新课标人教版高中生物选修三专题一《DNA 重组技术的基本工具》精品课件.ppt
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1、生长快、肉质好的转基因鱼(中国),乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),过程分析,1.1 DNA重组技术的基本工具,DNA重组技术的基本工具,准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) 基因转移工具(“分子运输车”),基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:,识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。,主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶
2、。,4000种。,形成两种末端,一、 “分子手术刀” 限制性核酸内切酶,大肠杆菌的一种限制酶(EcoR)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端。 Sma能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端 。,重播,限制酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平末端是如何形成的?,什么叫黏性末端?,当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。,什么叫平末端?,当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。,基因的针线DNA连接酶,切断的D
3、NA片段要与受体细胞的DNA连接,你觉得可以用什么酶?,DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点?,限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择?,E.coliDNA连接酶:连接黏性末端,T4DNA连接酶:连接黏性末端和平末端,基因进入受体细胞的载体,要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。,载体必须具备的条件,如果载体对受体细胞有害将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,没有标记基因我们能否鉴定? 假如目的基因导入受体细胞后不能复
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