2020版生物新优化浙江大一轮课件:第十部分 生物技术实践 31 .pdf
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1、第十部分第十部分 生物技术实践生物技术实践 第第3131讲 微生物的利用讲 微生物的利用 考纲导学 -3- 考纲导学 -4- 教材梳理题型探究 大肠杆菌的培养和分离 1.细菌的培养 (1)培养基:扩大培养用 培养基,划线分离用 培养基。 (2)不同微生物对培养基的需求 蛋白胨 氯化钠 中性偏碱 蔗糖 中性偏酸 LB液体 LB固体平面 考纲导学 -5- 教材梳理题型探究 (3)培养的方法:需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中, 一般用 (工具)转移带菌的培养物。 2.细菌分离的方法与特点 3.无菌操作 (1)目的:防止实验室的培养物被其他 污染;避免 操作者自身被微生物感染。 微生物 接种环
2、 划线分离 涂布分离 考纲导学 -6- 教材梳理题型探究 高压蒸汽灭菌 尿素 碳化 500 g/cm2 酒精灯火焰 G6玻璃砂漏斗 (2)常用的几种灭菌方法 考纲导学 -7- 教材梳理题型探究 30 6080 冷却 冷却 过热杀死目的菌种 HCl 抽滤去酸 中性 考纲导学 -8- 教材梳理题型探究 4.大肠杆菌的培养和分离 (1)大肠杆菌 分裂方式: 。 特性:大肠杆菌是革兰氏 性、 (代谢类型) 的肠道杆菌,在肠道中一般对人无害,但若进入人的 系统, 就会对人体产生危害。大肠杆菌是 技术中被广泛采 用的工具。 (2)实验内容:将大肠杆菌扩大培养和划线分离,即用 培养基扩大培养大肠杆菌,培养后
3、再在 培养基上划线进行分离,随后培养基上就会 形成一个个单独的菌落。 二分裂 阴 兼性厌氧 泌尿 基因工程 LB液体 LB固体平面 考纲导学 -9- 教材梳理题型探究 (3)实验步骤 倒平板 高压蒸汽 三角瓶 连续划线 考纲导学 -10- 教材梳理题型探究 (4)大肠杆菌分离的用途:单菌落的分离是 的通 用方法,也是用于筛选 菌株的最简便方法之一。 单菌落 斜面 4 冰箱 消除污染杂菌 高表达量 考纲导学 -11- 教材梳理题型探究 考向一考向一 划线分离法和涂布分离法划线分离法和涂布分离法 【典例1-1】 如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、 2、3、4、5。下列叙述正确的是( )
4、A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B.划线操作时完全打开培养皿盖,划完立即盖上 C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的 D.第1区和第5区的划线最终要连接起来,以便比较前后的菌落数 答案解析解析 关闭 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,但划线过程中培养基不能进行 灭菌;进行划线操作时,左手将培养皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种 的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上培养皿盖;注意接种 时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的;第1区和第5区的划 线不能相连。 答案解析 关闭 C 考纲导学 -12- 教材梳理题型探究 【典例1-2】 用划线分离
5、法或涂布分离法纯化大肠杆菌时( ) 可以用相同的培养基 都需要使用接种环进行接种 都需要在酒精灯火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌 A. B. C.D. 答案解析解析 关闭 划线分离法或涂布分离法都使用固体培养基,故正确;划线分离法采用 接种环进行操作,而涂布分离法采用涂布器(玻璃刮刀)进行操作,故错 误;纯化时,要进行无菌操作,需要在酒精灯火焰旁接种,避免空气中的微 生物混入培养基,故正确;划线分离法一般用于分离而不是计数,故 错误。 答案解析 关闭 C 考纲导学 -13- 教材梳理题型探究 概念辨析微生物接种的两种常用方法比较 考纲导学 -14- 教材梳理题型探究 考向二考向二 无菌操作无
6、菌操作 【典例1-3】 下列有关微生物培养的叙述中,不正确的是( ) A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B.单菌落的分离是消除污染的杂菌的通用方法 C.培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌 D.倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 答案解析解析 关闭 微生物培养中获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染,A项正确;通常可 以采用涂布分离法或划线分离法进行单菌落的分离,以消除污染的杂 菌,B项正确;培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌,但对于培养基中有高温 易分解的成分,就不能用此方法,如培养基中的尿素等物质,C项错误;划 线接种结束后需要将培养皿倒置,以防止培养基蒸发冷凝成的水滴入培 养基而造成污染,D
7、项正确。 答案解析 关闭 C 考纲导学 -15- 教材梳理题型探究 【典例1-4】 (2018浙江选考十校联盟3月适应性考试)回答下列 与微生物的培养和利用有关的问题。 (1)微生物在试管中培养时通常加棉塞,周围没有皱褶和缝隙,容 易拔出,但用手提着棉塞时,试管又不能落下。棉塞的作用有两个: 一是 ;二是保证通气良好。制作棉塞 所用的棉花不能用脱脂棉,原因是 。 (2)测定微生物生长曲线的方法有很多,有血细胞计数板法、平板 计数法、 法等。制作生长曲线时,以 作纵坐标, 作横坐标。 (3)牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础 培养基,一般要将pH调至 ,以利于细菌的生长繁 殖。
8、 考纲导学 -16- 教材梳理题型探究 答案:(1)防止杂菌污染 脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染 (2)菌落 比浊 菌数的对数 生长时间 (3)中性偏碱 解析:(1)微生物培养过程中棉塞既可以防止杂菌的污染,又可以 保证通气良好。因为脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染,所以制 作棉塞所用的棉花不能用脱脂棉。 (2)测定微生物生长曲线的方法有很多,有血细胞计数板法、平板 菌落计数法、比浊法等。制作生长曲线时,应以菌数的对数为纵坐 标,生长时间为横坐标。 (3)培养一般细菌时,需要将培养基的pH调至中性偏碱。 考纲导学 -17- 教材梳理题型探究 概念辨析消毒与灭菌 考纲导学 -18- 教材梳理题
9、型探究 考向三考向三 大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离 【典例1-5】 (2018浙江丽水学院附中阶段考)下列是有关大肠杆 菌的培养实验,请回答问题。 (1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的 规律,通常在培养基中加入蛋白胨和 作为营 养物质,为维持一定的渗透压,常需加入一定量的 。 考纲导学 -19- 教材梳理题型探究 (2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在 中 进行扩大培养,培养液经 后,在LB固体培养基 上进行 ,并将培养皿 放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。为了检测接种、培养 过程是否受杂菌污染以及 ,应同时将未 接种的培养基放入相同条件的恒温培养箱培
10、养。 (3)对获得的纯菌种通常可以依据 的形状、 大小等特征进行初步的鉴定。 考纲导学 -20- 教材梳理题型探究 (4)下列关于“大肠杆菌培养和分离”的操作中,叙述正确的是( ) A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启 锅盖 B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上 C.为了防止污染,接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上 答案:(1)酵母提取物 NaCl (2)LB液体培养基 稀释 分离 倒置 无菌操作是否规范 (3)菌落 (4)D 考纲导学 -21- 教材梳理题型探究 解析:(1)配制培养大肠杆菌的培
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