2020届高三生物第二轮复习课件:第15讲 生物技术实践.pptx
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1、第15讲 生物技术实践,知识联网,参考答案 灭菌 尿素 稀释涂布平板 纤维素 刚果红 染色法 乳酸菌 水蒸气蒸馏法 萃取法 纸层析,记一记 1.理清微生物的培养的基本技术 (1)培养基的制备:计算称量溶化灭菌倒平板。 (2)无菌技术 消毒:煮沸消毒法、巴氏消毒法以及使用化学试剂进行消毒。 灭菌:对培养基进行灭菌,常采取高压蒸汽灭菌;对接种环灭菌采取灼 烧灭菌;对玻璃器皿灭菌采取干热灭菌。 (3)微生物的纯化技术 平板划线法: 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步 稀释分散到培养基的表面。,稀释涂布平板法: 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将其分别涂布到琼脂固体培养基的
2、 表面,在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单 个菌落。 (4)倒平板操作:待培养基冷却至50 左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。,2.区分“4”种传统发酵食品的生产技术,3.区别记忆三种成分的提取方法 (1)玫瑰精油的提取,(2)橘皮精油的提取 (3)胡萝卜素的提取,辨一辨 ( )1.果酒发酵中期通入氮气,酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸。 (2017江苏单科,25B) ( ) 2.果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关。(2017江苏单科,25 C) ( ) 3.用葡萄制作果醋时,若先通入空气再密封发酵可以增加醋酸含量 提高品质。(2016四川理综,3B) ( ) 4.控制
3、发酵温度的主要目的是腐乳调味。(2017江苏单科,10A) ( ) 5.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用。(2017江苏单科,10 B) ( ) 6.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉。(2017江苏单科,10C),( ) 7.成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生。(2017江苏单科,10D) ( ) 8.腐乳坯若被细菌污染,则腐乳坯表面会出现黏性物。(2015江苏单 科,17B) ( ) 9.勤向腐乳坯表面喷水,有利于毛霉菌丝的生长。(2015江苏单科,17 C) ( ) 10.腐乳的制作装坛阶段加入料酒,可有效防止杂菌污染。(2015江 苏单科,17D),答案 1. 2. 3. 4. 5
4、. 6. 7. 8. 9. 10.,总纲目录,高频命题点1 微生物的分离和培养 新题速递 1.(2017湖南郴州第四次质检,37)分解尿素的微生物广泛存在于农田等 土壤中,某生物实验小组尝试对分解尿素的微生物进行分离与计数。请 回答下列问题: (1)分解尿素的微生物含有的酶是 ;配制培养基时应以 作为唯一氮源。 (2)培养基中添加 作为指示剂,培养后,培养基pH会 (填 “升高”“降低”),可使指示剂变红色。 (3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 。 (4)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这,样做的目的是 ;然后将1 mL样液稀释10 000倍,在3个平板上用涂布法分
5、别涂布0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个 平板的菌落数分别为39、42和45。据此可得出每毫升样液中分解尿素 的微生物活菌数为 个。,答案 (1)脲酶 尿素 (2)酚红 升高 (3)过滤法 (4)检测培养基平 板灭菌是否合格 4.2106 解析 (1)分解尿素的微生物含有的酶是脲酶;配制培养基时应以尿素 作为唯一氮源。(2)在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶分 解尿素可产生氨,氨会使培养基的pH升高,进而使酚红指示剂变红。(3) 对尿素溶液进行灭菌的最适方法是过滤法。(4)在接种前,随机取若干 灭菌后的空白平板先培养一段时间,其目的是检测培养基平板灭菌是否 合格。每毫升样液中分解尿
6、素的微生物活菌数=(CV)M=(39+42+45)3 0.110 000=4.2106(个)。,2.(2017湖北调研,37)欲从腐乳中分离筛选出产蛋白酶活力高的毛霉菌 株,设计了如下实验流程:,(1)毛霉属于 核生物。在腐乳制作中,主要利用毛霉等微生物 产生的 酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分 子物质。 (2)步骤进行涂布前,需将孢子悬浮液进行梯度稀释,进行梯度稀释的 目的是 。若进行10倍 稀释,一般吸取1 mL悬浮液注入 中,混匀。,(3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌,在孟加拉红培养基中加 入氯霉素可以抑制细菌的生长。从功能上看,孟加拉红培养基属于 培养基。 (4)毛霉产生的酶
7、能将酪蛋白分解而产生透明圈,在酪蛋白培养基中筛 选到三个单菌落甲、乙、丙,其菌落直径分别为3.2 cm、2.8 cm、2.9 cm,其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7 cm、3.5 cm、3.3 cm。应选 择菌落 作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。,答案 (1)真 蛋白酶和脂肪 (2)增加悬浮液的稀释度,涂布培养能分 离到单菌落 9 mL 无菌水 (3)选择 (4)乙 解析 (1)毛霉属于真核生物。在腐乳制作中,主要利用毛霉等微生物 产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。 (2)将孢子悬浮液进行梯度稀释的目的是增加悬浮液的稀释度,涂布培 养能分离到单菌落。若进行10倍稀
8、释,一般吸取1 mL悬浮液注入9 mL 无菌水中,混匀。(3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌,据此可 知:从功能上看,孟加拉红培养基属于选择培养基。(4)毛霉产生的酶能 将酪蛋白分解而产生透明圈,透明圈与菌落直径的比值反映了毛霉菌株 产蛋白酶活力的能力,因此应挑选透明圈与菌落直径比值最大的菌体。 依题意可知:筛选到的三个单菌落甲、乙、丙的透明圈与菌落直径的比,值最大的为乙,所以应选择菌落乙作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。,整合突破 1.培养基制备与微生物纯化技术,2.特定微生物的筛选 (1)原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等),同时抑制或阻止其他微生物的生长
