2019-2020学年人教版生物选修3(课件)1.2 基因工程的基本操作程序 .ppt
《2019-2020学年人教版生物选修3(课件)1.2 基因工程的基本操作程序 .ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《2019-2020学年人教版生物选修3(课件)1.2 基因工程的基本操作程序 .ppt(25页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、目标导航,预习导引,1.简述基因工程的原理及基本操作程序。 2.能根据基因工程的操作程序设计出某一转基因生物的研制过程。,目标导航,预习导引,一,二,三,四,一、目的基因的获取 1.从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 基因文库包括两种:基因组文库,即包含一种生物所有基因的文库;部分基因文库,即只包含一种生物的一部分基因的文库,如cDNA文库。,目标导航,预习导引,一,二,三,四,2.利用PCR技术扩增目的基因 (1)PCR的含义:一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 (2)目
2、的:短时间内大量扩增目的基因。 (3)原理:DNA双链复制。 (4)过程 第一步,加热至9095 ,DNA解链为单链。 第二步,冷却至5560 ,引物与两条单链DNA相应互补序列结合。 第三步,加热至7075 ,热稳定DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始进行互补链的合成。 如此重复循环多次。 (5)特点:指数形式扩增。,目标导航,预习导引,一,二,三,四,3.用化学方法人工合成 如果基因比较小,核苷酸序列又已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。,目标导航,一,二,预习导引,三,四,二、基因表达载体的构建 基因表达载体的组成:必须有启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。 1.启动子
3、 启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,可驱动基因转录。 2.终止子 终止子也是一段有特殊结构的DNA短片段,位于基因尾端,使转录在需要的地方停止。 3.标记基因 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。,目标导航,一,二,预习导引,三,四,三、将目的基因导入受体细胞 1.转化 目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。 2.常用的导入方法 (1)将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法。 (2)将目的基因导入动物细胞:最常用的方
4、法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。,目标导航,一,二,预习导引,三,四,(3)将目的基因导入微生物细胞:Ca2+处理法。 用Ca2+处理细胞,使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。 将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。,目标导航,一,二,预习导引,三,四,四、目的基因的检测与鉴定 1.首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用分子杂交技术。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,从
5、分子水平检测的方法是采用抗原抗体杂交技术。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如需要做抗虫或抗病的接种实验等。,知识梳理,典例透析,一、获取目的基因的方法比较,知识梳理,典例透析,二、基因表达载体的构建 1.基因表达载体的组成及作用,知识梳理,典例透析,2.构建过程,特别提醒不同基因可以拼接的原因:不同生物的基因具有相同的结构和化学组成,都是双螺旋结构,都由四种脱氧核糖核苷酸组成;都遵循碱基互补配对原则,即AT、GC。,知识梳理,典例透析,3.几点说明 (1)基因表达载体载体:基因表达载体与载体相比增加了目的基因。 (2)目的基因的插入位点不是随意的:基因表达需要启动子与终止子的调控,所以
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 2019-2020学年人教版生物选修3课件1.2 基因工程的基本操作程序 2019 2020 学年 人教版 生物 选修 课件 1.2 基因工程 基本 操作 程序
链接地址:https://www.31doc.com/p-4931945.html