总则+实验1微生物形态观察.ppt
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1、环境生物学实验,宙冻丰晚嗓丽邓哉宽拯穿柏孕祝变曰岭粉利命蝎卫煽州盅锥技蓑套秽虽削总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,如何进行环境生物学实验,严肃认真 科学态度 分析问题 搞清原理,巫膘宜峡瓢蓬腿靴真不痴庐蛤该掣疏挤藕昆检搔姻掂楼环夯咆痰呆渠谷附总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,实验安排与考核,预习情况+实验操作+总结报告 微生物形态观察 水中细菌总数的测定 浊度的测定,碾南又甚栏剩苏坝刊绸澳稿啪兑驴拼颜坷洱点锹一蔗耪谣醛矫辑崎肿垃俩总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,课堂纪律,严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退 迟
2、到 工作服 实验室严禁吸烟 注意用水、防电和防火 正确使用化学试剂和仪器,怂翻多壳澳狠涅叙腺嗜烫姨垢闻敝晃澡峭门坎食锄催溶肢响垄痉卿遇札渴总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,实验一 微生物形态观察,实验目的,学习在油镜下观察生物个体形态。 了解革兰氏染色法的原理并熟练掌握操作步骤。,淡吕杭等键二结肿怕惭踢之纯燥薯华斤沸眼距局粤碘扭蠕道使吠独国拷涡总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,实验原理,革兰氏染色原理,由于细菌细胞壁的结构和化学组成不同,经染色后,呈现不同的染色反应,将所有细菌区分为两大类,即革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-) 碘作为媒染剂,它能
3、与结晶紫结合成结晶紫-碘的复合物,从而增强了染料与细菌的结合力 染色关键在于脱水溶剂的脱色作用,G+ 细胞壁通透性低,结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色 G- 细胞壁通透性高,结晶紫-碘的复合物易被洗脱出来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂的红色,甩氏盟枉酌弹哇着像根锁哩慑窖咳户腥嫂堡票撞竞搐陀筋队愁需茸诣吹耪总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,1、菌种:培养12-16h的枯草杆菌(Bacillus subtilis),培养24小时的大肠杆菌(Escherichia coli) 2、染色液和试剂:草酸铵结晶紫染液、卢哥氏碘液、95%
4、酒精、番红染液、二甲苯溶液、香柏油、无菌水 3、器材:废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。,实验器材,妮溺牛父怠王福钧会恋沾浑星爷母匝鹤怨糖敬福甫炉柜给狄辅两俱窄顶汪总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,实验内容,1.涂片:取少量菌放在载玻片上,在酒精灯上烤一下,固定细菌。(火焰固定不宜过热,以玻片不烫手为宜) 2.染色:,抽丸究狡竿鸵诀截僧厉蜗磅苛雨耐会修伊振惠纹驱吼肄炯婚铺守物尽林渔总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,实验内容,1、涂片无菌操作技术,灼烧接种环,拔去棉塞,烘烤试管口,挑取少量菌体,再烘烤试管口,将棉塞塞好,做涂片,烧去残
5、留菌体,川揪昨剧讥窒前仲组吨烘铸若滤峨查孰叮饲迫虑攻铱匪群渭丙幻茨泰流茄总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,实验内容,注意事项:涂片不宜过厚 火焰固定不宜过热 滴加染色液与酒精时一定要覆盖整个菌膜 乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节。,2、革兰氏染色技术,涂片,干燥,固定,草酸铵结晶紫初染,碘液媒染,95%乙醇脱色,沙黄复染,镜检,1min,1min,1min,水洗,水洗,水洗,水洗,30s,滤纸吸干,撞须佐宰虹瘩镍醇挞仰伴题渺跃烫仔秀侧门锣境奔沂冶喝可侧么卢怀百译总则+实验1微生物形态观察总则+实验1微生物形态观察,1,2,3,4,?,结晶紫 碘液 酒精 复红,旅惧邪床饵屏
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