9、。 (2)实例:培养基以尿素为唯一氮源可筛选到尿素分解菌;培养基以纤维 素为唯一碳源,可筛选到纤维素分解菌。,3.生物技术实践相关试题的解题策略 (1)快速确认两类培养基 鉴别培养基:加入的物质起“鉴别”作用(该物质可能与被鉴别菌种 发生特殊颜色反应),该物质加入后并未杀死其他微生物,其培养基中可 生存多种微生物。 选择培养基:加入的物质起“筛选”作用,该物质可抑制或杀死其他 微生物,只有被选择的“目的菌种”才能生存下来。 (2)平板划线法与稀释涂布平板法区别的分析 平板划线法适用于微生物的纯化,但不能用于微生物的计数。 稀释涂布平板法常用于活菌计数,而显微镜直接计数法不能区分菌体 的死活。用
10、稀释涂布平板法进行计数时,为了保证结果准确,一般选择,菌落数在30300的平板进行计数。,经典再练 1.(2017广东惠州模拟,37)日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视 和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题: (1)该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、 。,(2)据图,两电视台均采用 法接种,该方法需要 (多 选)。 A.接种环 B.酒精灯 C.移液管 D.涂布器 E.无菌水 (3)通过观察菌落的 ,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种 微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同, 你认为原因是: 。 (4)按图操作取样面积,实验员测定某手机屏幕的细菌
11、数量,将10 mL菌 悬液进行梯度稀释,分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个 培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏 幕的细菌数为 个/平方厘米 。该实验对照组该如何设 置? 。,答案 (1)氮源和无机盐 (2)稀释涂布平板 BCDE (3)形态、大小 手机的取样和马桶的取样都不相同 (4)2104 取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养 解析 (1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。 (2)根据图形分析,该实验的接种方法为稀释涂布平板法,该方法用到的 工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。(3)不同的菌落形态、大 小不同,图示
12、两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌 落,即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道 结果截然不同,可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。(4)根 据提供的数据进行计算,某手机屏幕的细菌数=(48+50+52)31020.1,10(55)=2104(个/平方厘米)。,2.(2017吉林长春二模,37)下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及 相关图解。 实验步骤: 把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表 面,进行培养。 待其长出密集的小菌落后,用影印法接种到不含链霉素的培养基2上, 随即再影印到含有链霉素的培养基3上,进行培养。 在培养基3上
13、出现了个别抗链霉素的菌落,将其挑选出。,请回答: (1)配制培养基时除了满足基本的营养条件外,还需满足微生物生长对 特殊营养物质、 、 的要求。 (2)从功能上看,含有链霉素的培养基属于 培养基。若在培养,基中加入伊红和美蓝,则培养皿中长出的菌落颜色为 。由图可 知,1号培养基接种的方法为 。 (3)对2和3进行比较,在2上找到与3上相应的菌落,挑取其中一个菌落接 种到 (含链霉素/不含链霉素)的培养基上,如果有较多 的菌落出现,则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之 (前/后)。 (4)3中的菌落比1、2中的菌落少很多,这说明了基因突变具有 的特点。,答案 (1)pH 氧气 (2)选择
14、黑色 稀释涂布平板法 (3)含链霉素 前 (4)频率低/低频性 解析 (1)配制培养基时在提供几种基本营养条件的基础上,还需满足 微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。(2)链霉素是抗生 素,对大肠杆菌具有选择作用。在伊红和美蓝培养基上,大肠杆菌菌落 颜色为黑色。由题图可知,1号培养基接种的方法为稀释涂布平板法。 (3)培养基2和培养基3上相同的菌落,是具有相同性状的大肠杆菌形成 的,将培养基2中一个相应菌落接种到含链霉素的培养基上,若出现较多 的菌落,则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之前。(4)抗链,霉素性状是大肠杆菌基因突变后获得的性状,3号培养皿中的菌落比1 号、2号中的
15、菌落少很多,这说明了基因突变频率很低。,高频命题点2 传统发酵技术的应用 新题速递 1.(2017安徽六安一中第二次月考,31)运用所学知识回答下列与生物技 术实践相关的问题:,(1)自古酒就与人类生活息息相关。在图中所示两发酵瓶中装入等量的 葡萄汁进行果酒制作实验,若在A装置的通气口补充无菌空气,那么一段 时间后,能获得葡萄酒的是 装置。发酵是否成功可用 对发酵产物进行检验确认。 (2)图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图。点加提取样品的是 点,鉴定实验的方法叫做 。 (3)微生物培养时,后期进行菌落统计时,一般选择菌落数在 的 平板进行计数。,答案 (1)B 重铬酸钾 (2)B、C 纸层析
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- 2020届高三生物第二轮复习课件:第15讲 生物技术实践 2020 届高三 生物 二轮 复习 课件 15 生物技术 实践
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