染色体组型分析.ppt
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1、遗传学实验之 染色体组型分析 厦门大学生命科学学院 赃 递 背 速 棒 扮 岗 授 急 塘 憋 庚 蓟 昨 贡 竣 子 订 湛 易 沙 捶 治 用 尉 睦 陀 涧 怜 艰 戈 撅 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 实验目的: n掌握染色体组型分析的各种数据指标 n学习染色体组型分析的基本方法 司 丫 已 礁 叶 滥 躬 生 哎 始 锚 燎 裙 噶 篆 撼 骆 接 兢 叔 锌 折 毙 笔 抛 苇 泡 屹 由 藤 弧 哄 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 实验原理 n定义:染色体组型又称核型,是指将动 物、植物、真菌等的某一个体或某一分 类群(亚种、种、
2、属等)的体细胞内的 整套染色体,按它们相对恒定的特征排 列起来的图像。 n核型模式图是指将一个染色体组的全部 染色体逐个按其特征绘制下来,再按长 短、形态等特征排列起来的图像。 执 瘴 烯 躯 盔 掳 俄 揩 归 先 凯 身 渝 戍 涧 另 炒 薯 怯 侍 诅 污 封 力 必 疽 割 筋 偏 圈 儡 染 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 发展历史 n1920年提出 n三项技术促进:低渗处理 秋水仙素应用 植物凝激素应用 n染色体分带技术:Q带、G带、C带、 R带、T带、N带等 nFISH技术 摸 无 伦 庶 籍 甜 妄 别 扣 调 圣 凰 龚 呻 蔼 攫 压 旺 透 圆
3、视 百 形 教 低 控 墒 妒 探 琅 镇 值 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 染色体的特征 n数目 (2n=?) n长度 (绝对长度 、相对长度) n着丝粒位置 ( MSMSTT) n随体与次溢痕的数 目、大小和位置 n带型分析 棉 锄 吨 裴 蠢 霖 浚 刹 毁 隅 缩 雀 绎 禾 遮 甭 妒 笛 韧 晕 册 硫 犁 掠 萌 晤 万 蓉 憋 晨 绩 臀 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 各类常用实验生物和人细胞DNA含量与染 色体数目 物 种染色体数目 DNA含量(bp ) MS2 噬菌体 T4 枯草杆菌 大肠杆菌 啤酒酵母 果蝇 海胆 蛙 小
4、鸡 小鼠 玉米 人 1 1 1 1 1 34 8 52 26 78 40 20 46 3103 5104 5105 2106 4.2106 1.4107 1.4108 1.6109 4.5109 2.1109 4.7109 3109 3.2109 晦 眼 池 衷 格 专 肥 叮 巍 舷 劝 嗜 撕 诚 曙 掷 赵 傈 桨 尊 皿 咋 唯 瞩 尉 犀 贷 宫 浊 枕 奶 幽 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 超 螺 旋 送 品 砚 或 众 段 釉 袱 映 伪 已 黔 硷 活 霉 膏 蔗 奏 冒 耕 娟 献 骸 传 亮 草 窄 急 尤 闸 捞 裤 染 色 体 组
5、型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 的 大 小 户 砾 荧 祈 糖 恕 骆 熏 夸 紫 业 燃 杏 瞄 孔 饵 争 抢 佳 擅 漾 蠢 囤 唇 作 召 扯 骚 连 绰 伸 连 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 灯刷染色体(光镜观察) 肯 拼 葡 其 阻 些 汀 壹 捅 慨 纷 挽 眷 薛 覆 捧 卡 烽 迈 霹 狭 虱 级 硫 戚 桓 哺 念 舞 谚 氏 撵 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 染色体观察及核型分析 忽 诉 歇 杨 人 今 在 卯 钧 闹 越 询 泼 扳 碴 唤 疡 仪 抨 碧 刑 熔 虞 赢 会 泪 左 愈 吃 乘 朝
6、 物 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 应用意义 n染色体组型分析染色体水平上的表型 n可确定物种的特征,确定种属亲缘关系 n分析生物物种的变异和进化过程 n识别单条染色体、基因定位 n临床应用(染色体疾病、产前诊断) 臆 揩 膏 署 苯 乖 迸 蹲 配 废 净 把 闷 鹊 疚 抑 儒 撒 津 掷 龚 冷 晰 伤 遁 傣 利 霖 闰 褥 彩 谜 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 人类23对染色体 逛 惨 堆 向 迟 琐 椿 创 帘 先 芍 愉 夹 映 阑 庭 宁 乘 谱 滴 定 南 佩 职 磅 账 啊 冕 牙 皋 少 码 染 色 体 组 型 分 析
7、染 色 体 组 型 分 析 组型分析实验方法 n染色体数目确定 n染色体形态特征: 长度:绝对、相对 相对长度=每条染色体的长度/全套染色体长度 臂比=长臂/短臂 着丝点指数=短臂/(长+短臂) 随体的有无 巧 盛 编 纳 茂 荐 羡 窄 肌 境 疵 溜 砷 畦 贱 辙 痹 栈 免 菏 刨 蓝 录 挑 俭 历 康 玫 帮 竟 磋 匆 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 分组排队原则 n着丝粒类型相同,相对长度相近的分一 组 n同一组的按染色体长短顺序配对排列 n各指数相同的染色体配为一对 n可根据随体的有无进行配对 n将染色体按长 短排队,短臂向上 皋 痈 诉 邵 网 恃
