2019-2020学年生物高中人教版选修1检测:专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含解析.pdf
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1、课题课题 3 血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离 基础巩固 1 电泳过程中,什么样的分子迁移速度最快?( ) A.纤维状、大分子 B.纤维状、小分子 C.球状、大分子D.球状、小分子 解析:电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大 小、形状的不同将样品中各分子分离。一般来说,球状分子比纤维状分子移动速 度快,小分子比大分子移动速度快。 答案:D 2 蛋白质提取和分离分为哪几步?( ) A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化 C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定 答案:C 3 凝胶
2、色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是( ) A.多糖类化合物B.脂质 C.蛋白质D.核酸 答案:A 4 洗涤红细胞时,所采用的离心方法是( ) A.低速长时间离心 B.低速短时间离心 C.高速长时间离心 D.高速短时间离心 解析:高速或长时间离心,会导致白细胞和淋巴细胞等一同沉淀,得不到纯净的红 细胞,进而影响血红蛋白的提取纯度。 答案:B 5 在蛋白质的提取和分离中,下列关于对样品处理及粗分离过程的分析,正确的 是( ) A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果 C.洗涤过程选用质量分数为 0.1%的 NaCl 溶液
3、D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 解析:洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白;洗涤时离心速度过高、时间过长, 白细胞等会沉淀,达不到分离的效果;洗涤过程应选用质量分数为 0.9%的 NaCl 溶 液。 答案:D 6 下列关于凝胶色谱柱装填的叙述,错误的是( ) A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75)中“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离 范围,75 表示凝胶得水值 B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装 C.用 300 mL 物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶 12 h D.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液 解析:
4、本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75),其中 G 表示凝胶的交联程 度、膨胀程度及分离范围,75 表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水 7.5 g;气泡 会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重 装;在洗脱过程中,应在约 50 cm 高的操作压下,用 300 mL 物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶 12 h,以使凝胶装填紧密;装填色谱柱前, 应使用蒸馏水将凝胶充分溶胀,制成凝胶悬浮液。 答案:D 7 下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作,错误的是 ( ) A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐
5、B.让吸管管口沿管壁环绕移动,贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面 C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱 D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,每 5 mL 收集一管,连续收集流出液 解析:加样后,打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口,再小心加入 适量的物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液,然后连接缓冲液洗脱瓶开始洗 脱。 答案:C 8 将经破裂处理后的红细胞混合液以 2 000 r/min 的速度离心 10 min 后,离心管 中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是( ) A.血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层 B.甲苯层、沉淀层
6、、血红蛋白、脂溶性物质层 C.脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层 D.甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层 解析:混合液经离心后,按密度大小排列,在离心管中从上到下,第 1 层为无色透明 的甲苯层,第 2 层白色薄层固体是脂溶性物质沉淀层,第 3 层红色透明液体是血红 蛋白溶液,第 4 层暗红色沉淀物主要是红细胞破碎物沉淀。 答案:D 9 某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从羊的血液中初步提 取血红蛋白,设计的血红蛋白提取、分离流程图如下: 实验准备(配制缓冲液、血细胞悬液)样品处理(洗涤、破碎、离心等)蛋白 质粗分离(透析)纯化、纯度鉴定(凝胶色谱法、电泳等) 请回答下
7、列有关问题。 (1)样品处理中红细胞的洗涤要用 反复冲洗、离心。向红细 胞悬液中加入一定量的低浓度 pH=7.0 的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破 碎细胞的原理是 。 (2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是 。若要尽 快达到理想的透析效果,可以 (写出一种方法)。 (3)电泳利用了待分离样品中各种分子的 等 的差异,使不同带电分子产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。 (4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患 者的血红蛋白电泳结果如下图所示。由图可知,携带者有 种血红蛋 白,从分子遗传学的角度做出的解释是 。 答案:(1)生理盐水 渗透原理(当外界溶液浓
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