 胃癌是我国人群中常见的恶性肿 瘤, 其发病的分子病理学基础还不清楚。 胃癌不仅是增殖和分化异常的疾病, 也 是凋亡异常的疾病。 胃 癌病变过程中, 细 胞凋亡减少、 增殖增加, 可能与细胞调控 失调有关111 。 目 前研究集中在一种新的凋 亡蛋白s u 州vi n(生存素) , 它是凋亡
6、抑制 蛋白家族中的一员, 在大多数人类的恶 性肿瘤中表达, 使细胞逃避凋亡和有丝 分裂过程异常。 S u rV i v in在胚胎发育和人 的恶性肿瘤转化的细胞系中表达, 而在 终末分化的成熟组织中基本不表达。蛋 白磷酸化参与细胞凋亡途径的调节, 影 响亚细胞定位、细胞保护、细胞周期进 程, 近来研究发现s u ZV i vin 的 第34位苏 氨酸( 叨 廿 34) 在C 刀 M期被细胞周期依赖 性激酶复合物( P34c d cZ一y clinBI)磷酸 化。 5 山 对 vi n 变异体闭阮 抖一 沮a , 34位的 苏氨酸被丙氨酸取代) 的表达, 可引起人 黑色素体细胞系的凋亡, 并可增
7、加对化 疗药物的敏感性门 。 本研究初步探讨磷酸 化的. 明 i vi n T hr 3 4 在胃癌组织中的分布 情况, 以期为胃 癌细胞的凋亡提供新的 干预靶点。 1 实验材料和方法 L l 材料:中国医科大学附属二院 2 (X)1 一 2 (X)3 年手术切除和内窥镜留取的 石蜡块标本:胃 腺癌病理标本56例, 患 者均未接受放疗和化疗治疗, 苏木素一 依 红染色切片有两位以上病理专家明确诊 断, 按分化程度及P 】 ,N M ( 1 998 年国际抗 癌联盟公布的分期标准)进行临床病理 分组。胃部良 性病变标本34例( 慢性萎 缩性胃 炎无肠上皮化生12例,胃 溃疡8 例, 炎性息肉3
8、例, 慢性浅 表性胃 炎11 例) 。 标本采用1 0 % 甲 醛固 定, 石蜡包埋, 常规连续4 帅 切片。 1 .2 试剂:磷酸化的s IJ 到 j vi n 们 肚 34 由羊抗人多克隆抗体, 购于S untaC ruz 公司。 过氧化物酶标记的链霉卵白 素染 色 试剂盒: 封闭正常免血清工作液6 d, 生物素标记兔抗山羊I gG6 d, 过氧化物 酶标记链霉卵白素工作液6 时, D A B 显 色液, 购于中山公司。 1 3 免疫组织化学染色: 将石蜡切 片脱蜡, 3 % H 刃 2 溶液孵育20分钟, 消除 内 源性过氧化物酶。 微波修复, 正常 兔血 清进行封闭, 将封闭血清甩掉,
9、 滴加1 潮 作者简介: 王 壮(l 977 一 刃 8 ) , 女, 辽宁省辽中 人, 医师, 硕士。 1 5 8 万方数据 海南医学 2 仪 龙年第19卷第4 期 的一抗, 在37 温箱中 孵育2 小时。 滴加 二抗, 在37 温箱中孵育20分钟。 滴加 S P 复合物, 在3 7 温箱中孵育巧分钟。 D 妞 显色2 一 5 分钟, 苏木素复染30秒, 脱水、 透明、 封片。在粼 刀倍放大的显微 镜下计数至少5 个随机视野, 取平均值, 阳性细胞数小于1 0 叹 为阴性, 余下为阳 性。阳性细胞数占1 0 一 29% 为+ , 30一 5 9% +, 印%以上为+ + + , 采用盲法计数
10、气 1 .4 统计学采用分检验, 判断样本 的差异有无统计学意义。 2 结果 2. 1 磷酸化的 5 , vinThr 抖 (P- vi n 们 肚 3 4) 在5 6 例胃癌标本中的阳 性表达率为76.7 9 气 , , 在34例胃良 性病 变标本中的阳性表达率为353 %, xZ= 巧 .3 2 , p 0.0 1 , 有统计学意义。 免疫组化 显示它主要分布在癌细胞的胞浆中。同 一胃癌组织中p 一 s tirViv in 们 肚 3 4 阳 性染色 的细胞分布均一, 显色强度也基本一致。 癌旁的邻近组织中也有p 一 。 vi n 几r34 的阳性表达。 2. 2 磷酸化的5 , 朽 n
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