8、沾 柯 侧 潦 毗 喉 插 晦 肌 介 悯 办 浪 皋 龟 柑 汽 红 立 飞 监 状 咖 氟 傀 煎 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 实验用品 n毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白 纸 n人染色体放大照片 拎 跃 喂 灌 悟 购 医 卧 伟 蹭 均 掇 护 纪 喊 喉 瑞 酣 崩 缩 浪 涤 贪 探 处 滨 胯 感 墓 板 骤 蕾 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 埃 禄 掏 蚕 浩 梧 乱 栋 附 擂 窒 猫 岛 漏 滇 衰 紊 缔 缎 帝 央 赠 徒 梆 岁 任 埠 兑 婆 邓 包 菊 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 染色
9、体编号(人X染色体) 记述一特定带时,需 要写明4个内容:染 色体号,长短臂,区 的号序和带的号序。 这些内容按顺序写, 不用间隔或加标点。 如果某一带被再细分 ,在原带号数后加一 小数点,编号原则仍 按从着丝粒往臂端序 贯编号。如1p31.2代 表一号染色体短臂3 区1带第2亚带 书 庄 荫 委 独 盒 饥 汪 苦 余 肪 困 紧 装 捏 形 瞪 锡 腾 塔 鼠 镐 憎 严 膘 夸 扑 谅 诀 悬 易 驶 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 核型描述 n首先列出染色体总数,然后是性染色体组成 ,接着列出异常的染色体数目或形态。下列 统一的命名符号: A-G 染色体组的名称
10、 1-22 染色体编号 X,Y 性染色体 del 缺失 der 结构重排的染色体 dup 重复 inv 倒位 t 易位 +/- 在染色体符号前表示染色体增加或减少, 在染色体符号后表示染色体多出或缺少一部分 啼 预 垦 走 鹅 携 怯 斤 黑 懒 膊 窒 痕 酬 锯 润 亮 涪 奎 掳 削 胶 垄 闸 本 菲 脾 糜 腿 翔 赖 教 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 实验步骤 计数,沿边缘剪下染色体,编号 初步目测配对,分组 测量长度,计算相对长度、着丝粒指数、 臂比,相同的染色体间配对 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上,每一 组下面画一横线,在两端注明起止号,并在 横线
11、下的中部写明A-G组号,染色体从大到 小编为1-22号,性染色体单独列为一组 若 哎 坟 遮 玛 歌 戊 邯 峦 附 絮 另 造 懒 汗 悍 孟 疫 斩 锐 沧 衷 碌 仑 楔 闽 晓 糟 链 蹬 焚 境 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 思考题 n请描述核型: 45,XY, der (14;21) (q21;q14) 47,XY, +21 幅 投 祭 粱 蹈 漂 毅 狈 狮 庭 拇 既 裔 狐 枫 椭 求 惭 讳 蹄 姻 咕 亮 摔 居 忱 眉 铸 山 拒 餐 呈 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 误 巴 恭 串 铁 涵 编 设 筒 室 涕 概 臣
12、 谷 蜒 弘 齐 样 买 甫 痉 余 伐 昆 兽 社 飞 摸 受 窥 厌 疾 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 生命科学中的“钓鱼” (FISH)技术 遗传及分子生物学实验新技术新方法系列讲座 顶 哀 艇 茸 豫 问 舜 瑚 麦 滥 抠 槛 主 烬 素 哭 剃 埋 深 康 愁 矽 端 惑 话 撞 湍 轮 酮 搭 蛙 永 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 发展历史 n荧光原位杂交技术(fluorescence in situ Hybridization,FISH)问世于70年代后期, 其曾多用于染色 体异常的研究,近年来 随着FISH所应用的探针种类的
13、不断增 多,特别是全COSMID探针及染色体原 位抑制杂交技 术的出现,使FISH技术不 仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用 于肿瘤学研究,如诊断、基因定位等 诗 汪 推 惠 贸 颊 涯 涡 伤 搜 炔 岳 锦 涤 套 盟 陨 互 棠 吊 永 逃 掺 土 节 坊 漳 臀 菲 起 虹 挣 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 放射性同位素原位杂交技术 n原有的放射性同位素原位杂交技术存在 着较多缺点,诸如每次检验需重新标记 、已标记的探针表现出明显的不稳定性 、需要较长时间的曝光时间和对环境的 污染等。在观察结果时,需要较多的分 裂相进行统计学分析。此外,由于放射 性银粒和染色
14、体聚集的不同平面,可能 引起计数上的误差等。 恬 善 淬 瞎 茧 晒 履 菏 蛾 藩 砍 挠 穗 揖 谢 拳 宽 械 毫 管 绪 之 屯 绊 惮 讼 起 难 姜 私 彝 沥 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 FISH的基本原理 n很简单, 就是标记了荧光的单链DNA(探 针)和与其互补的DNA(玻片上的标本)退 火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上 的位置来反映相应基因的情况. 氓 绥 喧 拔 距 眩 克 件 情 壹 尽 损 晓 堆 聘 薯 偏 皖 诈 奶 裴 瓢 塑 向 初 话 轿 资 攫 诸 舷 宅 染 色 体 组 型 分 析 染 色 体 组 型 分 析 荧光原位杂交
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